Inligting

Hoe om HL-60-selbesmetting te voorkom?

Hoe om HL-60-selbesmetting te voorkom?


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Ek het twee keer Hl-60-selle uit vloeibare stikstofkamer ontdooi in RPMI 1640-media (wat 10% FBS, L-glutamien, penisillien/streptomisien bevat). In die eerste dag bly die selle goed. Maar wanneer dit van die eerste fles na nuwe flesse gesubkuleer is (seloplossing : media= 1:3) het al die flesse op die 2de dag van kweek gekontamineer geraak. Wolk is albei tye gevind. Daar kan genoem word dat ek steriele eenmalige bruikbare pipette en onbedekte fles vir groei gebruik het. Alle oordragte na ander flesse en byvoeging van media is baie versigtig gedoen en binne 'n skoon bank. Voordat 'n skoon bank gebruik word, is dit met 70% EtOH gespuit.

Het iemand al so 'n probleem ondervind? Deel asseblief en as jy het, gee asseblief 'n paar waardevolle voorstelle of verwysings.

Dankie


Die mees waarskynlike rede vir die besmetting is dat u bevrore voorraad besmet is. Gestel jy is behoorlik opgelei in selkultuur, werk jy in 'n korrek onderhoude bioveiligheidskas, is jou reagense almal steriel (is jou media steriel gefiltreer nadat FBS bygevoeg is, ens.), En is die broeikas skoon (die waterbadpan is ge -autoklaaf, steriele water met biosied/swamdoder daarby gevoeg, die hele broeikas afgevee en alle verwyderbare dele word gereeld ge -autoklaaf, ens.), dan is besmetting van voorraad die redelikste antwoord. Probeer vroeër gedeeltes ontdooi as waarmee u gewerk het, of bestel 'n nuwe flessie of twee by ATCC of wie ook al u selverkoper is. Maak seker dat u pipette skoon is en dat u steriele gefiltreerde pipetpunte gebruik.


Vermy om jou hande deur die openinge van die flesse/buise te laat beweeg, aangesien bakterieë van die vel die hoofbron van kontaminasie is. Dit is veilig om die doppies en die opening van die buise kortliks te verbrand voordat hulle oopgemaak of bedek word. As u goeie aseptiese tegnieke gehandhaaf het deur ontdooiing en subkulture, is dit moontlik dat die bevrore selle voorheen besmet was. Ontdooi 'n nuwe flessie bevrore selle en kyk of daar verbetering is.


Daar is 'n eenvoudige rede vir hierdie "troebel" kulture. HL-60 is 'n suspensiesellyn (sien ATCC hieroor), dus bly meeste van die selle in die vloeistoffase en kleef nie aan die plastiekoppervlak van die kultuurfles nie. Sommige kan, maar gewoonlik heg hulle nie baie goed nie en kom af wanneer die fles beweeg of liggies daarop getik word.

Suspensionskulture lyk anders as bakteriële besmetting, hulle is minder dig en jy kan die selle (wat baie groter is as bakterieë) in die mikroskoop sien as jy na die kultuur kyk. Bakteriële kulture bou dikwels afsettings van bakterieë op die grens van die medium op. En die media van bakteriële besmette kulture is byna altyd geel, aangesien die metabolisme produkte die media suur maak. 'n Beeld sal hier nuttig wees.


Laboratoriumbesmetting: Voorkoming van kontaminasie

In die tweede deel van hierdie laboratoriumkontaminasiereeks bied kundiges van Thermo Fisher Scientific hul topwenke oor die voorkoming van laboratoriumbesmetting.

Deel twee, aangebied deur Mary Kay Bates, wêreldwye selkultuurspesialis en Douglas Wernerspach, sakedirekteur, Thermo Fisher Scientific, is getiteld: Wenke om besoedeling te voorkom.

In die eerste deel van hierdie reeks het ons tipes biologiese kontaminante bespreek en geleer dat laboratoriumpersoneel en prosedurefoute die grootste besmettingsbronne kan wees, maar wat kan ons daaromtrent doen?

“Besoedeling vind die meeste plaas deur vermybare prosedurele foute

Moderne laboratoriums is besige omgewings met personeel wat toerusting deel oor oorvleuelende werkstasies wat naby hoë verkeersgebiede en besige instrumente kan wees.

Die beoefening van goeie aseptiese tegnieke is van kritieke belang vir die handhawing van die suiwerheid van selkulture sowel as vir 'n veilige laboratoriumomgewing.

Sommige van die mees basiese laboratoriumprosedures is die belangrikste, insluitend die gebruik van behoorlike aseptiese tegniek, die dra van skoon laboratoriumjasse en was hande om die risiko te verminder om mikroörganismes in soogdierselkulture in te voer.

Hieronder bespreek ons ​​ander tegnieke wat nie so basies is nie - goeie laboratoriumontwerp, konsekwente bewerkingsprosedures met gereelde identiteitstoetsing om die egtheid van sellyne te dokumenteer en skoonmaakstelsels.

Hierdie prosedures kry dalk tans nie die aandag wat hulle verdien nie.

Elke laboratorium moet 'n toegewyde area vir selkultuur hê wat los staan ​​van laboratoriumgebiede met 'n hoë verkeer.

Slegs noodsaaklike personeel moet direkte toegang tot die selkultuurarea hê. Die plasing van water- en HVAC-eenhede moet ook noukeurig oorweeg word.

Aangesien kraanwater byvoorbeeld 'n bron van mikrobiese besmetting kan wees, moet wasbakke en waterbaddens ver genoeg geleë wees om te voorkom dat dit op steriele werkstasies spat.

Die lugverspreiders van HVAC -eenhede moet ook nie direk bo die broeikaste geïnstalleer word nie, aangesien vormspore en ander besmettings in die werkruimte ingeblaas kan word.

Klein laboratoriums moet veral versigtig wees oor laboratoriumontwerp, want soos hulle groei en nuwe instrumente bekendgestel word, kan die uitleg van die laboratorium meer kwesbaar word vir besoedeling.

Kweekprosedures

Die beoefening van goeie aseptiese tegniek sal help om navorsing te bevorder van die eerste deurgangprosedure tot genomiese analise om te verstaan ​​wat die siekte dryf.

Die eerste stap in 'n aseptiese kweekprosedure is om kruisbesmetting te vermy deur slegs met een sellyn op 'n slag te werk.

Toevallige omskakeling van sellyne en kruiskontaminasie tussen kulture vind dikwels plaas en kan lei tot foutiewe of misleidende data.

Biologiese veiligheidskaste (BSC's) en werkareas moet streng skoongemaak en ontsmet word tussen kultuursessies.

Gevorderde protokolle in 'n moderne selkultuurlaboratorium vereis gereelde toetsing.

Dit word maandeliks aanbeveel om mykoplasma te toets. Om kruisbesmetting en vermenging van sellyne te voorkom, werk slegs met een seltipe op 'n slag.

Ten slotte, vermy roetine -antibiotika in selkweekmedia, aangesien antibiotika 'n onderliggende besmetting kan maskeer wat nie deur die antibiotika geteiken word nie.

'N Skoon, goed georganiseerde laboratorium met veelvuldige gebruikers met verskillende ervaringsvlakke, moet ook goeie pipetteringspraktyk (GPP) gebruik om akkuraatheid en monsterveiligheid te verseker.

Die eerste stap is om te verseker dat laboratoriummedewerkers per ongeluk die pipetpunt aan nie-steriele media en oppervlaktes raak.

As so 'n fout voorkom, moet die wenk weggegooi word.

Vervolgens vereis selkultuurprosesse vanaf groei en deurgang deur analise almal veilige pipetstelsels met presiese reproduseerbaarheid.

Thermo Scientific se F1-ClipTip-pipetstelsel voorkom dat die pipetpunt in die middel van die toediening val.

Deur 'n veilige seël vir elke monster met presiese monstervolumes te maak, is ClipTip 'n waardevolle hulpmiddel om die ontdekking te bespoedig.

Die gebruik van verbruiksgoedere, kultuurmedia en reagense van hoë gehalte van betroubare vervaardigers is 'n maklike manier om konsekwente prestasie in die laboratorium te verseker.

Verbruiksgoedere en steriele houers moet gemaak word van harse wat vry is van bymiddels wat in monsters of reagense kan uitloog en navorsingsresultate negatief kan beïnvloed.

Skoonmaakprosedures

Om veilige en steriele werkoppervlaktes in stand te hou, moet 'n standaard bedryfsprosedure vir behoorlike instandhouding, skoonmaak en ontsmetting van toerusting, werkoppervlaktes en nie-werkoppervlaktes geïmplementeer word.

Laboratoriumskoonmaak moet enige hoë plat oppervlaktes insluit, soos die bokant van yskaste, vrieskaste en broeikaste, wat stof en ander potensiële kontaminante kan versamel.

Op dieselfde manier as wat 'n kluis u waardevolle besittings beskerm, begin die beskerming van sellyne met 'n betroubare BSC.

Kies 'n BSC wat veilige lugfiltrering verseker en voorkom besmetting van monsters, wat ontwerp is vir die eenvoud van die gebruiker en monsterbeveiliging.

Kultuurmedia moet slegs in die BSC oopgemaak word en laboratoriumpersoneel moet rommel in die BSC-werkspasie vermy.

Gebruik sagte armbewegings om versteurings in die skoon afvloei -lug tydens werk te verminder.

Filter en lugvloei -integriteit moet jaarliks ​​deur 'n gesertifiseerde spesialis getoets word. Binne oppervlaktes moet na elke werksessie skoongemaak en ontsmet word, en alle oppervlaktes, insluitend die skinkbord onder die werkoppervlak, moet maandeliks skoongemaak en ontsmet word met 70% etanol of 'n ander geskikte ontsmettingsmiddel.

Verder moet prosedures geoptimaliseer word om die aantal kere te verminder wat die gebruiker hul hande en arms van die BSC-werkarea verwyder terwyl monsters gemanipuleer word.

Die werk moet so beplan word dat die BSC gelaai kan word met die monsters en voorrade wat nodig is vir die prosedures en dan om afval en skoonmaak na die prosedure te verwyder.

Tydens die prosedure hoef die BSC-operateur slegs met items te werk wat reeds binne die BSC-werkarea is. Gereelde skoonmaakprosedures moet gevolg word en gemors moet onmiddellik skoongemaak word.

Die nuwe prosedures en innoverende protokolle van vandag vereis 'n CO2 -broeikas met gevorderde funksies wat help om te voorkom dat besmettings binne die broeikas gevestig word of kulture binnedring.

Om die basiese kenmerke van CO2 -broeikaste en die toetsvereistes vir suksesvolle eksperimentering te verstaan, is belangrik om 'n ingeligte besluit te neem by die aankoop van 'n broeikas.

Omdat mikroörganismes ons konstante metgeselle is en elke keer as die deur oopgemaak kan word, is dit noodsaaklik om te belê in die nuutste tegnologie-broeikasontwerp om besmetting van selkulture te bekamp.

Soek 'n broeikas wat saam met jou werk om kontaminasie te beheer en te bestry.

Die Thermo Scientific Forma-broeikas kan byvoorbeeld HEPA-filtrasie bied wat die hele kamerlugvolume elke 60 sekondes skrop om ISO 5-skoonkamertoestande binne vyf minute na elke deuropening te vestig.

Hierdie kenmerk is beskikbaar in óf 'n wateromhulde óf 'n direkte hitte-formaat. Direkte hitte broeikaste kan bykomende beskerming bied met 'n outomatiese hoë temperatuur siklus wat tyd bespaar deur die behoefte om interne dele te outoklaveer uit te skakel.

Die Thermo Scientific Heracell CO2 broeikas bied 'n 100% suiwer koper interne kamer en dele, sowel as ontsmetting op hoë temperatuur.

Ook vandag beskikbaar is gevorderde, presiese mikroverwerkerkenmerke vir CO2-sensors, humiditeitsbeheer en datamonitering aan boord wat navorsers in staat stel om hul beste werk in 'n probleemvrye omgewing te verrig.

