Inligting

Hoekom gebruik ons ​​verskillende mikropipetwenke vir verskillende volumes?

Hoekom gebruik ons ​​verskillende mikropipetwenke vir verskillende volumes?



We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Is dit nie makliker om 'n 1000 µl mikropipetpunt vir alle volumes te gebruik nie? Ek verstaan ​​nie hoekom daar verskillende wenke vir kleiner volumes is nie. Beïnvloed dit die akkuraatheid van die pipet vir baie klein (<5µl) monsters?


Die kort antwoord is ja, die akkuraatheid word aangetas.

Outomatiese pipette is die akkuraatste in die middel van hul reeks. Die gemiddelde fout op 'n pipette is reeds ongeveer 2%, maar dit is erger aan die bokant of onderkant van die pipette minimale en maksimum volume.

Meer subtiel, het jy al ooit probeer om 1 uL met 'n 1 ml pipet te pipet? Of selfs 5 uL. Die boring van die pipet is te wyd om mee te begin, en die uitstootkrag/druk om die vloeistof uit te stoot sal nie baie goed werk nie.

Boonop sal die oppervlakspanning enige vermoë om die vloeistof werklik te manipuleer ernstig belemmer.


Biologie Eenheid 3 hersiening

Volumeverstellingsknop (geruffelde silinder onder die suier) -- Dit is wat gedraai word om die volume-instelling te verander.

Volumevertoning (numeriese vertoning onder die volumeverstellingsknoppie) -- Dit wys die volume wat die mikropipet ingestel is om op te tel en uit te dryf.

Vat (die sentrale buis van die pipet) - Die loop is waar 'n vakuum geskep word. Die weggooibare punt word voor elke gebruik aan die onderkant van die loop vasgemaak.

P1000 (blou) het 'n volume reeks van 100-1000 mikroliter en 'n akkuraatheid van +/- 10 mikroliter.

P200 (geel) het 'n volume reeks van 20-200 mikroliter en 'n akkuraatheid van +/- 1 mikroliter.

350 mikroliter sou lees as.

0 (duisende mikroliter)
3 (honderde mikroliter)
5 (tiene mikroliter)

elke hash-merk = 2 mikroliter

95 mikroliter sou lees as.

0 (honderde mikroliter)
9 (tiene mikroliter)
5 (mikroliter)

elke hash-merk = 0,2 mikroliter

2,5 mikroliter sou lees as.

0 (tiene mikroliter)
2 (mikroliter)
5 (tiendes van 'n mikroliter)

Om 'n punt te plaas, maak die puntboks oop, druk die punt van die pipet in die punt, en gee twee skerp krane. Maak die puntboks toe om besoedeling te voorkom. Moet nooit die punt met die hande raak nie.

Om vloeistof op te stel:
1. Druk die suier af na posisie 2.
2. Plaas die punt in vloeistof om op te trek. Die punt moet onder die water wees, maar nie aan die onderkant van die houer nie.
3. Laat druk op die suier geleidelik los sodat dit na posisie 1 kan terugkeer. (as daar borrels in die monster is, begin oor)

1. Maak seker die punt is in die houer waarin jy die vloeistof oorplaas.
2. Druk die suier na posisie 2.
3. Druk die suier na posisie 3 om al die vloeistof uit die punt te verwyder.
4. Laat die suier los en laat dit na posisie 1 terugkeer. (Let wel: as jy 'n vloeistof by 'n vloeistof voeg, maak seker dat die punt uit die vloeistof is voordat die suier vrygestel word. vloeistof sal teruggetrek word in die pipet. )

As jy die suier te vinnig los wanneer jy vloeistof intrek, kan die volume onakkuraat wees.

As jy nie die suier heeltemal onderdompel in die vloeistof wat jy wil trek nie, kan jy lugborrels intrek wat 'n onakkurate volume sal veroorsaak.


’n Tekort aan plastiekpipetwenke vertraag biologie-navorsing

Vroeg in die Covid-19-pandemie het 'n toiletpapiertekort kopers laat raas en gelei tot aggressiewe voorraadopbou en 'n groter belangstelling in alternatiewe soos bidets. Nou raak 'n soortgelyke krisis wetenskaplikes in die laboratorium: 'n tekort aan weggooibare, steriele plastiekprodukte, veral pipetpunte, Sally Herships en David Gura-verslag vir NPR’s The Indicator.

Pipetpunte is 'n noodsaaklike hulpmiddel om spesifieke hoeveelhede vloeistof in die laboratorium rond te beweeg. Navorsing en toetsing wat verband hou met Covid-19 het 'n groot vraag na plastiek aangespoor, maar die oorsake van die plastiektekort strek verder as 'n styging in aanvraag. Faktore van erge weer tot personeeltekorte het op baie vlakke van die voorsieningsketting oorvleuel om in te meng met die produksie van basiese laboratoriumvoorrade.

En wetenskaplikes het 'n moeilike tyd om te dink hoe navorsing kan lyk sonder pipet wenke.

“Die idee om wetenskap sonder hulle te kan doen, is lagwekkend,” sê Octant Bio laboratoriumbestuurder Gabrielle Bostwick aan STAT Nuus’ Kate Sheridan.

Pipetpunte is soos kalkoenbasters wat tot net 'n paar duim lank gekrimp is. In plaas van 'n rubberbol aan die einde wat ingedruk en vrygelaat word om vloeistof op te suig, heg pipetpunte aan 'n mikropipetapparaat wat die wetenskaplike kan stel om 'n spesifieke volume vloeistof op te tel, gewoonlik gemeet in mikroliter. Pipetpunte kom in verskillende groottes en style vir verskillende take, en wetenskaplikes gebruik gewoonlik 'n nuwe punt vir elke monster om besoedeling te voorkom.