Belangrike kenmerke van 'n broeikas sluit in:

  • Maklik om skoon te maak oppervlaktes
  • Koper binnekamers
  • Goeie lugfiltrasie - HEPA filters
  • Outomatiese ontsmettingsiklus by hoë temperature
  • Massiewe glas, verdeelde, gasdigte binnedeur
  • Eksterne waterbron
  • Data -aanmelding en aanraakskermkontroles
  • Gevorderde CO2- en O2-sensors

Besoedeling vind die meeste plaas deur vermybare prosedurele foute.

Sonder goeie aseptiese praktyke en konsekwent toegepaste selkultuurbestuursprosedures, het chroniese kontaminasieprobleme 'n groter waarskynlikheid om te voorkom.

'N Laboratorium wat behoorlik bestuur word, bied navorsers 'n omgewing wat die kans op ongelukke en foute verminder en tot meer konsekwente en betroubare prestasie lei.

Die derde en laaste deel van die reeks sal nuttige raad gee oor hoe om 'n membraan- en filtrasieproduk te kies.


Voorkom die verspreiding van die koronavirus

U het die basiese beginsels onder die loep geneem: u dra u masker as dit nodig is, vermy skares en hou afstand. Maar u het waarskynlik steeds vrae. Beskerm die dra van 'n masker jou, ander, of albei? Hoe sal fisiese distansie presies help? En wat moet jy weet oor die nuwe COVID-19-entstowwe?

Besoek ons ​​Coronavirus-hulpbronsentrum vir meer inligting oor koronavirus en COVID-19.

Wat kan ek doen om myself en ander teen COVID-19 te beskerm?

Die volgende aksies help om die verspreiding van COVID-19, sowel as ander koronavirusse en griep te voorkom.

As jy nie ten volle teen COVID-19 ingeënt is nie:

  • Dra 'n gesigmasker, soos deur die CDC aangeraai.
  • Handhaaf ten minste ses voet afstand tussen jouself en ander.
  • Vermy groot byeenkomste.
  • Gaan buite in die buitelug.
  • Word ingeënt sodra jy in aanmerking kom.
  • Vermy noue kontak met mense wat siek is.
  • Verminder om u oë, neus en mond aan te raak.
  • Bly tuis wanneer jy siek is.
  • Bedek u hoes of nies met 'n sneesdoekie en gooi die weefsel in die asblik.
  • Maak voorwerpe en oppervlaktes wat gereeld aangeraak word, gereeld skoon.
  • Was jou hande gereeld met seep en water.

Hierdie grafiek illustreer hoe beskermingsmaatreëls soos die beperking van reis, die vermyding van skares, sosiale distansie en deeglike en gereelde handewas die ontwikkeling van nuwe COVID-19-gevalle kan vertraag en die risiko kan verminder om die gesondheidsorgstelsel te oorweldig.

Watter aktiwiteite buite en binne word as veilig beskou? Maak dit saak of ek ingeënt is? En moet ek nog 'n masker dra?

Volgens nuwe leiding van die CDC kan mense wat volledig ingeënt is, nou aan alle binnenshuise en buitelugaktiwiteite deelneem sonder 'n masker en sonder fisiese afstand. Vir mense wat nie ten volle ingeënt is nie, beveel die CDC voort om maskerdra en ander voorkomende maatreëls in sommige buitelugomgewings en in die meeste binnenshuise omgewings aan te beveel.

As u 'n verswakte immuunstelsel het as gevolg van 'n mediese toestand of medikasie wat u neem, word u moontlik minder beskerm deur die entstof en kan u dus 'n groter risiko hê as u naby ander is wat nie ingeënt is nie. Praat met jou dokter om uit te vind watter veiligheidsmaatreëls jy moet voortgaan om te neem.

Of jy nou ingeënt is of nie, jy moet federale, staats-, stam- en plaaslike wette, en werkplek- of besigheidsvereistes oor maskerdra en fisieke distansie volg.

Die CDC het 'n nuttige grafiek geskep wat die beskerming illustreer wat inenting bied in alle buite- en binne-aktiwiteite, en watter voorkomingsmaatreëls jy nog moet neem as jy nie ingeënt is nie. Om die grafiek te sien, klik hier.

Wat moet ek weet om my hande effektief te was?

Was jou hande gereeld met seep en water vir ten minste 20 sekondes, veral nadat jy na die badkamer gegaan het voordat jy eet nadat jy jou neus geblaas het, hoes of nies en nadat jy enigiets hanteer het wat van buite jou huis af kom.

  • As daar nie seep en water beskikbaar is nie, moet u 'n handreiniger met ten minste 60% alkohol gebruik, wat alle oppervlaktes van u hande bedek en vryf totdat dit droog voel.
  • Was u hande altyd met seep en water as u hande sigbaar vuil is.
  • Die CDC se handewaswebwerf het gedetailleerde instruksies en 'n video oor effektiewe handewasprosedures.

Hoe versprei koronavirus?

Die koronavirus versprei hoofsaaklik van persoon tot persoon. 'n Persoon wat met koronavirus en mdash besmet is, selfs een met geen simptome nie, kan aërosols uitstoot wanneer hulle praat of asemhaal. Aërosols is aansteeklike virale deeltjies wat tot drie uur lank in die lug kan dryf of ronddryf. 'N Ander persoon kan hierdie aërosols inasem en besmet raak met die koronavirus.

Dit kan gebeur tussen mense wat in noue kontak met mekaar is. Druppels wat geproduseer word wanneer 'n besmette persoon hoes of nies, kan in die mond of neuse van mense in die omgewing beland, of moontlik in hul longe ingeasem word.

Oordrag is minder geneig om buite te gebeur, waar lugstrome die virus verstrooi en verdun, as in 'n huis, kantoor of ander beperkte ruimte met beperkte lugsirkulasie. Selfs in die buitelug, moet mense wat nie ten volle ingeënt is nie, CDC-leiding volg oor maskering en fisiese afstand, om risiko nog verder te verminder.

Die risiko van verspreiding as gevolg van kontak met besmette oppervlaktes of voorwerpe word as uiters laag beskou. Volgens die CDC het elke kontak met 'n besmette oppervlak minder as 'n 1 uit 10.000 kans om 'n infeksie te veroorsaak.

Die virus kan in speeksel, saad en ontlasting gestort word, of dit in vaginale vloeistowwe gestort word. Soen kan die virus oordra. Die oordrag van die virus deur ontlasting, of tydens vaginale of anale omgang of orale seks, blyk tans uiters onwaarskynlik te wees.

Hoe kan kontakopsporing die verspreiding van COVID-19 help vertraag?

Almal wat nou in aanraking kom met iemand wat COVID-19 het, loop 'n groter risiko om self besmet te raak en moontlik ander te besmet. Kontakopsporing kan help om verdere oordrag van die virus te voorkom deur mense wat besmet en aansteeklik is vinnig te identifiseer en in te lig, sodat hulle stappe kan doen om nie ander te besmet nie.

Kontakopsporing begin met die identifisering van almal waarmee 'n persoon wat onlangs gediagnoseer is met COVID-19 in aanraking was sedert hy aansteeklik geraak het. In die geval van COVID-19 kan 'n persoon 48 tot 72 uur aansteeklik wees voordat hy simptome begin ervaar.

Die kontakte word in kennis gestel van hul blootstelling. Hulle kan vertel word na watter simptome hulle moet kyk, hulle word aangeraai om hulself vir 'n tydperk te isoleer en, indien nodig, mediese hulp in te win as hulle simptome begin ervaar.

Wat is fisiese afstand en waarom is dit belangrik?

Die COVID-19-virus versprei hoofsaaklik as een persoon druppels of aërosols inasem wat geproduseer word as 'n besmette persoon hoes, nies, praat of asemhaal.

Fisiese distansie verwys na aksies wat geneem is om die verspreiding van 'n aansteeklike siekte te stop of te vertraag. Vir 'n individu verwys dit na die handhawing van genoeg afstand (6 voet of meer) tussen jouself en 'n ander persoon om te verhoed dat jy besmet raak of iemand anders besmet. Opdragte om van die huis af te werk, en die kansellasie van vergaderings en groter geleenthede help om fisiese distansie op gemeenskapsvlak af te dwing.

Wat beteken die nuwe definisie van die CDC vir 'noue kontakte' vir my?

Die CDC het uitgebrei hoe dit noue kontakte van iemand met COVID-19 definieer. Tot op hierdie stadium het die CDC 'n noue kontak gedefinieer as iemand wat 15 of meer bestee het opeenvolgende minute binne ses voet van iemand met COVID-19. Volgens die nuwe definisie is 'n noue kontak iemand wat 15 minute of meer binne ses voet van 'n persoon met COVID-19 deurbring oor 'n tydperk van 24 uur.

Noue kontakte het 'n groter risiko vir infeksie. Wanneer 'n persoon positief toets vir COVID-19, kan kontakspoorsnyers hul noue kontakte identifiseer en hulle aanspoor om kwarantyn te plaas om verdere verspreiding te voorkom. Op grond van die nuwe definisie sal meer mense nou as noue kontakte beskou word.

Baie faktore kan die kanse beïnvloed dat infeksie van een persoon na 'n ander sal versprei. Hierdie faktore sluit in of een of albei mense maskers dra, of die besmette persoon hoes of ander simptome toon, en of die ontmoeting binne of buite plaasgevind het. Alhoewel die "15 minute binne ses voet -reël" 'n nuttige riglyn is, is dit altyd die beste om noue interaksie met mense wat nie in u huis is nie, tot 'n minimum te beperk.

Die nuwe definisie van die CDC is beïnvloed deur 'n geval wat in die CDC beskryf word Weeklikse verslag oor morbiditeit en sterftes waarin vermoedelik 'n korrektiewe beampte in Vermont besmet is nadat hy 17 meter lank was nie-opeenvolgend minute van ses asimptomatiese individue, wat almal later positief getoets het vir COVID-19.

Watter tipe medisyne en gesondheidsvoorrade moet ek byderhand hê vir 'n lang tuisverblyf?

Probeer ten minste 'n voorraad van 30 dae van die nodige voorskrifte in voorraad hê. As u versekering hervullings van 90 dae toelaat, is dit nog beter. Maak seker dat u ook oor-die-toonbank medisyne en ander gesondheidsvoorrade byderhand het.

Mediese en gesondheidsvoorrade:

  • voorskrifmedisyne
  • voorgeskrewe mediese voorrade soos glukose en bloeddrukmoniteringstoerusting
  • koors- en pynmedisyne, soos acetaminophen
  • hoes en verkoue medisyne
  • antidiarree medikasie
  • termometer
  • vloeistowwe met elektroliete
  • seep en op alkohol gebaseerde ontsmettingsmiddel
  • sneesdoekies, toiletpapier, weggooibare doeke, tampons, sanitêre doekies
  • vullissakke.

Watter voorsorgmaatreëls kan ek tref wanneer ek inkopies doen?

Die koronavirus wat COVID-19 veroorsaak, word hoofsaaklik oorgedra deur druppels wat virus bevat, of deur virale deeltjies wat in die lug dryf. Die virus kan direk ingeasem word en kan ook versprei wanneer 'n persoon aan 'n oppervlak of voorwerp wat die virus bevat, raak en dan aan hul mond, neus of oë raak. Daar is geen huidige bewyse dat die COVID-19-virus deur voedsel oorgedra word nie.

Veiligheidsmaatreëls help jou om te verhoed dat jy koronavirus inasem of aan 'n besmette oppervlak raak en aan jou gesig raak.

In die kruidenierswinkel, handhaaf ten minste ses voet afstand tussen jouself en ander kopers. Vee oppervlaktes wat gereeld aangeraak word, soos kruidenierswaens of handvatsels, met ontsmettingsdoeke af. Moenie aan u gesig raak nie. As u 'n lapmasker dra, help u u daaraan om nie aan u gesig te raak nie, en kan u die verspreiding van die virus verder verminder. Gebruik handreiniger voordat jy die winkel verlaat. Was u hande sodra u by die huis kom.

As u ouer as 65 is of om een ​​of ander rede 'n groter risiko het, en u nog nie ingeënt is nie, beperk die reis na die kruidenierswinkel. Vra 'n buurman of vriend om kruideniersware op te tel en dit buite jou huis te los. Kyk of u kruidenierswinkel spesiale ure bied vir ouer volwassenes of diegene met onderliggende toestande. Of laat kruideniersware by jou huis aflewer.

Watter voorsorgmaatreëls is nog steeds nodig as u nie ten volle met die COVID-19-entstof ingeënt is nie?

Dra maskers soos deur die CDC aangeraai. Fisiese afstand. Gaan buite in die buitelug. Vermy oorvol binnenshuise spasies. Was u hande gereeld. As jy nie ten volle ingeënt is nie, is dit noodsaaklike voorsorgmaatreëls wat jy moet tref om jou risiko te verminder om koronavirus op te doen of te versprei.

Maar wat van ander voorsorgmaatreëls wat u moontlik tref? Help hulle, of is dit reg om hulle te laat gaan? Kom ons kyk.

U hoef nie handskoene te dra tydens boodskappe nie. Dit is waar dat 'n persoon besmet kan word as hulle aan 'n oppervlak of voorwerp raak wat virale deeltjies op het, en dan aan hul mond, neus of oë raak. Maar dit is nie die belangrikste manier waarop die virus versprei nie. Wat meer is, handskoene sal nie hierdie tipe oordrag verhoed nie, en kan dit selfs meer waarskynlik maak dat jy aan jou gesig sal raak. Was eerder u hande voordat u die huis verlaat, gebruik ontsmettingsmiddel wanneer u op pad is en was u hande weer as u by die huis kom. Probeer om tussendeur nie aan jou gesig te raak nie.

Jy hoef nie kruideniersware of wegneemhouers te ontsmet nie. Die risiko van infeksie deur voedsel of voedselverpakking is baie klein. Die CDC raai die gebruik van ontsmettingsmiddel wat bedoel is vir harde oppervlaktes op karton of ander kruideniersware aan, wat die chemikalieë kan absorbeer. As u bekommerd is oor die wegneemetes, moet u voedsel na u eie opdiengeregte oordra. En was jou hande en ontsmet jou toonbanke nadat jy jou kruideniersware weggesit het of wegneemhouers hanteer het.

U pos kan uit kwarantyn kom. Pos hou nie 'n groot risiko in nie, en om jou pos vir 'n paar dae opsy te sit voordat dit oopgemaak word, is onnodig. Weereens, jou beste opsie is om jou hande te was nadat jy enigiets wat jy van buite af inbring hanteer het.

U kan u skoonmakers weer in u huis nooi. As u skoonmakers nie heeltemal ingeënt is nie, moet u maskers dra die hele tyd wat hulle in u huis is. As u nie ten volle ingeënt is nie, moet u die huis verlaat terwyl die skoonmakers teenwoordig is, anders kan u na 'n ander deel van die huis verhuis en die deur toemaak. Maak vensters oop om die lugvloei deur die huis te verhoog.

Dit is goed om te gaan swem. Swembaddens is relatief veilig, want die koronavirus versprei nie deur water nie en chloor is 'n ontsmettingsmiddel. As jy nie ingeënt is nie, probeer om fisieke afstand te handhaaf in oorvol poele, maar moenie lapmaskers in die water dra nie: dit is moeilik om deur asem te haal wanneer dit nat is. Dra 'n masker as u nie ingeënt word nie en verminder die tyd in kleedkamers, wat dikwels vol is en nie goed geventileer is nie.

Wat kan Ek doen wanneer sosiale distansiëring?

Probeer om hierdie tydperk van sosiale distansie te beskou as 'n geleentheid om by dinge uit te kom wat u van plan was om te doen.

Alhoewel jy dalk nou die gimnasium vermy, beteken dit nie dat jy nie kan oefen nie. Gaan stap of hardloop buite (doen u bes om ten minste ses voet tussen u en nie-familielede te hou as u buite is). Doen joga of ander binnenshuise oefenroetines as die weer nie saamwerk nie.

Kinders het ook oefening nodig, dus probeer om hulle elke dag buite te gaan vir 'n wandeling of 'n gesinsvoetbal in die agterplaas (onthou, dit is nie die tyd om die kinders in die buurt uit te nooi om te speel nie).

Trek bordspeletjies uit wat stof op u rakke versamel. Hou gesinsfilmaande. Bly op hoogte van boeke wat jy bedoel het om te lees, of doen 'n gesinsvoorlees elke aand.

Dit is belangrik om verbind te bly, al moet ons dit nie persoonlik doen nie. Bly feitlik in kontak deur telefoonoproepe, Skype, Zoom, video en ander sosiale media. Geniet 'n rustige geselsie met 'n ou vriend wat jy van plan was om te bel.

As alles misluk, gaan slaap vroeg en slaap ekstra!

Moet ek 'n gesigmasker dra?

Die koronavirus wat COVID-19 veroorsaak, word hoofsaaklik oorgedra deur virale deeltjies wat in die lug dryf of deur druppels wat virus bevat. Selfs mense wat besmet is, maar nie simptome het nie, of wat nog nie simptome het nie, kan ander besmet. Maskers help om verspreiding te verminder, en daarom het die CDC lank aangeraai om masker te dra, benewens fisieke afstand.

Maar in Mei 2021 het die CDC hul leidrade oor die dra van maskers hersien en hul advies aangepas, afhangende van die persoon se inentingstatus, asook die aard en ligging van die aktiwiteit. Daar is 'n paar redes hiervoor. Eerstens het ons geleer dat oordrag baie minder in die buitelug plaasvind, waar lugstrome die virus meer versprei en verdun. Boonop is al hoe meer mense ingeënt. Diegene wat ingeënt word, beskerm hulle nie net teen infeksie nie, maar dit is ook minder geneig om ander te besmet.

Volgens die nuwe CDC -riglyne kan volledig ingeëntes nou deelneem aan alle binne en buite aktiwiteite sonder 'n masker en sonder fisiese afstand. Vir mense wat nie ten volle ingeënt is nie, beveel die CDC voort om maskerdra en ander voorkomende maatreëls in sommige buitelugomgewings en in die meeste binnenshuise omgewings aan te beveel.

Die CDC het 'n nuttige grafiek opgestel wat illustreer wat die beskerming teen inenting buite en binne bied en watter voorkomingsmaatreëls u nog moet neem as u nie ingeënt word nie. Om die grafiek te sien, klik hier.

Watter soort masker moet jy dra? Die CDC beveel maskers aan wat gemaak is van twee of meer lae wasbare, asemende materiaal. Chirurgiese maskers is ook effektief. Maak seker dat die masker jou neus en mond heeltemal bedek en styf teen die kante van jou gesig pas sonder om enige gapings te laat.

Alhoewel N95-maskers die doeltreffendste is, moet hierdie maskers van mediese aard voorbehou word vir gesondheidsorgwerkers.

Chirurgiese maskers word verkies as jy na iemand omgee wat COVID-19 het.

Ek het die afgelope tyd meer mense gesien wat twee maskers dra. Moet ek dubbelmasker wees?

In situasies waar u 'n masker moet dra, is dubbelmaskering steeds 'n goeie idee. 'n Laboratoriumstudie gepubliseer in MMWR waargeneem gemaskerde en ontmaskerde dummies wat aërosoldeeltjies uit 'n mondstuk vrystel toe hulle gesimuleer is om te hoes of asem te haal. Die studie het bevind dat die dra van 'n meerlagige lapmasker oor 'n chirurgiese masker of 'n styf toegeruste chirurgiese masker die beskerming van beide die maskerdraer en ander aansienlik verhoog.

By dubbele maskering beveel die CDC aan om 'n stewige lapmasker bo 'n chirurgiese masker te dra. Chirurgiese maskers bied beter filtrasie, maar is geneig om los te pas. Doekmaskers maak enige gapings toe en bied nog 'n laag beskerming. Chirurgiese maskers word soms mediese maskers of mediese proseduremaskers genoem.

Om 'n chirurgiese masker aan te pas vir 'n stywer pasvorm met 'n metode genaamd "knoop en insteek" bied ook goeie beskerming. Om 'n chirurgiese masker te knoop en vas te steek, knoop die oorlusse van 'n 3-laags gesigmasker waar dit by die rand van die masker aansluit, en vou dan die onnodige materiaal onder die rande. Klik hier vir video -instruksies oor hoe om 'n chirurgiese masker te knoop en te steek. Maskerpassers, of maskerstutte wat oor 'n lap of chirurgiese masker gedra word, kan ook die pasvorm van die masker verbeter.

In die laboratoriumstudie van die CDC het dubbelmaskering of styfpassende chirurgiese maskers die oordrag van en blootstelling aan aërosols met ongeveer 95% verminder in vergelyking met geen maskering.

Watter tipe maskers is die meeste en die minste doeltreffend?

Ons weet dat die dra van maskers kan help om die verspreiding van koronavirus te voorkom deur druppels wat uitgestraal word te blokkeer wanneer iemand hoes, nies, praat of asemhaal. Maar watter maskers is die beste en die slegste?

Navorsers aan die Duke Universiteit het 'n eenvoudige opstelling geskep wat hulle in staat gestel het om die aantal druppeldeeltjies te tel wat vrygestel is wanneer mense die frase "Bly gesond, mense" vyf keer in 'n ry gepraat het. Eerstens het die deelnemers aan die studie sonder 'n masker gepraat, en daarna het hulle dieselfde woorde herhaal, elke keer met een van 14 verskillende soorte gesigmaskers en bedekkings.

Soos verwag, het N95 -maskers van mediese klasse die beste gevaar, wat beteken dat die minste aantal druppels deurgekom het. Hulle is gevolg deur chirurgiese maskers. Verskeie maskers gemaak van polipropileen, 'n katoen/propileenmengsel en tweelaags katoenmaskers wat in verskillende style toegewerk is, het ook goed gevaar.

Gaiters het die laaste plek ingedeel. Gaiters word ook 'n nekvlies genoem, maar is gewoonlik gemaak van liggewig materiaal en word dikwels deur atlete gedra. Bandanas het ook 'n swak posisie behaal.

'N Paar eenvoudige toetse kan u help om die doeltreffendheid van u masker te bepaal: as u deur u masker kan kyk as u dit teen die lig hou of maklik daardeur kan asemhaal, doen dit waarskynlik nie veel om verspreiding te voorkom nie.

Wie beskerm maskers: die draer, ander of albei?

Ons weet al geruime tyd dat maskers help voorkom dat mense die koronavirus aan ander versprei. Op grond van 'n ontleding van bestaande inligting, beweer 'n nuwe studie dat maskers ook maskerdraers kan beskerm om self besmet te word.

Verskillende maskers, skryf die studieskrywer, blokkeer virale deeltjies in verskillende grade. As maskers daartoe lei dat laer "dosisse" virus ingeasem word, kan minder mense besmet raak, en diegene wat dit doen, kan ligter word.

Navorsers in China het met hamsters geëksperimenteer om die effek van maskers te toets. Hulle het gesonde hamsters en hamsters wat met SARS-CoV-2 (die COVID-19-koronavirus) besmet is, in 'n hok gesit, en sommige van die gesonde en besmette hamsters geskei met 'n versperring van chirurgiese maskers. Baie van die "gemaskerde" gesonde hamsters het nie besmet geraak nie, en diegene wat dit wel het, het minder siek geword as voorheen gesonde "maskerlose" hamsters.

'N Soortgelyke eksperiment kan nie eties by mense gedoen word nie. Maar navorsers het dosisse griepvirus bestudeer en gevind dat mense wat 'n hoër dosis griepvirus ingeasem het, meer geneig is om siek te word en simptome te ervaar. Waarnemings van uitbrake van koronavirus in verwerkingsaanlegte en op vaartuie ondersteun ook die idee dat maskers kan help om maskers te beskerm.