Vir elke Covid-19-toets gebruik wetenskaplikes vier pipetwenke, vertel Gabe Howell, wat by 'n laboratoriumvoorraadverspreider in San Diego werk, aan NPR. En die Verenigde State alleen voer elke dag miljoene van hierdie toetse uit, so die wortels van die huidige tekort aan plastiekvoorraad strek terug tot vroeg in die pandemie.

“Ek weet nie van enige maatskappy wat produkte het wat halfpad verwant is aan [Covid-19] toetsing wat nie 'n geweldige toename in aanvraag ervaar het wat die vervaardigingsvermoë wat in plek was absoluut oorweldig het nie,” sê Kai te Kaat, visepresident vir lewenswetenskappe-programbestuur by QIAGEN, aan Shawna Williams by die Wetenskaplike tydskrif.

Wetenskaplikes wat alle soorte navorsing doen, insluitend genetika, bio-ingenieurswese, diagnostiese siftings vir pasgeborenes en seldsame siektes, maak staat op pipetwenke vir hul werk. Maar die aanbodtekort het 'n mate van werk met maande vertraag, en die tyd wat daaraan bestee word om voorraad op te spoor, verminder die tyd wat aan navorsing bestee word.

“Jy spandeer net baie meer tyd om seker te maak jy’is absoluut op die top van voorraad in die laboratorium,” sê Universiteit van Kalifornië, San Diego sintetiese bioloog Anthony Berndt aan die Wetenskaplike tydskrif. “Ons spandeer omtrent elke tweede dag om die voorraadkamer vinnig na te gaan, seker te maak dat ons alles het en beplan ten minste ses tot agt weke vorentoe.”

Die voorsieningskettingkwessie strek verder as die toename in die vraag na plastiek wat die Covid-19-pandemie gevolg het. Toe die winterstorm Uri Texas in Februarie getref het, het kragonderbrekings vervaardigingsaanlegte getref wat polipropileenhars skep, die grondstof vir plastiekpipetpunte, wat op sy beurt gelei het tot 'n kleiner voorraad van die punte, berig STAT Nuus.

Verspreiding is ook beïnvloed. Pandemieverwante voorsorgmaatreëls vereis dat skepe in kwarantyn geplaas word wanneer hulle 'n hawe bereik, en produkte word by doeane vertraag omdat personeel verminder is om sosiale afstand moontlik te maak, volgens die Wetenskaplike.

“Ek het gehoor daar is vertragings in die vind van skeepsvraghouers, selfs,” sê Howell aan NPR. “Ons het 'n skip gehad wat in Long Beach aangekom het. En dit het, glo ek, twee weke in die hawe gesit en net gewag om afgelaai te word. En daar was niks wat ons daaraan kon doen nie.”

Die tekort aan pipetpunte het daartoe gelei dat wetenskaplikes met hul eie dag-tot-dag-oplossings vorendag moet kom, in sommige gevalle pipetpunte was en hergebruik of toetse in bondels laat loop, berig STAT Nuus. In gevalle waar die vermyding van kontaminasie uiters belangrik is, moet navorsers hul pipetpunte rantsoeneer, of saamwerk met kollegas in ander laboratoriums om voorrade te deel totdat die volgende besending aankom.

“As jy nie aandag gee aan wat’ opraak nie, kan jy baie maklik uit dinge opraak”, sê Danielle de Jong, 'n laboratoriumbestuurder in die Whitney Laboratory aan die Universiteit van Florida, aan STAT Nuus. “Ek’werk al 21 jaar in 'n laboratorium. Ek’ve nog nooit teëgekom voorsieningsketting kwessies soos hierdie. Ooit.”


Hoekom gebruik ons ​​verskillende mikropipetwenke vir verskillende volumes? - Biologie

Mikropipet en die metrieke stelsel

Urban Action Academy High School, Brooklyn

Somernavorsingsprogram vir Wetenskaponderwysers

Vak: Lewende Omgewing/Biologie

Graadvlak: 9de tot 5de

Duur: Onderwysersvoorbereiding - 1 uur Een klasperiode (50-60 minute)

Doel : Hoe om volume meer akkuraat te meet

Prestasiedoelwit : Studente sal in staat wees om te leer om mikropipette akkuraat te gebruik en om volumes te meet met behulp van metrieke eenhede insluitend mikroliter.

Doel : Werk met DNS en ensieme behels dikwels die meting van baie klein volumes, dikwels in die mikroliter-reeks. Die liter is die metrieke volume standaard, en een mikroliter (μl) is een miljoenste van 'n liter. Om hierdie presiese metings te maak, gebruik die molekulêre bioloog 'n mikropipet.

  • 8 stelle mikropipette: 0,5-10 μ l, 2-20 μ l, 20-200 μ l, en 200-1000 μ l
  • rakke met punte (3 verskillende groottes)
  • 1,5 ml mikrobuise (mikrobuise of soms genoem Eppendorf-buise)
  • swart permanente inkpenne om buise te merk
  • handskoene
  • Saran wrap, waspapier of Parafilm
  • mikrosentrifuge
  • bekers vir gebruikte punte
  • m icropipet protokol kaarte
  • Pasteurpipette of weggooipipette s
  • Studente Werkkaart
  • Mikropipet Protokol Kaart

Konsep: Werk met DNA en ensieme behels dikwels die meting van baie klein volumes, dikwels in die mikroliter-reeks. 'n Mikroliter (μl) is een miljoenste van 'n liter. Vloeistofmetings in die metrieke stelsel word gemaak in eenhede gebaseer op die liter waar 'n liter ongeveer een kwart is. Om hierdie presiese metings te maak, gebruik molekulêre bioloë 'n presisie-instrument bekend as 'n mikropipet. Hierdie instrument is so basies vir hul laboratoriumwerk soos 'n hamer vir 'n skrynwerker is. Mikropipette kom in baie modelle en groottes voor.