Sonder meer navorsing kan ons nie seker wees dat maskers die draer beskerm nie. Maar ons weet dat hulle nie seermaak nie en dat hulle ander beskerm.

Kan die dra van maskers die dood van COVID voorkom?

Volgens 'n studie wat in die tydskrif gepubliseer is Natuurgeneeskunde, kan wydverspreide gebruik van maskers byna 130,000 van 500,000 COVID-verwante sterftes voorkom wat na raming teen Maart 2021 sal plaasvind.

Hierdie getalle is gebaseer op 'n epidemiologiese model. Die navorsers het, staat vir staat, die aantal mense wat vatbaar is vir koronavirusinfeksie oorweeg, hoeveel blootgestel word, hoeveel word dan besmet (en aansteeklik) en hoeveel herstel. Daarna het hulle verskillende scenario's gemodelleer, waaronder maskers, met die veronderstelling dat sosiale distansieringsmandate in werking sou tree sodra die aantal sterftes 8 per 1 miljoen mense oorskry.

Modelleringstudies is gebaseer op aannames, so die presiese getalle is minder belangrik as die vergelykings van verskillende scenario's. In hierdie studie het 'n scenario waarin 95% van die mense altyd maskers in die openbaar gedra het, gelei tot baie minder sterftes in vergelyking met 'n scenario waarin slegs 49% van die mense (die selfgemelde nasionale gemiddelde van maskers) altyd maskers in die openbaar gedra het.

Hierdie studie versterk die boodskap dat ons kan help om COVID -sterftes te voorkom deur maskers te dra.

Maak dit saak of ons binne of buite ontmoet as ek vriende en familie wil besoek?

Dit is beter om vriende en familie buite te ontmoet. Ons weet dat koronavirus versprei wanneer iemand virusse inasem wat 'n besmette persoon uitstraal deur hoes of nies, of wanneer hulle praat of asemhaal. Navorsing het getoon dat druppels wat virale deeltjies bevat, in 'n beperkte laboratoriumomgewing agt tot 14 minute lank kan bly staan. Kleiner aansteeklike virale deeltjies, wat aërosols genoem word, kan selfs langer in die lug ronddryf.

Buitelug, lugstrome is meer geneig om die virus te versprei en te verdun, wat die oordrag minder waarskynlik maak as in 'n huis, kantoor of ander beperkte ruimte met beperkte lugsirkulasie. Selfs in die buitelug, as u nie ten volle ingeënt is nie, volg die CDC -riglyne oor maskering en fisieke afstand, om die risiko nog verder te verminder.

Kan die COVID-19-virus deur lugversorging versprei?

Ons weet nie seker of die COVID-19-virus deur lugversorging versprei word nie. Maar ons weet wel dat wanneer dit warm en vogtig is, mense meer geneig is om binnenshuis te bly, met die vensters toe en die virus meer geleentheid bied om te versprei.

Coronavirus versprei deur druppels wat 'n besmette persoon uitstraal deur hoes of nies en deur kleiner, aansteeklike virusdeeltjies wat etlike ure in die lug kan ronddryf. Buitelug kan lugstrome die virus verstrooi en verdun, wat oordrag minder waarskynlik maak. Dit is meer waarskynlik dat u die virus binnenshuis inasem, met die vensters toe, ongeag of u die lugversorging aan het of nie.

As jy binnenshuis moet wees saam met iemand buite jou huishouding, verhoog lugsirkulasie deur die vensters so veel as moontlik oop te hou.

Beskerm vitamien D teen COVID-19?

Daar is bewyse dat vitamien D kan help om besmet te raak met die ontwikkeling van ernstige simptome van COVID-19. Ons weet byvoorbeeld dat mense met lae vitamien D -vlakke meer vatbaar is vir infeksies in die boonste lugweë. Een meta-analise het bevind dat mense wat vitamien D-aanvullings geneem het, veral diegene wat lae vitamien D-vlakke gehad het, minder geneig was om akute lugweginfeksies te ontwikkel as diegene wat dit nie gedoen het nie.

Vitamien D kan op twee maniere teen COVID-19 beskerm. Eerstens kan dit help om ons liggame se natuurlike verdediging teen virusse en bakterieë 'n hupstoot te gee. Tweedens kan dit help om 'n oordrewe inflammatoriese reaksie te voorkom, wat getoon is dat dit by sommige mense met COVID-19 bydra tot ernstige siektes.

Ons liggame maak vitamien D wanneer dit aan sonlig blootgestel word. Op vyf of tien minute van die son, op sommige of die meeste dae van die week, op die arms, bene of rug sonder sonskerm, kan u genoeg van die vitamien maak. Goeie voedselbronne vir vitamien D is vetterige vis (soos tuna, makriel en salm), voedsel wat versterk is met vitamien D (soos suiwelprodukte, sojamelk en graan), kaas en eiergele.

Die aanbevole dieetdosis vitamien D is 600 IE elke dag vir volwassenes 70 en jonger en 800 IE elke dag vir volwassenes ouer as 70. 'n Daaglikse aanvulling wat 1 000 tot 2 000 IE vitamien D bevat, is waarskynlik veilig vir die meeste mense. Vir volwassenes neem die risiko van skadelike gevolge toe tot meer as 4000 IE per dag.

Is dit veilig om te reis sodra ek ingeënt is? Wat as ek nie ingeënt is nie?

Leiding van die CDC wat in April 2021 uitgereik is, lui dat ten volle ingeënte mense vryer binne die VSA mag reis. Reisigers hoef nie voor of na reis COVID -toetse te ondergaan nie, en hoef nie in kwarantyn te plaas nie, tensy dit deur die plaaslike of staatsowerhede vereis word.

Die CDC is meer versigtig oor internasionale reis, en let op die verhoogde risiko van variante in ander lande, selfs vir mense wat volledig ingeënt is.

As 'n algemene reël kan reis jou kans om te versprei en COVID-19 te kry verhoog as jy nie ingeënt is nie. Die CDC beveel aan dat ongeënte reise getoets word voor en na binnelandse reis en self-kwarantyn vir 7 tot 10 dae na reis. Hulle ontmoedig mense wat nie ingeënt is nie om buite die VSA te reis.

Alle reisigers moet 'n masker dra wat die neus en mond bedek, 'n fisiese afstand van ses voet van ander hou, mense vermy en gereeld hande was. Almal wat siek is of positief getoets het vir COVID-19, moet nie vlieg indien moontlik.

Bly op die hoogte van reisadvies van regulerende agentskappe.

Is daar 'n entstof beskikbaar?

Op 11 Desember 2020 verleen die FDA toestemming vir noodgebruik (EUA) aan 'n mRNA COVID-19-entstof wat deur Pfizer en BioNTech ontwikkel is. Dit was die eerste COVID-19-entstof wat vir gebruik in die VSA goedgekeur is. 'N Week later verleen die FDA EUA aan 'n mRNA COVID-19-entstof wat deur Moderna ontwikkel is.

Sal die COVID-19-mRNA-entstowwe teen die nuwe koronavirusvariante werk?

Vroeë bewyse dui daarop dat die Pfizer/BioNTech mRNA-entstof effektief is teen die nuwe koronavirusvariante. Die moderna mRNA -entstof word getoets teen die nuwe variante.

Die twee nuwe variante is meer aansteeklik as die vorige SARS-CoV-2-variante, maar dit lyk nie asof dit dodeliker is nie. Een, genaamd B.1.1.7, is die eerste keer in die Verenigde Koninkryk opgespoor. Die ander, genaamd B.1.351, het sy oorsprong in Suid -Afrika. Albei variante is nou in lande regoor die wêreld opgespoor.

Albei variante bevat mutasies op die virus se piekproteïen. Spike-proteïene op die oppervlak van die SARS-CoV-2-virus bind aan en laat die virus toe om menslike selle binne te gaan. Interessant genoeg deel beide variante 'n sleutelmutasie (genoem N501Y) op die piekproteïen, wat die virus in staat stel om sterker aan menslike selle te bind. Hierdie mutasie maak die nuwe variante meer aansteeklik as vorige SARS-CoV-2 variante.

Om die doeltreffendheid van die Pfizer/BioNTech mRNA-entstof teen die nuwe variante te toets, het navorsers 'n virus met die N501Y-mutasie geskep. Daarna het hulle bloedmonsters geneem van 20 deelnemers wat by hul entstofproef ingeskryf het en dit blootgestel aan die gemuteerde virus. Die bloed van die deelnemers bevat menslike selle sowel as teenliggaampies wat gemaak is in reaksie op die Pfizer/BioNTech -entstof. Hulle het gevind dat die teenliggaampies die gemuteerde virus geblokkeer het om menslike selle net so effektief te besmet as wat dit die virus sonder die mutasie geblokkeer het.

Meer studie is nodig om te sien of hierdie resultate stand hou in werklike wêreld toestande. Dit is ook nie bekend hoe lank hierdie beskerming kan duur nie en of die entstowwe sal werk teen ander mutasies wat in hierdie variante voorkom.

Wat weet ons van die Moderna COVID-19-entstof wat die FDA vir noodgebruik goedgekeur het?

Op 18 Desember 2020 het die FDA magtiging vir noodgebruik (EUA) verleen aan 'n mRNA COVID-19-entstof wat deur Moderna in samewerking met wetenskaplikes van die NIH ontwikkel is. Die entstof is goedgekeur vir gebruik by mense van 18 jaar en ouer. Dit is die tweede COVID-19-entstof wat vir gebruik in die VSA gemagtig is. (Die Pfizer/BioNTech-entstof het EUA gedurende die vorige week ontvang.)

Die FDA het EUA toegestaan ​​op grond van hul eie analise van doeltreffendheids- en veiligheidsdata sowel as op die aanbeveling van die advieskomitee vir entstowwe en verwante biologiese produkte (VRBPAC). VRBPAC is 'n groep eksterne kundiges in aansteeklike siektes, inenting, mikrobiologie, immunologie en ander verwante terreine.

In inligtingsdokumente wat aan die FDA voorgelê is, het die Moderna-entstof 'n algehele doeltreffendheid van 94,1% getoon om COVID-19 te voorkom. In hierdie studie het 30 400 volwassenes die helfte van die entstof ontvang, die helfte 'n soutwater placebo -opname. Daar was 196 infeksies onder die studiedeelnemers. Hiervan was 185 in die placebo-groep en 11 was in die entstofgroep. Al 30 gevalle van ernstige COVID het in die placebo -groep voorgekom, wat sterk daarop dui dat die entstof die risiko van ernstige siektes verminder.

Die entstof was eweneens effektief by mense ouer en jonger as 65 jaar, by mans en vroue, by mense met en sonder mediese toestande wat 'n groot risiko vir ernstige siektes en verskillende rasse- en etniese groepe veroorsaak.

Die mees algemene newe-effekte van die entstof was pyn by die inspuitplek, moegheid, hoofpyn, spierpyn, gewrigspyn en kouekoors.

Hierdie entstof benodig twee dosisse, met vier weke uitmekaar. Ons weet nog nie hoe lank immuniteit teen hierdie entstof sal duur nie.

Die Moderna-entstof bevat sintetiese boodskapper-RNA (mRNA), genetiese materiaal wat menslike selle binnedring en hulle opdrag gee om die proteïen wat op die oppervlak van die SARS-CoV-2-virus voorkom, te produseer. Die liggaam herken die spike -proteïen as 'n indringer en produseer teenliggaampies daarteen. Kort daarna breek die sel die mRNA in onskadelike stukke af. As die teenliggaampies later die werklike virus teëkom, is hulle gereed om dit te herken en te vernietig voordat dit siekte veroorsaak.

Anders as die Pfizer-entstof, wat ultrakoue berging vereis, kan die Moderna-entstof by normale vrieskastemperature gestoor word. Dit kan groter verspreiding moontlik maak na apteke en ander fasiliteite wat nie vir ultrakoue berging toegerus is nie.

Wat weet ons van die Pfizer/BioNTech COVID-19-entstof wat die FDA vir noodgebruik goedgekeur het?

Op 11 Desember 2020 verleen die FDA toestemming vir noodgebruik (EUA) aan 'n mRNA COVID-19-entstof wat deur Pfizer en BioNTech ontwikkel is. Die entstof is goedgekeur vir gebruik by mense van 16 jaar en ouer. Dit is die eerste COVID-19-entstof wat vir gebruik in die VSA gemagtig is.

Die FDA het EUA toegestaan ​​op grond van hul eie analise van doeltreffendheids- en veiligheidsdata sowel as op die aanbeveling van die advieskomitee vir entstowwe en verwante biologiese produkte (VRBPAC) op 10 Desember. VRBPAC is 'n groep buite-kundiges in aansteeklike siektes, entstofkunde, mikrobiologie, immunologie en ander verwante velde.

Resultate van die Pfizer/BioNTech -entstofproef is in die New England Journal of Medicine. Die data het getoon dat die entstof die risiko van COVID-19 met 95%verminder. By die verhoor is byna 44 000 volwassenes ingeskryf, wat elkeen twee skote gekry het, met 'n afstand van drie weke uitmekaar, die helfte het die entstof gekry en die helfte 'n placebo ('n skeut soutwater). Van die 170 gevalle van COVID-19 wat in die studiedeelnemers ontwikkel het, was 162 in die placebo-groep en agt in die entstofgroep. Nege van die 10 ernstige COVID-gevalle het in die placebo-groep voorgekom, wat daarop dui dat die entstof die risiko van beide ligte en ernstige COVID verminder het.

Volgens die NEJM artikel, die entstof was insgelyks effektief in studiedeelnemers van verskillende rasse en etnisiteite, liggaamsgewigkategorieë, teenwoordigheid of afwesigheid van naasbestaande mediese toestande en ouderdomme (jonger en ouer as 65). Dit is opmerklik dat die FDA gemaklik gevoel het met die goedkeuring van die entstof vir 16- en 17-jariges, al was die aantal tieners wat by die studie ingeskryf was, klein.

Nie een van die deelnemers aan die studie het ernstige newe -effekte ervaar nie. Die meeste het egter pyn op die inspuitplek gehad. Ongeveer die helfte van diegene wat die entstof ontvang het, het ook ligte tot matige moegheid of hoofpyn of albei gerapporteer. Rillings en koors was ook redelik algemeen. Simptome verdwyn byna altyd binne 24 tot 48 uur.

Hierdie entstof benodig twee dosisse, met 'n afstand van drie weke. Alhoewel die entstof na die eerste dosis redelike beskerming bied, bied dit sterker beskerming na twee dosisse. Ons weet nog nie hoe lank immuniteit teen hierdie entstof sal duur nie.

Die Pfizer/BioNTech -entstof is 'n mRNA -entstof. Die entstof bevat sintetiese boodskapper-RNA (mRNA), genetiese materiaal wat instruksies vir die maak van proteïene bevat. Binne-in die liggaam betree die mRNA menslike selle en gee hulle opdrag om 'n enkele komponent van die SARS-CoV-2-virus te vervaardig en die "spike" proteïen wat op die oppervlak van die virus voorkom, te produseer. Die liggaam herken die spike -proteïen as 'n indringer en produseer teenliggaampies daarteen. As die teenliggaampies later die werklike virus teëkom, is hulle gereed om dit te herken en te vernietig voordat dit siekte veroorsaak. mRNA-entstowwe moet teen baie koue temperature gestoor word en onbehoorlik gestoor entstowwe kan onaktief word.

Gesondheidswerkers en inwoners en personeel van langtermynversorgingsfasiliteite sal die eerste entstof kry.

Moet ek die COVID-19-entstof kry as ek reeds COVID-19 gehad het?

Selfs mense wat reeds siek geword het met COVID-19, kan volgens die CDC baat by die entstof.

Hier is wat ons weet. COVID-19 kan tot ernstige siektes en langtermynkomplikasies lei, selfs by jonger mense en diegene sonder onderliggende mediese toestande. Ons weet ook dat dit moontlik is dat iemand wat reeds COVID-19 gehad het, weer besmet word, alhoewel dit nie gereeld voorkom nie.

Aan die ander kant weet ons nie hoe lank die natuurlike immuniteit teen COVID-19 beskerm nie. Dit is nie duidelik of die sterkte of duur van natuurlike immuniteit verskil op grond van die erns van die aanvanklike siekte nie. Ons weet ook nie hoe lank immuniteit wat deur entstowwe verleen word, duur nie.

Tydens die aanvanklike ontplooiing van die entstof aan werkers in die frontlinie en mense in langtermynversorgingsfasiliteite soos verpleeginrigtings, sal mense wat vir die entstof in aanmerking kom, dit kry, ongeag of hulle voorheen besmet was of nie. Hulle is nie word getoets vir teenliggaampies voor inenting.

Namate wetenskaplikes meer leer oor natuurlike immuniteit na COVID -siekte, kan inentingskriteria wat gebaseer is op die teenwoordigheid van teenliggaampies in die toekoms 'n rol speel.

Sal die COVID -entstof my verhinder om ander te besmet?

Die antwoord is, ons weet nie.

Kliniese toetse van die Pfizer/BioNTech- en Moderna-entstowwe het bevind dat albei goed werk om simptomatiese COVID-19-siektes te voorkom, insluitend ernstige COVID-19. Die proewe het egter nie gemeet of 'n persoon wat ingeënt is minder geneig is om die virus na iemand anders te versprei nie.

Dit is moontlik dat die entstowwe teen COVID-19-siekte beskerm deur te verhoed dat 'n persoon in die eerste plek besmet word. Dit is egter ook moontlik dat die entstof 'n persoon teen COVID-19-siekte beskerm, maar dit verhoed nie dat iemand besmet raak nie. Met ander woorde, 'n ingeënt persoon kan 'n repliserende virus in hul neus en keel hê, selfs al word hy beskerm teen siekte.

Maar beteken dit dat jy genoeg virus in jou neus en keel het om iemand anders te besmet? Nie noodwendig. Dit is moontlik dat die immuunrespons wat deur die entstof veroorsaak word, wat jou beskerm teen siek word, ook die hoeveelheid virus in jou neus en keel verminder tot 'n punt waar dit onwaarskynlik is dat jy dit na iemand anders sal versprei. Maar ons het meer navorsing nodig om dit te weet.

Die bottom line? As u onder die eerste groepe mense is wat ingeënt is, is dit die beste om maskers te dra en fisiese afstand te handhaaf om ander te beskerm wat nog nie die entstof gekry het nie.

Sodra ek die COVID-19-entstof gekry het, kan ek ophou om ander voorsorgmaatreëls te tref?

Die entstof sal jou beskerm om siek te word, maar dit sal jou dalk nie verhoed om ander te besmet nie. Dit is hoekom jy, ten minste vir nou, moet aanhou om 'n masker te dra en fisies van ander te distansieer, selfs nadat jy jou skoot gekry het.

Kliniese toetse van die Pfizer/BioNTech- en Moderna-entstowwe het bevind dat albei goed werk om simptomatiese COVID-19-siektes te voorkom, insluitend ernstige COVID-19. Die proewe het egter nie gemeet of 'n persoon wat ingeënt is minder geneig is om die virus na iemand anders te versprei nie.

Dit is moontlik dat die entstowwe teen COVID-19 beskerm word deur te voorkom dat iemand besmet raak. Dit is egter ook moontlik dat die entstof 'n persoon teen siekheid beskerm, maar dit verhoed nie dat die virus in die neus en keel van die persoon kan herhaal nie.

Beteken dit dat daar genoeg virus in jou neus en keel is om iemand anders te besmet? Nie noodwendig. Maar ons het meer navorsing nodig om dit te weet.

Waar laat dit ons? As jy onder die eerste groepe mense is wat ingeënt word, is dit die beste om aan te hou om maskers te dra en fisiese afstand te handhaaf om ander te beskerm wat nog nie die entstof gekry het nie.

Wat moes gebeur voordat die FDA 'n entstof vir COVID-19 goedgekeur het?

’n Suksesvolle COVID-19-entstof moes die liggaam se immuunstelsel veilig en doeltreffend stimuleer om teenliggaampies te skep wat teen die COVID-19-koronavirus beskerm. Op 11 Desember 2020 verleen die FDA toestemming vir noodgebruik (EUA) aan 'n mRNA COVID-19-entstof wat deur Pfizer en BioNTech ontwikkel is. 'N Week later het die FDA EUA toegestaan ​​aan 'n ander mRNA COVID-19-entstof, hierdie wat deur Moderna ontwikkel is. Minstens twee ander entstofkandidate is naby, en meer moontlike entstowwe vir COVID-19 is in verskillende stadiums van ontwikkeling en toetsing.

Die goedkeuring van 'n entstof vereis dat die volgende stappe voltooi word:

  • Pre-kliniese toetsing: Diere is met die virus besmet. Wetenskaplikes bestudeer hul immuunrespons om te sien watter aspekte van die immuunrespons van kritieke belang kan wees vir beskerming. Gewoonlik word 'n entstof eers by diere getoets. By die opstel van 'n pandemie soos hierdie kan die dierproefstadium egter oorgeslaan word.
  • Fase 1-proewe: 'n Entstof word in klein groepies mense getoets om te bepaal watter dosis die immuunstelsel veilig en konsekwent stimuleer. Op hierdie stadium weet wetenskaplikes nog nie of die immuunrespons wat deur die entstof veroorsaak word, teen die virus sal beskerm nie.
  • Fase 2 -proewe: Die entstof word aan honderde of duisende mense gegee. Wetenskaplikes fokus steeds daarop of die entstof veilig is en lewer 'n konsekwente immuunrespons.
  • Fase 3 -proewe: Hierdie proewe skryf gewoonlik tienduisende mense in. Dit is die eerste fase wat 'n placebo -groep betrek. Dit vergelyk die aantal mense wat in die entstofgroep siek word, met die aantal mense wat in die placebo -groep siek word. Dit is die enigste fase wat kan wys of die immuunrespons wat deur die entstof veroorsaak word, werklik teen infeksie in die regte wêreld beskerm of nie.

Wat is mRNA-entstowwe en hoe werk dit om COVID-19 te help voorkom?

mRNA, of boodskapper-RNA, is genetiese materiaal wat instruksies vir die maak van proteïene bevat. mRNA-entstowwe vir COVID-19 bevat sintetiese mRNA. Binne-in die liggaam betree die mRNA menslike selle en gee hulle die opdrag om die 'spike'-proteïen op die oppervlak van SARS-CoV-2, die virus wat COVID-19 veroorsaak, te produseer. Die liggaam herken die proteïen as 'n indringer en begin teenliggaampies daarteen produseer. Kort daarna breek die sel die mRNA in onskadelike stukke op As die teenliggaampies later die werklike virus teëkom, is hulle gereed om dit te herken en te vernietig voordat dit siekte veroorsaak.

Twee mRNA-entstowwe, een geskep deur Pfizer en BioNTech en 'n ander wat deur Moderna ontwikkel is, is in Desember 2020 deur die FDA toelating verleen vir noodgebruik (EUA).

Kan 'n mRNA -entstof my DNA verander?

'N MRNA-entstof en die eerste COVID-19-entstof wat deur die FDA vir toestemming vir noodgebruik (EUA) toegestaan ​​is, kan u DNA nie verander nie.

mRNA, of boodskapper-RNA, is genetiese materiaal wat instruksies vir die maak van proteïene bevat. mRNA-entstowwe vir COVID-19 bevat mensgemaakte mRNA. Binne-in die liggaam gaan die mRNA menslike selle binne en gee hulle opdrag om die "spike"-proteïen te produseer wat op die oppervlak van die COVID-19-virus gevind word. Kort nadat 'n sel die spykerproteïen gemaak het, breek die sel die mRNA in onskadelike stukke af. Op geen stadium gaan die mRNA die sel se kern binne nie, dit is waar ons genetiese materiaal (DNS) woon.