Doelwitte: In hierdie laboratorium sal jy leer om mikropipette akkuraat te gebruik en om volumes te meet met behulp van metrieke eenhede insluitend mikroliter. Bemeestering van hierdie tegniek is noodsaaklik vir goeie resultate in die aktiwiteite wat volg.

Gebruik die volgende inligting om metrieke volume-omskakelings te bereken:

1 liter = 1000 ml (milliliter) 1 ml = 0,001 liter

1 liter = 1 000 000 mikroliter 1 mikroliter = 0,000001 liter

Vir akkurate metings en om skade aan die mikropipette te voorkom, volg hierdie belangrike riglyne:

  • Stel die volume net binne die omvang van jou mikropipet.
  • Plaas die regte grootte weggooibare punt op jou mikropipet voordat dit in enige oplossing gedompel word.
  • Hou altyd die mikropipet in 'n vertikale posisie wanneer daar vloeistof in die punt is. In 'n horisontale posisie kan vloeistof terug in die suier lek.
  • Gebruik jou duim om die spoed waarteen die suier opstyg te beheer nadat jy vloeistof opgeneem of uitgestoot het. Om die suier terug te laat klap, beskadig die suier en die volume wat uitgegee word, kan onakkuraat wees

OPSTEL EN VOORBEREIDING VAN DIE M ICROPIPET

Daar is vier algemene groottes van mikropipette. Sien die gids hieronder vir hierdie groottes en volumereekse.

1. Kies 'n mikropipet en stel die volume deur die swart sluithendel los te maak, die duimknoppie te draai om die volume te stel en dan saggies trek die sluithefboom vas. Maak seker dat jy die desimale punt vir jou mikropipet herken (aangedui deur die in die tabel hieronder) en om binne die volume reeks te bly.

2. Gebruik die gids hieronder en kies die korrekte punt vir jou mikropipet. Druk die punt van die mikropipet stewig in die oop punt van die punt terwyl die punt nog in die puntkas is. (Vermy om die mikropipet te draai, want dit kan die skag losdraai.) Lig die punt uit die boks, maar moenie aan die punt naby die kleiner punt raak nie.

Deur aan die punt te raak, besoedel dit dit en sal jou monsters besoedel.

Verwys na die Protokolkaart vir meer inligting

Verwys na die Protokolkaart vir meer inligting

Oxford Mikropipet en Wenkgids

O BEDIENING VAN DIE M ICROPIPET

1. Vind die haltes

Hou die mikropipet in jou hand.

Gebruik jou duim om die suier in te druk.

Oefen om die suier stadig in te druk en die twee stops te voel.

2. Trek 'n bietjie monstervloeistof uit jou mikrobuis

Druk die plunjerknop af tot by die eerste stop.

Hou die suier af, laat sak die punt in die monstervloeistof net onder die oppervlak (

Laat die suier geleidelik los.

Doen dit stadig om te verhoed dat vloeistof binne die steel van die pipet suig.

Nadat u gevul het, wag 1 sekonde en verwyder dan die punt uit die vloeistof.

3. Gaan die punt van die pipet na

Kyk hoeveel vloeistof jy het. Maak seker dat daar geen lugborrels in die punt vasgevang is nie. Indien wel, teken die monster oor. Maak seker dat daar geen druppels aan die buitekant van die punt vasklou nie.

4. Los die vloeistof uit die pipet

Laat sak die punt in die mikrobuis en raak liggies aan die kant of onderkant van die buis.

Druk die suier stadig in tot by die eerste stop.

Wag 1 sekonde en druk dan die suier tot by die tweede stop om die laaste bietjie vloeistof uit te stoot sodat die pipetpunt geen vloeistof in het nie. Hou die suier ingedruk terwyl jy die pipet uit die buis haal, en laat dan die suier stadig los.

5. Gooi die punt uit in 'n afvalpunthouer deur die puntuitwerpknoppie te druk.

Viskose vloeistowwe: As jy 'n vloeistof wat baie dik of viskeus is pipetteer, is dit veral belangrik om die weggooibare punt net in die vloeistof wat jy meet (sê 2 mm) in te steek. As jy die punt heeltemal onderdompel, sal groot volumes vloeistof aan die buitekant van die punt vassit, wat jou 'n baie onakkurate meting gee. Met viskeuse oplossings is dit ook belangrik om die suier stadig op en af ​​te beweeg. Om dit te kan doen, maak jou 'n ware pro.

New York State Standaarde :

Sleutelidee 3: Die waarnemings wat gemaak is tydens die toets van voorgestelde verduidelikings, wanneer dit ontleed word deur gebruik te maak van konvensionele en uitgevind metodes, verskaf nuwe insigte oor natuurlike verskynsels.

3. i Gebruik verskeie metodes om waarnemings voor te stel en te organiseer (bv. diagramme, tabelle, grafieke, grafieke, vergelykings, matrikse) en interpreteer die georganiseerde data insiggewend.