Die immuunstelsel erken die proteïen as 'n indringer en produseer teenliggaampies daarteen. As die teenliggaampies later die werklike virus teëkom, is hulle gereed om dit te herken en te vernietig voordat dit siekte veroorsaak.

Ek is swanger en beplan om uiteindelik my baba te borsvoed. Is dit veilig vir my om 'n mRNA COVID-19-entstof te kry?

Die CDC, American College of Obstetrics and Gynecology (ACOG) en Society for Maternal-Fetal Medicine is dit eens dat die nuwe mRNA COVID-19-entstowwe (Pfizer/BioNTech en Moderna) aan swanger en borsvoedende persone aangebied moet word. Maar daar is nog baie wat ons nie weet oor die veiligheid van die entstowwe in hierdie bevolkingsgroep nie, en u eie dokter kan u die beste advies gee oor u persoonlike gesondheidsrisiko's en -voorkeure.

Hier is 'n paar faktore om te oorweeg. Ten eerste, hoewel die werklike risiko vir ernstige COVID-19-siektes en sterftes onder swanger individue baie laag is, is dit hoër in vergelyking met nie-swanger individue uit dieselfde ouderdomsgroep. Daarbenewens dui navorsing daarop dat COVID-19 die risiko van voortydige geboorte kan verhoog, veral vir mense met ernstige siektes. Die oordrag van die virus van moeder na baba tydens swangerskap is moontlik, maar dit blyk 'n seldsame gebeurtenis te wees.

mRNA-entstofproewe het nie doelbewus swanger individue ingesluit nie, so ons kennis aangaande die veiligheid van mRNA COVID-19-entstowwe tydens swangerskap is beperk. In dierstudies het mRNA -entstowwe geen vrugbaarheid beïnvloed of probleme met swangerskap veroorsaak nie. mRNA-entstowwe bevat geen virus nie, dus kan hulle nie COVID-19 in 'n vrou of haar baba veroorsaak nie. En ons liggame breek vinnig af en elimineer mRNA -deeltjies wat in die entstof gebruik word, sodat dit onwaarskynlik is dat hulle die plasenta kan bereik of oorsteek. Aan die ander kant kan die immuniteit wat 'n vrou genereer deur inenting die plasenta oorsteek, en kan dit help om die baba veilig te hou na geboorte.

Kenners meen ook dat dit heel waarskynlik veilig is om 'n mRNA-COVID-19-entstof te kry as u borsvoed, hoewel mense wat borsvoed nie by die entstofproewe ingesluit is nie. Wanneer 'n persoon ingeënt word terwyl hy borsvoed, ontwikkel hul immuunstelsel teenliggaampies wat teen COVID-19 beskerm. Hierdie teenliggaampies kan deur die borsmelk na die baba oorgedra word en help waarskynlik teen infeksie.

Wat is adenovirus-entstowwe? Wat weet ons van adenovirus-entstowwe wat vir COVID-19 ontwikkel word?

Adenovirusse kan verskillende siektes veroorsaak, insluitend verkoue. Hulle word in twee toonaangewende COVID-19-entstofkandidate as kapsules (die wetenskaplike term is vektore) gebruik om die koronavirus-pikproteïen in die liggaam te lewer. Die piekproteïen spoor die immuunstelsel aan om teenliggaampies daarteen te produseer, wat die liggaam voorberei om die SARS-CoV-2-virus aan te val as dit later die liggaam besmet.

In Desember 2020 het AstraZeneca belowende resultate gepubliseer van 'n op adenovirus gebaseerde entstof wat dit saam met navorsers aan die Universiteit van Oxford ontwikkel het. Die studie is in die tydskrif gepubliseer Die Lancet.

Die Lancet ontleding van die doeltreffendheid van entstowwe is gebaseer op 11,636 deelnemers aan volwasse studies. Hiervan het 4 440 deelnemers 'n volle dosis van die koronavirus-entstof ontvang, vier weke later gevolg deur nog 'n volle dosis. Byna 1 400 deelnemers het 'n halwe dosis van die entstof teen koronavirus ontvang, gevolg deur 'n volledige dosis vier weke later. Die kontrolegroep het 'n entstof teen meningitis ontvang, gevolg deur 'n tweede entstof teen meningitis of 'n placebo ('n soutwaterskoot). Daar was 131 gedokumenteerde gevalle van COVID-19, wat almal ten minste twee weke na die tweede skoot plaasgevind het.

Die koronavirus-entstof het die risiko van COVID-19 met gemiddeld 70,4% verminder, vergeleke met die kontrolegroep. Verbasend genoeg was die entstofkombinasie van die helfte/volle dosis meer effektief, wat die risiko van COVID-19 met 90%verminder het. Die volle dosis kombinasie verminder die risiko met 62%. Nie een van die deelnemers wat die koronavirus-entstof ontvang het, het ernstige COVID-19 ontwikkel of moes in die hospitaal opgeneem word nie. Daar was ook 'n afname in asimptomatiese gevalle.

Die meeste deelnemers aan die studie was tussen die ouderdomme van 18 en 55, en wit. Die deelnemers aan die studie was ook gesond of het 'n stabiele onderliggende mediese toestand. Meer data is nodig om te verstaan ​​hoe effektief hierdie entstof is in mense ouer as 55, mense van kleur en mense met onderliggende mediese toestande. Hierdie entstof is in kliniese proewe regoor die wêreld, insluitend die VSA. Maar hierdie analise was gebaseer op data uit die Verenigde Koninkryk en Brasilië.

Die adenovirus wat in die AstraZeneca/Universiteit van Oxford-entstof gebruik word, is 'n verswakte, onskadelike vorm van 'n sjimpansee-verkoue-adenovirus. Hierdie entstof kan vir etlike maande veilig verkoel word.

Wie sal die eerste COVID-19-entstowwe kry en wie is volgende?

In die middel van Desember het gesondheidsorgwerkers en inwoners en personeel van langtermynsorgfasiliteite die eerste groep in die VSA geword wat die COVID-19-entstof begin kry het. Die CDC het aanbeveel dat volwassenes van 75 jaar en ouer en noodsaaklike werkers daarna ingeënt word. Hulle sal gevolg word deur volwassenes van 65 tot 74 jaar, mense van 16 tot 64 jaar met mediese toestande wat hulle 'n hoë risiko vir ernstige COVID-19 inhou, en oorblywende noodsaaklike werkers.

Staats- en plaaslike owerhede is nie verplig om die CDC se aanbevelings te volg nie; hulle kan die volgorde waarin hulle die entstowwe na goeddunke versprei, herprioritiseer.

Daar is ongeveer 21 miljoen gesondheidsorgwerkers in die VSA wat 'n verskeidenheid werke in hospitale en buitepasiëntklinieke, apteke, mediese nooddienste en openbare gesondheid doen.Nog drie miljoen mense woon of werk in langtermynversorgingsfasiliteite, wat verpleeginrigtings, fasiliteite vir woonstelle en versorgingsgeriewe insluit. COVID-19 het 'n groot tol geëis op inwoners van langtermynversorgingsfasiliteite. Noodsaaklike werkers in die voorkant is diegene wat nie tuis kan werk nie en moontlik nie fisies afstand kan neem terwyl hulle werk nie. Dit sluit eerstereaksiepersoneel in soos brandbestryders en polisie, onderwysers en dagsorgwerkers, poswerkers en mense wat in kruidenierswinkels werk.

Die CDC se leiding is gebaseer op 'n aanbeveling van die Advieskomitee oor Immuniseringspraktyke (ACIP), wat bestaan ​​uit kundiges in vaccinologie, immunologie, virologie, openbare gesondheid en ander verwante terreine. Hul werk is nie beperk tot die COVID-19-entstof nie, hulle adviseer die CDC oor inentings en immuniseringskedules.

Wat is die belowende entstowwe vir COVID-19 wat ondersoek word?

Regoor die wêreld is daar tans meer as 70 verskillende COVID-19-entstowwe in verskillende stadiums van toetsing en ontwikkeling: fase 1 (veiligheid), fase 2 (optimale dosis, skedule en bewys van konsep), en fase 3 (doeltreffendheid, newe-effekte) ) proewe by mense.

In Desember 2020 verleen die FDA twee toestemmings vir noodgebruik (EUA) aan twee COVID-19-entstowwe, een ontwikkel deur Pfizer/BioNTech en 'n ander ontwikkel deur Moderna. Hierdie entstowwe gebruik 'n tipe molekule genaamd boodskapper-RNA (mRNA) wat baie vinnig in massa vervaardig kan word. In hierdie entstowwe veroorsaak mRNA menslike selle om 'n proteïen te maak wat net soos die spykerproteïen lyk wat die oppervlak van die koronavirus vassteek en dit in staat stel om menslike selle binne te dring. Die liggaam herken die spykerproteïen as 'n indringer, en produseer teenliggaampies daarteen. As die teenliggaampies later die werklike virus teëkom, is hulle gereed om dit te herken en te vernietig voordat dit siekte veroorsaak.

Twee ander entstofbenaderings toon ook belofte.

  • 'N Hibriede entstof wat deur AstraZeneca en die Universiteit van Oxford geskep is, gebruik 'n aangepaste, onskadelike vorm van 'n simpele verkoue adenovirus van die sjimpansee om die proteïen van die koronavirus in die liggaam af te voer. Die piekproteïen spoor die immuunstelsel aan om teenliggaampies daarteen te produseer, wat die liggaam voorberei om die SARS-CoV-2-virus aan te val as dit later die liggaam besmet. Die maatskappy het belowende fase 3-proefresultate in Die Lancet in Desember 2020.
  • Nog 'n hibriede entstof gebruik 'n menslike verkoue-adenovirus om die koronavirus-pikproteïen in die liggaam te lewer. Dié platform is ontwikkel deur wetenskaplikes van die Harvard Mediese Skool in samewerking met Johnson en Johnson. Hierdie entstof is in fase 3 proewe.

'N Sentrale vraag vir entstowwe teen COVID-19 is hoe lank beskerming kan duur.

Kan 'n persoon wat met koronavirus besmet is, weer besmet raak?

Natuurlike immuniteit teen COVID-19 is die beskerming wat die gevolg is van siek gewees het. Maar ons weet nie hoe lank die natuurlike immuniteit duur nie, of hoe sterk dit is nie. Kan ons dus staatmaak op natuurlike immuniteit om ons teen herinfeksie te beskerm? Indien wel, vir hoe lank? Ongelukkig weet ons nie die antwoord op een van hierdie vrae nie.

Daar was 'n paar bevestigde gevalle van herinfeksie met COVID-19. Met ander woorde, 'n persoon het siek geword met COVID-19, het herstel en daarna weer besmet geraak. Dit is skaars, maar dit kan gebeur.

Bewyse dui daarop dat mense wat reeds met COVID-19 siek geword het by die entstof baat vind, moontlik selfs meer as ingeënte mense wat nie voorheen besmet was nie. Vir nou kom mense in aanmerking om die COVID-19-entstof te kry, ongeag of hulle voorheen besmet was of nie. Inentingskriteria kan in die toekoms verander, aangesien wetenskaplikes meer te wete kom oor natuurlike immuniteit na COVID -siekte.

Dit is ook opmerklik dat iemand wat herbesmet is en selfs iemand sonder simptome het, die potensiaal het om die virus na ander te versprei. Dit beteken dat as u nie ingeënt is nie, u moet aanhou om maskers te dra, fisiese afstand te beoefen en skares te vermy soos deur die CDC aangeraai.

Wat is kudde-immuniteit, en kan dit 'n rol speel om die verspreiding van COVID-19 te stop?

Kudde-immuniteit vind plaas wanneer genoeg mense immuun word teen 'n siekte om die verspreiding daarvan onwaarskynlik te maak. As gevolg hiervan word die hele gemeenskap beskerm, selfs diegene wat nie self immuun is nie. Kudde -immuniteit word gewoonlik verkry deur inenting, maar dit kan ook voorkom deur natuurlike infeksie.