Nasionale Wetenskapstandaarde:

9-12 Inhoudstandaard A - Identifiseer die vrae/konsepte wat wetenskaplike ondersoek rig


Aanpassing van laboratoriumtegnieke vir afstandsonderrig

Pablo Perez-Pinera, links, en Karin Jensen het afgeleë laboratoriumoefeninge ontwikkel om studente te help om algemene laboratoriumtegnieke te leer. Krediet: Karin Jensen

Die COVID-19-pandemie het instrukteurs gedwing om hul kursusse vir aanlynleer aan te pas. Laboratoriumkursusse was veral moeilik weens 'n gebrek aan toegang tot gespesialiseerde toerusting vir afgeleë leerders. Om hierdie uitdaging te oorkom, het navorsers van die Universiteit van Illinois Urbana-Champaign 'n laboratoriumoefening ontwerp om studente te leer hoe om mikropipette te gebruik, deur middel van afstandsonderrig, met behulp van tuisstelle.

Mikropipette is algemene - en noodsaaklike - laboratoriuminstrumente en word in verskeie velde gebruik, insluitend molekulêre biologie, mikrobiologie en biochemie. Hulle word gebruik om baie klein volumes vloeistof akkuraat oor te dra. Om studente te leer hoe om hierdie instrumente te gebruik, het die navorsers kits ontwikkel wat $135 per student kos, wat 'n fraksie was van die koste van die onderrigtoerusting wat normaalweg vir persoonlike klasse gebruik word.

"Alhoewel laboratoriumstelle voorheen ontwikkel is, het hulle nie op mikropipetteervaardighede gefokus nie," sê Karin Jensen, Onderrig Assistent Professor in Bio-ingenieurswese, wat saam met Medeprofessor in Bio-ingenieurswese Pablo Perez-Pinera (ACPP) gewerk het om die projek te ontwikkel. "In 'n poging om afgeleë studente van laboratoriumervaring te voorsien, het ons stelle ontwikkel en aan studente gestuur. Hierdie stelle het toerusting en reagense bevat sodat hulle hul tegniek kon oefen en eksperimente op afstand kan uitvoer."

Elke stel het 'n mini-skaal, 'n glukosemeter, 'n pipethulpmiddel en 'n stel mikropipette bevat. Elke student is van die kit, 'n instruksievideo en 'n laboratoriumhandleiding voorsien. Hulle is opdrag gegee om die protokol stap vir stap te volg met die doel om te leer hoe om die glukose-oplossings korrek te verdun en hul akkuraatheid met behulp van die glukosemeter te verifieer. Hulle het ook hul data met die instrukteurs gedeel vir terugvoer en gradering.

Die studente het ook opnames en kursusterugvoervorms oor die doeltreffendheid van hierdie aanlynklasse ingevul. "Ons het gevind dat die meeste van die studente opgewonde was om laboratoriumtoerusting te gebruik, al was hulle in 'n aanlyn afdeling," het Jensen gesê.

Die navorsers werk nou daaraan om die oefening te verbeter. "Behalwe vir COVID-19, is daar steeds 'n behoefte om afgeleë laboratoriumleergeleenthede te ontwikkel vir studente wat nie persoonlik laboratoriums kan bywoon nie," het Jensen gesê. "Afgeleë laboratoriumaktiwiteite, soortgelyk aan wat ons beskryf, sal belangrik wees om toegang tot STEM-onderwys te verhoog."


Belangrikheid van mikropipette

Mikropipette is die belangrikste en nuutste tegniese hulpmiddel vir die laboratoriums. Daar is soveel verskillende tipes laboratoriums en in almal van hulle moet mense met vloeistowwe en semi-vloeistowwe werk. Om perfekte volume van hulle te kry, benodig hulle iets wat die materiaal in perfekte volume kan dra en dit op enige vereiste plek kan vrystel.

Dit is nodig om perfekte resultate van verskillende toetse of navorsing te kry. Sonder perfekte metings van verskillende vloeistowwe kan jy nie gewenste perfekte resultate kry nie, wat soms ook skadelik kan wees. Pipette is die toestelle wat jou die meeste kan help in hierdie hele proses van eksperimente en toetse in die laboratoriums. Daar is soveel verskillende soorte toestelle wat vandag op die mark beskikbaar is. Mikro is een van die beste tipes in hierdie veld. Dit het die nuutste tegnologie. Vandag verkies die tegnici in die meeste van die laboratoriums om hierdie tipe toestel te gebruik omdat hulle op soveel verskillende maniere nuttig is.

Ons gaan hier bespreek hoe hierdie soort toestelle nuttig kan wees vir die laboratorium tegnici en wetenskaplikes wat heeltyd met hierdie tipe goed en gereedskap moet werk. Eerstens meet hulle vloeistowwe baie akkuraat. Dit is baie belangrik om perfekte meting van materiaal te kry om perfekte, korrekte en gewenste resultate te kry. So om perfekte en korrekte resultate te kry, is dit baie belangrik. As ons van die ander kant af sien dan kan ons weet dat hulle baie gerieflik in gebruik is. Mense wat in verskillende tipes laboratoriums werk, moet in staande posisie werk en hulle moet elke oomblik akkuraat wees. In hierdie situasie kan enigiemand moeg wees as die gereedskap nie gerieflik is waarmee jy baie moet werk nie. So ek dink hierdie toestelle is die beste op grond van gerief. Hierdie gerief maak die werk maklik en vinnig sonder enige vermoeiende pogings. As gevolg hiervan kan ons sê dat hulle baie belangrik is.

As jy nou op soek is na hierdie produkte in die markte, dan is daar soveel verskaffers en maatskappye in die mark beskikbaar. Jy moet sekere dinge in jou gedagtes hou voordat jy enige produkte van die mark by enige verskaffer of enige maatskappy koop. Daar is so baie maatskappye wat wanpraktyke in die mark doen, so jy moet soek en al die kennis van daardie maatskappy kry. Andersins kan dit gebeur dat jy swak kwaliteit in die produk kry. So as jy die perfekte en beste kwaliteit van die pipette wil kry, kry dan net die volledige kennis wat nodig is vir die aankoop van enige produk. Kortom, ek wil graag sê dat mikropipette die beste en belangrikste hulpmiddel vir enige laboratorium is.


Hoekom gebruik ons ​​verskillende mikropipetwenke vir verskillende volumes? - Biologie

Laboratoriumpersoneel moet vertroud wees met en die volgende vaardighede ingeoefen het voor die aanvang van Newcastle-siekte-entstofproduksie. Hierdie handleiding bevat nie verdere besonderhede oor hierdie vaardighede nie.

Aseptiese tegniek.

Sterilisasie deur outoklavering en warm lug van glasware en weggooimateriaal.

Meng of roer deur:

1. Hand
2. Magnetiese roerder
3. Vortex-menger

Instruksies vir die gebruik van 'n dagboek

Die besonderhede van alle tegniese prosedures wat uitgevoer word om die I-2 Newcastle-siekte-entstof te vervaardig en te toets, moet deur die tegnikus in 'n dagboek aangeteken word.

Gebruik 'n gebonde boek.

Nommer al die bladsye opeenvolgend.

Sit 3 tot 4 bladsye opsy vir 'n “inhoudsopgawe”.

Stel 'n “afkortingsbladsy” voor in die dagboek op. Lys alle gepersonaliseerde of ongewone afkortings.

Plaas die datum en titel van die eksperiment boaan elke bladsy.

Dit is die beste om 'n swart pen te gebruik aangesien hierdie kleur goed fotostateer. Moenie potlood gebruik nie.

Foute moet deurgelees en reggestel word. Moenie 'n uitveër of omslagfoute met wit “vloeibare papier” gebruik nie.

Die volgende reagense sal benodig word tydens die vervaardiging en toetsing van die I-2 Newcastle-siekte-entstof.

  • Fosfaatgebufferde soutoplossing (PBS)
  • 'n Antistolmiddel. Acid Citrate Dextrose (ACD) of alternatiewelik Alsever's Solution
  • Dekstrose Gelatien Veronal (DGV). ’n Bergingsoplossing vir 10 persent gewasde rooibloedselle
  • 'n Antibiotiese oplossing
  • Tryptiese soja sous
  • Sabouraud agar

Metodes vir die voorbereiding van hierdie media en oplossings is in Bylaag 3 ingesluit.

Aantekening van besonderhede van praktiese werk

Gebruik die volgende formaat om die besonderhede van jou praktiese werk aan te teken.

Doel: Skets die doel van die aktiwiteit.

Materiale en metodes: Teken genoeg inligting aan wat 'n ander wetenskaplike of tegniese persoon sal toelaat om die prosedure te herhaal. As standaardprosedures in 'n reeks eksperimente gebruik word, beskryf dit as standaard. Voorbeelde van sulke standaardprosedures is dié wat in 'n Laboratoriumhandleiding of 'n vorige eksperiment beskryf word.

Resultate: Teken al die resultate en waarnemings aan. Berei 'n tabel voor om data op te teken waar toepaslik.

Gevolgtrekkings: Lewer kommentaar op jou resultate en waarnemings. Maak voorstelle vir verdere eksperimente.

Die versorging en gebruik van enkel- en multikanaal mikropipette

Vervaardiger se instruksies word saam met alle mikropipette voorsien. Lees asseblief en maak seker jy verstaan ​​hoe om die pipet te gebruik en te versorg. Mikropipette gebruik plastiek weggooibare punte. Vir gemak van gebruik word wenke gewoonlik in plastiekbokse verpak wat geoutoklaveer kan word. Maak seker dat die punte wat jy gebruik styf op die punt van die pipet pas.

Behandel mikropipette baie sagkens aangesien dit presisie-instrumente is.

Hou regop wanneer dit gebruik word om te verhoed dat vloeistowwe binne die steel van die pipet loop.

Moenie pipette op die werkbank laat lê waar dit afgestamp en beskadig kan word nie.

Moenie toelaat dat pipette met korrosiewe chemikalieë in aanraking kom nie.

Voor gebruik, maak seker dat die volume korrek gestel is. Pas die volume aan voor gebruik. Die meeste pipette het 'n digitale vertoning van volume. Sommige handelsmerke het 'n mikrometerverstelling, wat moeilik kan wees om te lees.

Maak seker dat alle punte stewig vasgemaak is om te pipet.

Trek vloeistof op.

Kontroleer dat die vloeistof wat opgetrek is die verwagte vlak in die punt bereik het en dat daar geen lugborrels in die punt is nie. Wanneer meerkanaalpipette gebruik word, maak seker dat die volume vloeistof in elke punt dieselfde is.

Indien nodig, stoot die vloeistof uit en draai die punte met die hand op die pipet vas.

Trek die vloeistof op en kontroleer weer.

Figuur 1: Enkelkanaal mikropipet

Instruksies vir die pipet van vloeistowwe met 'n mikropipet

1. Mikropipette het 3 posisies:

1. Rusposisie
2. Eerste stop
3. Tweede stop

2. Pas die punt aan die einde van die skag. Druk af en draai effens om 'n lugdigte seël te verseker.

3. Hou die pipet in 'n vertikale posisie. Druk die suier tot by die eerste stop. Lug gelyk aan die volume van die instelling (bv. 100 ml) word verplaas.

4. Dompel die punt in die vloeistof. Los die suier terug na die rusposisie. Wag 'n sekonde totdat vloeistof in die punt opgesuig word. Die volume vloeistof in die punt sal gelyk wees aan die volume van die instelling van die mikropipet.