Kenners het aanvanklik beraam dat iewers tussen 60% en 70% van die bevolking immuun moet wees om kudde-immuniteit te verkry. Meer onlangs het hulle die skatting tot byna 90%verhoog. (Van nou af is ons nie naastenby die getalle wat nodig is om kudde -immuniteit te bewerkstellig nie.)

Die verkryging van kudde -immuniteit deur natuurlike infeksie beteken dat baie mense siek word en baie sterf. Hierdie risiko's kan val as ons effektiewe behandelings ontwikkel. Ons weet egter steeds nie hoe lank mense wat herstel van COVID-19 immuun bly vir herinfeksie nie.

Ideaal gesproke sal ons kudde -immuniteit bereik namate meer mense regoor die wêreld entstowwe ontvang wat blywende immuniteit sal verleen.

Sal 'n pneumokokke-entstof my help beskerm teen koronavirus?

Entstowwe teen longontsteking, soos pneumokokke-entstof en Hemophilus influenza tipe B (Hib)-entstof, help net om mense teen hierdie spesifieke bakteriële infeksies te beskerm. Hulle beskerm nie teen longontsteking van koronavirus nie, insluitend longontsteking wat deel uitmaak van COVID-19. Alhoewel hierdie entstowwe nie spesifiek beskerm teen die koronavirus wat COVID-19 veroorsaak nie, word dit sterk aanbeveel om dit teen ander respiratoriese siektes te beskerm.

Kan my troeteldier my besmet met die virus wat COVID-19 veroorsaak?

Tans word dit as onwaarskynlik beskou dat troeteldiere soos honde of katte die COVID-19-virus aan mense kan versprei. Troeteldiere kan egter ander infeksies versprei wat siekte veroorsaak, insluitend E coli en Salmonella, was u hande deeglik met seep en water nadat u met troeteldiere omgegaan het.

Kan mense troeteldiere met die COVID-19-virus besmet?

Die virus wat COVID-19 veroorsaak, blyk wel van mense na troeteldiere te versprei, volgens die FDA. Navorsing het bevind dat katte en frette meer geneig is om besmet te raak as honde.

As u 'n troeteldier het, doen die volgende om die risiko van infeksie te verminder:

  • Moenie toelaat dat troeteldiere interaksie het met mense of diere wat nie in u huishouding woon nie.
  • Hou katte binnenshuis wanneer moontlik om te verhoed dat hulle met ander diere of mense interaksie het.
  • Loophonde aan 'n leiband wat minstens ses voet van ander mense en diere af gehou word.
  • Vermy hondeparke of openbare plekke waar 'n groot aantal mense en honde bymekaarkom.

As jy siek word met COVID-19, beperk kontak met jou troeteldiere, net soos jy met ander mense sou doen. Dit beteken dat jy moet afsien van troetel, knuffel, gesoen of gelek word, en kos of beddegoed met jou troeteldier deel totdat jy beter voel. As dit moontlik is, sorg dat 'n ander lid van u huishouding u troeteldiere versorg terwyl u siek is. As u u troeteldier moet versorg terwyl u siek is, was u hande voor en nadat u met u troeteldiere omgegaan het en 'n gesigmasker dra.

Wat kan ek doen om my immuunstelsel sterk te hou?

Jou immuunstelsel is jou liggaam se verdedigingstelsel. Wanneer 'n skadelike indringer &mdash soos 'n verkoue- of griepvirus, of die koronavirus wat COVID-19 &mdash veroorsaak in jou liggaam kom, begin jou immuunstelsel 'n aanval. Bekend as 'n immuunrespons, is hierdie aanval 'n reeks gebeure wat verskeie selle betrek en met verloop van tyd ontvou.

Om algemene gesondheidsriglyne te volg is die beste stap wat jy kan neem om jou immuunstelsel sterk en gesond te hou. Elke deel van u liggaam, insluitend u immuunstelsel, funksioneer beter as dit beskerm word teen omgewingsaanvalle en word versterk deur gesonde lewensstrategieë soos hierdie:

  • Moenie rook of damp nie.
  • Eet 'n dieet vol vrugte, groente en volgraan.
  • Neem 'n multivitamien as u vermoed dat u moontlik nie al die voedingstowwe in u dieet kry nie.
  • Oefen gereeld.
  • Handhaaf 'n gesonde gewig.
  • Beheer u stresvlak.
  • Beheer u bloeddruk.
  • As u alkohol drink, moet u slegs matig drink (nie meer as een tot twee drankies per dag vir mans nie, nie meer as een per dag vir vroue nie).
  • Slaap genoeg.
  • Neem stappe om infeksie te voorkom, soos om gereeld u hande te was en u hande nie aan u gesig te vat nie, aangesien skadelike kieme deur u oë, neus en mond kan kom.

Moet ek na die dokter of tandarts gaan vir afsprake sonder 'n dokter?

Baie mediese en tandheelkundige praktyke het omvattende veiligheidsmaatreëls ingestel om u, die dokter en kantoorpersoneel en ander pasiënte te beskerm. As jy angstig voel om persoonlik te besoek, bel die praktyk.

Baie dokterskantore verskaf toenemend telegesondheidsdienste. Dit kan afsprake per telefoonoproep of virtuele besoeke met 'n videokletsdiens beteken. Vra om 'n telefoniese afspraak met u dokter te reël vir 'n nuwe of voortdurende aangeleentheid. As u dokter u persoonlik wil sien, nadat hy met u gepraat het, sal hy of sy u daarvan laat weet.

Wat as jou afsprake nie dringend is nie, maar ook nie in die laerisiko-kategorie val nie? As u byvoorbeeld aangeraai is om periodieke skanderings te doen na die remissie van kanker, as u dokter u gereeld sien om te kyk of u 'n verhoogde risiko het, of u behandeling wissel na gelang van u mees onlangse toetsuitslae? In hierdie en soortgelyke gevalle, bel jou dokter vir advies.

Moet ek my elektiewe chirurgie uitstel?

Die beskikbaarheid van elektiewe operasies en prosedures regdeur die Verenigde State is baie vloeibaar, en kan die aantal gevalle en infeksiekoers in 'n gegewe area weerspieël. As COVID-19-gevalle in jou area toeneem, is dit heel moontlik dat jy reeds gekanselleer of herskeduleer is deur die hospitaal of mediese sentrum waarin jy geskeduleer is om die prosedure te ondergaan. Indien nie, moet u dit oorweeg om enige prosedure wat wag, uit te stel.

Dit gesê, hou in gedagte dat 'elektief' 'n relatiewe term is. U het byvoorbeeld moontlik nie onmiddellik 'n operasie nodig gehad vir sciatica wat veroorsaak word deur 'n hernia nie. Maar die pyn kan so erg wees dat jy dit nie sal kan verduur om die operasie vir weke of dalk maande uit te stel nie. In hierdie geval moet u en u dokter 'n gedeelde besluit neem oor die prosedure.


Selvriesstelsel vir optimale kriopreservering van selle

'N In vitro kultuur van sellyne is 'n noue poging om die fisiologiese toestande na te boots en 'n begrip te ontwikkel van normale reaksies en funksies op sellulêre vlakke. Oor die algemeen word twee tipes gekweekte selle gebruik: eenlaagse kulture waar die selle die vermoë het om aan die substraat vas te maak (matriks-bedekte skottels, T-kolwe, meervoudige putte) en suspensie kulture waar die selle vrylik dryf in 'n geskikte groeimedia.

Die groei van aanhangende sellyne (eenlaagse kulture) hang af van die beskikbaarheid van oppervlakte en die voedingsinhoud in die medium. Aangesien die selle samevloeiing bereik of die medium 'n tekort aan voedingstowwe het, moet die selle onderkweek of bewaar word sodat die lewensvatbaarheid daarvan nie geraak word nie.

Selpreservering is 'n belangrike stap van dierselkultuur en die instandhouding daarvan, wat verskil van die behoud van bakterieë en swamme. Die mees doeltreffende metode vir die bewaring van diereselkultuur is kriopreservering wat deur óf 'n geskikte kriogeniese middel óf vloeibare stikstof bewerkstellig word. Die instandhouding van sellyne is moeilik as gevolg van die stadige groeitempo en lae oorlewingsyfers. Daarom is 'n toepaslike kriopreserveringsmetode noodsaaklik wat die hoë lewensvatbaarheid van die selle (ongeveer meer as 90%) kan bepaal. Kortliks behels die bevriesing 'n stadige verlaging van die temperatuur van die selle tot -30 tot -60 ° C, gevolg deur flitsvries tot minder as -130 ° C. In beginsel, soos die selle die ultralae temperature bereik, word die afbrekende ensieme (proteases en fosfatases) oneffektief wat lei tot 'n toestand van biologiese traagheid. Daar is verskeie faktore wat die lewensvatbaarheid van die bewaarde sellyne belangrik beïnvloed:

  1. a) Groeitoestande ten tye van selherstel
  2. b) Fisiologiese toestand van die bewaarde selle
  3. c) Seldigtheid ten tyde van bewaring
  4. d) tipe kryoprotektant
  5. e) Vries tegniek

Die ideale tydspunt van selbehoud is laat-logaritmiese tot vroeë-stilstaande fase wat die hoogste lewensvatbare selle bied. Die selle moet by die hoër digthede wees, ongeveer 10 6 tot 10 7 selle/ml.

Figuur: Fases vir subkultuur of kryokonservering (gewysig volgens Freshney RI, 2010)

Die keuse van 'n geskikte kriobeskermingsmiddel is ook deurslaggewend. Die kriobeskermende middels soos gliserol of dimetielsulfoksied (DMSO) diffundeer in die sel in en help om dehidrasie tydens bevriesing te voorkom deur gedeeltelike vervanging van intrasellulêre water. Die finale konsentrasie van DMSO tussen 7% en 10% is die mees algemene keuse as 'n kriobeskermingsmiddel. Gliserol word as 'n kriobeskermingsmiddel gebruik wanneer die sterk bi-polêre verbindings soos DMSO 'n nadelige effek op die selle het, vir bv. HL-60-selle differensieer by blootstelling aan DMSO wat subkulture negatief kan beïnvloed. Die Cryopreservation -medium moet altyd dieselfde wees as die van die medium wat gebruik word vir die voortplanting van die kultuur met ekstra fetale beeserum (maksimum 20%). Serumproteïene in die FBS bind met die gifstowwe wat tydens die vries- of ontdooiing uit die gelyseerde selle vrygestel word. Die duimreël wat gevolg moet word by die bewaring van die koue en die daaropvolgende herstel, is stadig vries en vinnig ontdooi.

Die selvriesstelsel van die BT -laboratoriumstelsels benut die beginsel van stadige en konstante tempo wat bevries word, wat ideaal is vir die kouekonservering van die meeste van die soogdiere wat gekweek is en doeltreffend is vir die handhawing van hoë lewensvatbaarheid. Die stelsel is gebruikersvriendelik en gebaseer op 'n hitte-oordragkern om 'n lae termiese massa te handhaaf. Die stelsel bied 'n konstante vriespunt van -1 graad per minuut, daarom wissel die vriesprofiele nie tydens verskillende siklusse nie. Boonop het die stelsel 'n lae termiese massa, dus is daar geen toename in die temperatuur van die plaaslike vrieskas nie, en vermy hitte -afvoer van nuwe monsters na die monsters wat voorheen gestoor is.

Hoe om die vriesstelsel van die sel te gebruik om die selle optimaal te bewaar:


Hoe om mikrobiese groei te beheer: Top 9 metodes

Die volgende punte beklemtoon die top nege metodes wat gebruik word om mikrobiese groei te beheer. Die metodes is: 1. Sterilisasie deur hitte 2. Sterilisasie deur droë hitte 3. Sterilisasie deur vogtige hitte 4. Stoom onder druk: Autoklaaf 5. Tyndallisering (fraksionele sterilisasie) 6. Pasteurisering 7. Sterilisasie deur filtrasie 8. Straling 9. Sterilisasie deur Chemikalieë.