5. Plaas die punt teen 'n hoek (10° tot 45°) teen die wand van die houer wat die vloeistof ontvang, byvoorbeeld 'n put van 'n mikroputplaat. Druk die suier tot by die eerste stop, wag een sekonde, druk die suier tot by die tweede stop om al die vloeistof uit te dryf

6. Beweeg die punt van die punt weg van die vloeistof. Laat die suier na die rusposisie los.

Figuur 2: Gebruik 'n multikanaal mikropipet

Gegradueerde pipette word gekalibreer en gemerk met gradueringslyne wat die meting van meer as een volume toelaat. Die volume word met die oog gelees deur die waarde te lees wat op die skaal aan die onderkant van die meniskus aangedui word. Weggooibare plastiek-gegradueerde pipette is beskikbaar en is nuttig om giftige of viskose stowwe te pipet. Gegradueerde pipette van glas kan gewas en hergebruik word. Die pipette moet met watte bo-op geprop word en voor gebruik gesteriliseer word om besoedeling van vloeistowwe wat gemeet word tot die minimum te beperk.

1 mL en 10 mL gegradueerde pipette word die meeste gebruik in die laboratoriumpraktyke wat in hierdie handleiding beskryf word. Kontroleer die volumeskaal voordat u gegradueerde pipette gebruik en let op:

Is die pipet leeg van volle volume na nul of van nul tot volle volume?

Is die pipet ontwerp om deur swaartekrag leeggemaak te word met die punt in kontak met die houer of om uitgeblaas te word deur met 'n pipetvuller uit te blaas?

Pasteurpipette is glaspipette wat gebruik word om vloeistowwe van een plek na 'n ander oor te dra. Hulle is nie gegradueer nie en word dus nie gebruik om volumes te meet nie. Soos gegradueerde pipette moet hulle met watte geprop word en voor gebruik gesteriliseer word.

Pipettering per mond is nie 'n aanvaarbare laboratoriumpraktyk nie. Vloeistowwe word met pipetvullers in pipette opgetrek. Daar is verskeie opsies. 'n Eenvoudige rubberbol is geskik vir 'n 1 ml pipet. Vir 10 ml pipette, gebruik 'n drievoudige klep rubber gloeilamp, 'n handaangedrewe pomp of 'n elektroniese pipetvuller.

Plastiek mikroputplate word nou gereeld in laboratoriums gebruik om toetse uit te voer met klein volumes monsters en reagense. Die plate bevat 96 putte wat in 'n 8 × 12 formaat gerangskik is met kolomme gemerk 1 tot 12 en rye gemerk A tot H. Elke put het dus 'n benaming byvoorbeeld A 12. Plate word vervaardig met verskillende gevormde putte wat geskik is vir verskillende toetse. Die putte kan rondbodem, platbodem en V-bodem wees.

In hierdie handleiding word die hemagglutinasie- en hemagglutinasie-inhibisietoetse in V-bodem mikroputplate uitgevoer. Tweevoudige verdunnings kan oor die plaat gemaak word in enige oriëntasie wat van A1 tot A11 is, (A12 is 'n kontroleput) of van A1 tot G1 (H1 is 'n kontroleput).

Die mikroputplate wat by die John Francis Virologie-laboratorium gebruik word, word deur Nalgen Nunc International vervaardig. Die plate kan nie geoutoklaveer word nie en word na gebruik ontsmet deur oornag in 'n 2 persent chloriedoplossing te week. Hulle word dan drie keer in kraanwater gewas en afgespoel, gevolg deur drie keer in gedistilleerde water afgespoel, gedroog en hergebruik.

Die gebruik van mikroputplate word in Afdeling 10, Afdeling 11 en Bylaag 4 verwys.


Voorbeeld 6a Transformasielaboratorium

Inleiding:
Bakteriese transformasie vind plaas wanneer 'n bakteriese sel vreemde DNA opneem en dit in sy eie DNA inkorporeer. Hierdie transformasie vind gewoonlik binne plasmiede plaas, wat klein sirkelvormige DNA-molekules is wat apart van sy chromosoom is. Daar kan 10 tot 200 kopieë van dieselfde plasmied binne 'n sel wees. Hierdie plasmiede kan repliseer wanneer die chromosoom dit doen, of hulle kan onafhanklik repliseer. Elke plasmied bevat van 1 000 tot 200 000 basispare. Sekere plasmiede, genoem R-plasmiede, dra die geen vir weerstand teen antibiotika soos ampicillien, wat in hierdie laboratorium gebruik word.

Plasmiede funksioneer in transformasie op twee verskillende maniere. Hulle kan gene wat natuurlik in hulle voorkom oordra, of hulle kan as vektore optree om vreemde DNA in te voer. Beperkingsensieme kan gebruik word om vreemde DNA te sny en dit in die plasmiedvektore in te voeg. Die bakterieë wat in hierdie laboratorium gebruik is, was Escherichia coli (E. coli). Dit was ideaal vir hierdie transformasiestudie omdat dit maklik in Luria-bouillon of op agar gekweek kan word, en dit het 'n relatief klein genoom van sowat vyf miljoen basispare.

Transformasie is nie die enigste metode van DNA-oordrag binne bakterieë nie. Vervoeging is 'n DNS-oordrag wat tussen twee bakteriese selle plaasvind. ’n Brug word tussen die twee selle gevorm en genetiese inligting word verhandel. In transduksie word 'n virus gebruik om vreemde DNA na 'n bakteriese sel oor te dra.

Hipotese:
Die getransformeerde E. coli met die ampisillienweerstandsgeen sal in die ampisillienplate kan groei, maar die nie-getransformeerde E. coli sal nie.

Materiaal:
Die materiaal wat vir hierdie laboratorium benodig word, was 2 steriele proefbuise, 500 μL yskoue 0.05M CaCl2, E. coli-bakterie-kulture, 'n steriele inokulasielus, 'n steriele mikropipet, 10 μL pAMP-oplossing, 'n timer, ys, 'n waterbad , 500 μL Luria-sous, 'n smeerstaaf, 4 plate: 2 ampicillin+ en 2 ampicillin –, en 'n broeikas.

Metodes:
Een steriele buis was gemerk “+” en die ander “-“. 'n Steriele mikropipet is gebruik om 250 μL yskoue 0.05M CaCl2 na elke buis oor te dra. 'n Groot kolonie E. coli is met 'n inokulasielus na elke buis oorgeplaas. Die suspensie is dan gemeng deur 'n steriele mikropipet herhaaldelik te trek en leeg te maak. 10μL pAMP-oplossing is by die selsuspensie in die buis gemerk "+" gevoeg en gemeng deur die buis te tik. Beide buise is dadelik vir 15 minute op ys geplaas en dan vir 90 sekondes in 'n 42°C waterbad geweek. Die buise is dan vir nog 2 minute in ys teruggesit.

Na die hitteskok is 250 μL Luria-bouillon by elke buis gevoeg. Die buise is gemeng deur te tik. Twee plate ampicillien + agar is gemerk LB/AMP+ en LB/AMP-. Die twee plate ampicillinagar is gemerk LB+ en LB-. 100 μL van die selsuspensie in die “+” buis is op die LB+ en die LB/AMP+ plate geplaas. 100μL van die selsuspensie in die "-" buis is by die LB- en die LB/AMP- plate gevoeg. Dit is met 'n smeerstaaf gesteriliseer deur dit na elke gebruik oor 'n vlam te laat gaan. Die plate is toegelaat om vir etlike minute te sit en dan oornag omgekeer by 37°C geïnkubeer.

Vrae:
1. Vergelyk en kontrasteer die aantal kolonies op elk van die volgende pare plate. Wat sê elke paar resultate vir jou oor die eksperiment?
LB+ en LB- Beide hierdie plate het 'n grasperk van bakterieë gehad. Dit bewys dat die bakterieë in staat is om op die agar te groei en dat daar niks langs die ampisillien groei verhinder het nie.

LB/AMP- en LB/AMP+ Die LB/AMP- het geen groei gehad nie, maar die LB/AMP+ het klein groei gehad. Dit wys dat die bakterieë getransformeer is en 'n weerstand teen ampisillien ontwikkel het.

LB/AMP+ en LB+ Die LB/AMP+ het minder groei gehad as die LB+. Dit wys dat die transformasie nie heeltemal effektief was nie en slegs van die mees bekwame bakteriese selle getransformeer het.

2. Totale massa pAMP gebruik = 0.05 μg

Totale volume selsuspensie = 510 μL

Fraksie van selsuspensie versprei op die plate = 0,196

Massa pAMP in selsuspensie = 0,0098

Aantal kolonies per μg plasmied = 0,0294

3. Watter faktore kan die transformasiedoeltreffendheid beïnvloed? Verduidelik die effek van elkeen wat jy noem.
Transformasiedoeltreffendheid kan beïnvloed word deur die grootte van die kolonie wat by die oplossing gevoeg word. In 'n groter kolonie sal die doeltreffendheid toeneem omdat daar meer ontvanklike selle sal wees. Nog 'n faktor is die hoeveelheid pAMP wat bygevoeg word. Hoe meer pAMP bygevoeg word, hoe hoër is die doeltreffendheid. Die hoeveelheid Luria-bouillon wat bygevoeg word, kan ook doeltreffendheid beïnvloed. As die hoeveelheid Luria-bouillon verhoog word, sal die doeltreffendheid afneem.

Foutanalise:
Hierdie laboratorium het verskeie stappe gehad, wat elkeen die potensiaal vir foute gegee het. Al die metings moes presies en akkuraat wees, en die hitteskoktydsberekening was ook 'n baie ingewikkelde prosedure. Fout in hierdie laboratorium kon veroorsaak word deur die konsentrasie van die CaCl2 as gevolg van die feit dat die meeste daarvan gevries was.

Bespreking en gevolgtrekking:
Die bakterieë wat met die pAMP-oplossing behandel is, het 'n weerstand teen ampisillien ontwikkel en kon op die ampisillien+-plaat groei. Diegene wat nie met die pAMP behandel is nie, kon nie op hierdie medium groei nie. Die plate sonder ampicillien het as kontrole gedien om te wys hoe die bakterieë in normale toestande sou lyk. Transformation is never fully effective, Only cells that are competent enough are able to take up the foreign DNA. Therefore, the ampicillin + plates showed less growth than the control plate.


What is a micropipette?

Micropipettes are utilized in the laboratory to transfer small quantities of liquid, usually down to 0.1 uL. They are most commonly used in chemistry, biology, forensic, pharmaceutical, and drug discovery labs, among others. Common micropipette sizes used in labs include:

Common Micropipette Sizes Volume Range
P2 0.2-2 uL
P10 1-10 uL
P20 2-20 uL
P100 20-100 uL
P200 20-200 uL
P1000 100-1000 uL
Note: P50 does not exist, however, some manufacturers like Capp, AccuPet, and BrandTech make micropipettes with this volume range.

Not only do micropipettes differ in size and volume dispensed, but depending on those particular aspects they also require specific pipette tips. Micropipettes use a disposable pipette tip to aspirate liquid, note that the tip is the only part of the pipette that makes contact with the solution. A new tip is utilized for every sample in order to prevent cross contamination.

The most essential aspect of a pipette tip is its quality, whether you’re looking for a filter, low retention, or gel loading tip, make sure that the pipette tip will perform accordingly and as precise as your micropipette. Make sure to research the purity of your pipette tips.

Popular Micropipette Brands

Components of a Micropipette

Basic parts of a micropipette include plunger button, tip ejector button, volume adjustment dial, volume display, tip ejector, and shaft. They differ in design, weight, plunger force, and overall precision. Depending on your budget and preference, there are plenty of micropipettes in the market that specifically catered to meet your needs. If you’re unsure which one will be best for your application, contact Pipette.com at 800-243-3232 for assistance.

What you shouldn’t do with micropipettes

  • Drop your pipette. Dropping your pipette might lead it to be out of calibration. So be very gentle and careful.
  • Aspirate into the pipette. Believe us, it happens. If you’re working with harsh chemicals, having it stuck inside your pipette might lead it to build up and give you inaccurate results.
  • Turn the dial past or below its volume range. This can break the volume indicator or other components within the pipette.
  • Jam pipette tip into pipette. This can not only damage the pipette tip but most importantly the pipette shaft. What the jamming means is that you most likely need a better fitting pipette tip.

Treat your micropipette with care. It is a highly precise instrument and as such careful attention to its performance needs to be noted. If you notice that it is out of range or not performing like it use to, its time to have it repaired and/or calibrated. For further assistance on how to use a micropipette, we’ve developed a Complete Guide of Proper Pipetting Resources to better assist you.


External (ESTD) vs. Internal Standard (ISTD) Calibration in HPLC

  • NOTE: A quick comment about calibration methods. Before you begin to create any calibration tables or analyze any standards/samples, please make sure that your current chromatography method is reliable . It must retain the compound (s), be reproducible and resolve apart almal of the samples and possible impurities with near to perfectly symmetrical peak shapes. Your calibration results will only be as good as your original method. A poor quality method may not provide reliable results so be sure and spend as much time as possible developing the initial HPLC method to be as rugged and reliable as possible voor starting any quantitation or calibration. *Poor quality method development is the number one reason for problems with quantitation.

Methods of Quantitation, Peak-height vs. Peak-area: Both types of response provide a measurement of the detector signal. Proper and reproducible integration of the signals is critical. Peak area is the most popular choice in chromatography, but peak height measurements can also be used if the peaks have near perfect symmetry (desirable, but very rare). Whichever method you chose, you must use it consistently.

Definitions, External & Internal Standards: For most samples, there are two commonly used types of standards used. When known standards are run separately from the actual samples (in their own chromatogram) and their response is compared to that of the sample in another chromatogram, then we refer to this as an External Standard (ESTD). When the standard is added to the sample and analyzed at the same time we refer to this as an Internal Standard (ISTD). With an Internal Standard we are comparing the instrument response of the sample to a reference standard, both run together.

External Standard Calibration Notes: The sample must fall within a range bracketed by the calibration solution. I suggest that you include a range which covers concentration values which are

50% or more outside of the expected range. Dissolve the final calibration standards into the mobile phase (or a weaker solution) when preparing the injection vials from the stock solution. At least five different concentration values should be used per order of magnitude (large range = more stds). *Inject the same v olume of solution (different concentration) for eac h calibration standard (level) onto the column. Do Not inject different volumes of so lution from one std vial. Plot peak response vs concentration. Make sure you have a linear response and that the line goes through the origin (zero intercept, ideally). Once you have injected all of the standards, repeat the process again at least three more times (or use multiple injections) to determine overall reproducibility before constructing the final calibration table.

Internal Standard Calibration Notes: Internal standards are commonly used when many sample preparation steps are required before the sample can be injected onto the column. The internal standard may compensate for any losses during filtration or extraction. Selection of the Internal Standard is critical. Some of the characteristics should include: It must be different than the sample, well resolved and must not elute where any sample peaks could be expected It should not elute where any interfering matrix or other compounds could appear It should have a similar linear response as the sample (Inject a fixed volume/concentration) Available in a high purity form from one or more commercial sources (cer tified method) Must be stable and not react with the sample or mobile phase solution.

Add it to the samples before any extraction procedures . Base the amount of ISTD concentration such that it is betwee n 1/3 and 1/2 of the expected concentration of the sample(s). The sample 's target concentration range is a good value to use. *Because of these and other strict conditions, finding a suitable Internal Standard can take some time and testing.


What is the name of this pipette?

Also known as a micro volume pipetter. The disposable tips are commonly referred to as "pipette tips". Actually, the tip itself is the only part that is technically a pipette. The fancy dial-a-volume device is just a glorified pipette bulb that can deliver accurately a known volume reproducibly.

I thought an Eppendorf was a microcentrifuge tube? Genericized AND disambiguated! Anyways, the Fisher catalogue and I call it a pipetter / pipettor.

I think a Pasteur pipette refers only to the cheap disposable glass pipettes that you have to attach a rubber bulb to.

When they're manufactured by Rainin, it is a Pipetman. This led to other fun in the labs I've worked in, because of course we then had to rename other items as PipetWoman, PipetBoy, PipetGirl, PipetBaby.

You wouldn't call a product by Rainin an Eppendorf anything. Eppendorf makes a full line of lab equipment, not just micropipettes (which is what this thing is generically called).

The style shown in the photo is my favorite brand! When I would have to pipette literally a thousand samples in a few hours (different samples, so I couldn't use the digital automated ones), that magnetic assist on that brand is the only one that didn't KILL my thumb. (I think the correct term for the repetitive stress disorder one acquires from using those is "pipettor's thumb." )

Pasteur pipettes are the glass pipets you use with an old-fashioned rubber bulb on the top.