Beheer van mikrobiese groei: Metode #1.

Sterilisasie deur hitte:

Hitte is die mees algemene dodelike middel vir sterilisasie. Artikels kan gesteriliseer word deur óf droë hitte, toegepaste warm lugoond of deur klam hitte wat deur stoom verskaf word. Vogtige hitte is die doeltreffendste en doeltreffendste. Dit maak die mikro-organismes dood deur hul ensieme en proteïene te koaguleer en te denatureer, dit help baie deur die teenwoordigheid van water.

Spore word doodgemaak deur blootstelling aan vogtige hitte by 121 ° C vir 10-30 minute. Droë hitte maak die mikro-organisme dood deur oksidatiewe vernietiging van die selbestanddele. Spore word doodgemaak deur blootstelling aan droë hitte by 160°C vir 1-2 uur.

Beheer van mikrobiese groei: Metode # 2.

Sterilisasie deur droë hitte:

Droë hitte is glasware of ander hittebestendige soliede materiaal wat gebruik word om baie voorwerpe/artikels in die afwesigheid van water te steriliseer. Die items wat gesteriliseer moet word, word 2 tot 3 uur in 'n oond van 160 tot 170 ° C geplaas. Mikrobiese dood is blykbaar die gevolg van oksidasie van selbestanddele en denaturasie van proteïene.

Droë lughitte is minder effektief as klam hitte. Clostridium botulinum-spore word in 5 minute by 121°C deur klam hitte doodgemaak, maar eers na 2 uur by 160°C met droë hitte.

Dit korrodeer nie glasware en metaalinstrumente soos klam hitte nie, en dit kan gebruik word om poeiers, olies en soortgelyke items te steriliseer. Die meeste laboratoriums steriliseer glas, petrisbakkies en pipette met droë hitte. Ten spyte van bogenoemde voordele is droë hitte sterilisasie stadig en nie geskik vir hitte-sensitiewe materiale soos baie plastiek en rubber items nie.

(I) Warmlugoond of sterilisator:

Warm lugoond kan gebruik word vir hitte -sterilisasie, wat termostaties beheer word. Die materiale wat deur droë hitte gesteriliseer kan word, sluit in glasware soos peters, pipette, saamgestelde glasspuite en metaalinstrumente soos tang, kopvelle by 'n temperatuur van 160 tot 180 ° C vir 1,5 tot 3,0 uur. Dit steriliseer die materiaal deur droë verhitting sonder lug en neem langer tyd in vergelyking met klam hitte.

(II) Verbranding:

Hierdie proses word gebruik vir die vernietiging van mikroörganismes deur in die laboratorium te brand wanneer oordragnaald in die vlam van die Bunsenbrander ingebring word. Verbranding word gebruik vir die vernietiging van karkasse, besmette laboratoriumdiere en ander ingespuitte materiaal wat weggegooi moet word.

Spesiale voorsorgmaatreëls moet getref word om te verseker dat uitlaatgasse nie deeltjies bevat wat lewensvatbare mikroörganismes in die atmosfeer bring nie.

Beheer van mikrobiese groei: Metode # 3.

Sterilisasie deur vogtige hitte:

Mikro-organismes en hul spore word teen laer temperatuur vernietig deur klam hitte sterilisasie as deur droë hitte. Vogtige hitte kan egter nie gebruik word om mikroörganismes van waterdigte materiale soos olies en ghries te vernietig en om materiaal in verseëlde houers te droog nie.

Klam hitte word gebruik vir die sterilisasie van kweekmedia en ander vloeistowwe wat nodig is om hul waterinhoud te behou. Dit kan bereik word deur Pasteurisasie en Tyndallization te outoklaveer.

Beheer van mikrobiese groei: Metode # 4.

Stoom onder druk: outoklaaf:

Mikroörganismes en hul spore word vernietig deur die gebruik van versadigde stoom onder druk, wat temperature bo die wat bereik kan word deur kook (tabel). Daarbenewens het dit voordeel van vinnige verhitting, penetrasie en vog in oorvloed die stolling van proteïen.

Die behandeling word gewoonlik uitgevoer in 'n metaalhouer wat bekend staan ​​as 'n outoklaaf, 'n toestel wat ietwat soos 'n luukse drukkoker is, wat met versadigde stoom gevul kan word en vir 'n geruime tyd op die gewenste temperatuur en druk gehou kan word.

Outoklaaf sorg vir klam hitte by 'n temperatuur hoër as 100 ° C. Baie media, oplossing, weggooikulture en besmette materiaal word gereeld met hierdie apparaat gesteriliseer. Oor die algemeen, maar nie altyd nie, word die outoklaaf bedryf teen 'n druk van ongeveer 15 lb/in 2 (by 121 ° C).

Die tyd van operasie hang af van die aard van die materiaal wat gesteriliseer word, tipe houer en die volume byvoorbeeld klein volume vloeistof kan gesteriliseer word deur blootstelling vir 15-20 minute terwyl wanneer groter volumes gesteriliseer moet word, die tyd van behandeling moet wees uitgebrei.

Die Fig. 6.2 Skematiese diagram van 'n laboratorium-outoklaaf wat gebruik word om mikrobiese kultuurmedium te steriliseer.

Beheer van mikrobiese groei: Metode # 5.

Tyndallisasie (fraksionele sterilisasie):

Hierdie metode behels die verhitting van die voorwerp by 100 o C vir drie opeenvolgende dae met inkubasieperiodes tussenin. Weerstandige spore ontkiem tydens inkubasieperiodes. Die voorwerpe word vir 30-45 minute op elk van drie opeenvolgende dae gestoom.

By die eerste geleentheid word vegetatiewe bakteriese sel doodgemaak. Weerstandige spoor ontkiem gedurende die inkubasieperiode in die medium oornag, wat vegetatiewe vorm produseer wat in tweede of derde stooming doodgemaak word. 'n Toestel bekend as stoom arod word vir hierdie tegniek gebruik.

Beheer van mikrobiese groei: Metode # 6.

Baie stowwe soos melk, room en sekere alkoholiese drankies (bier en wyne word onder beheer onder verhitting by temperatuur onder kook, 'n proses bekend as pasteurisasie wat mikro-organismes van sekere soorte doodmaak, maar nie alle organismes vernietig nie.

Pasteurisering steriliseer nie 'n drankie, melk en room nie, maar vermoor die teenwoordige patogene en bederf drasties deur die vlak van nie-patogene mikroörganismes te verminder. Tabel 6.1 toon die aanbevole gebruik van hitte om bakteriële groei te beheer.

Beheer van mikrobiese groei: Metode # 7.

Sterilisasie deur filtrasie:

Filtrasie is die proses om die mikrobiese populasie in 'n oplossing te verminder. Standaard bakteriologiese membraanfilters bestaan ​​uit poreuse membraan en bestaan ​​uit sellulose asetaat, sellulose nitraat, polikarbonaat of ander sintetiese materiaal met porieë.

Membraan met poriegrootte van ongeveer 0,2 pm in deursnee word gebruik om die meeste vegetatiewe selle te verwyder, maar nie virusse uit die oplossing nie. Hierdie filters word gebruik om farmaseutiese middels, oftalmiese oplossings, kultuurmedia, olies, antibiotika en ander hitte-sensitiewe oplossings te steriliseer.

Mikroörganismes soos bakterieë, alge, gis en vorms kan van vloeistowwe geskei word, maar virusse en mycoplasma kan nie uitgeskakel word nie. Dit is nooit moontlik dat filtrasieprosedure wat 'n oplossing van bakterieë vry maak ook vry van virusse sal wees nie.

Beheer van mikrobiese groei: Metode # 8.

Energie wat deur die ruimte in verskillende vorme oorgedra word, word straling genoem. UV-bestraling en ionisasiebestraling is die belangrikste om voorwerpe te steriliseer of te ontsmet.

Ultravioletstraling rondom 2650 Å is redelik dodelik, maar dring nie baie doeltreffend deur glas, vuilfilms, water en ander stowwe nie. Baie lampe is beskikbaar wat 'n hoë konsentrasie ultraviolet lig uitstraal in die mees effektiewe gebied 2600 tot 2700 Å. Dit word gebruik vir die ontsmetting van ultra-oppervlaktes soos inokulasiekamers na skoonmaak met ontsmettingsmiddels.

UV-straling is skadelik vir die mensdom brand die vel en beskadig oog. Mense wat in so 'n area werk, moet seker wees dat die UV-lampe af is wanneer die area in gebruik is. Die toepassing van ultravioletstraling is gemaak vir die bestraling van lug met 'n golflengte van 2650 Å, wat mikrobiedodend is, maar nie so irriterend nie. UV-strale werk deur timiendimere in DNA te induseer en die inmenging met DNA-replikasie van 'n organisme.

Ioniserende bestraling is 'n uitstekende steriliseermiddel en dring diep in voorwerpe deur. Dit sal bakteriële endospore en vegetatiewe selle vernietig, beide prokariotiese en eukariotiese. Gammastraling van 'n radioaktiewe element Kobalt-60 bron word gebruik in sterilisasie van antibiotika, hormone en plastiek weggooibare voorrade soos spuite. Dit word ook gebruik om vleis en ander kosse te steriliseer en te pasteuriseer.

Beheer van mikrobiese groei: Metode # 9.

Sterilisasie deur chemikalieë:

Chemiese middels word gebruik in ontsmetting antisepsis. Chemiese middels word gebruik om mikrobiese groei in voedsel te voorkom en sekere chemikalieë word gebruik om aansteeklike siektes te behandel.

'n Ontsmettingsmiddel word gebruik om 'n stof van infeksies te bevry en is gewoonlik 'n chemiese middel wat siektekieme of ander skadelike mikroörganismes vernietig of virusse inaktiveer, byvoorbeeld 95% van etanol is kiemdoders en 0.1% HgCI2 oplossing word gebruik vir oppervlaksterilisering.

1. Etileenoksied:

(ETO) is een van die mees algemene vorme van chemiese sterilisasie. As gevolg van sy lae kookpunt 10,4 ° C by atmosferiese druk gedra ETO hom as 'n gas by kamertemperatuur. Dit reageer chemies met aminosure, proteïene en DNA om mikrobiese voortplanting te voorkom.

ETO word gebruik vir bestraling van sellulose en plastiek en kan gebruik word vir 'n wye verskeidenheid plastiek (bv. Peters, pipette, spuite en mediese toerusting, ens.) En ander materiale sonder om die integriteit daarvan te beïnvloed.

Etileenoksied (C2H.4O) moet egter in spesiale gevalle gebruik word, aangesien die gas plofbaar en giftig is vir die mens. Dit is gebruik om virusse, bakteriese, swamselle, ens. te ontsmet. Dit vind egter nuttige toepassing in mediese mikrobiologie, aangesien dit ook gebruik word om chemiese asemhalingstoestelle en verskeie ander mediese toerusting te ontsmet.

2. Osoonsterilisasie:

Dit word gebruik as 'n ontsmettingsmiddel vir water en kos. In die VSA gebruik baie munisipaliteite osoontegnologie om water en riool te suiwer. Die O.3 word in gasvormige sowel as vloeibare vorme gebruik as 'n antimikrobiese middel vir die behandeling, berging en verwerking van voedsel, insluitend vleis, pluimvee en eiers.

3. Lae temperatuur gasplasma:

(LTGP) word as alternatief vir etileenoksied gebruik. Dit gebruik 'n klein hoeveelheid vloeibare waterstofperoksied (H2O2) wat met radiofrekwensiegolwe in gasplasma opgewek word. Dit lei tot die opwekking van vrye radikale en ander chemiese spesies wat organismes vernietig.

BPL maak ook 'n wye verskeidenheid bakterieë en swamme dood. Dit word in gasvorm gebruik (word vloeibaar by 20 ° C) en in vloeibare vorm kan dit sera en entstowwe steriliseer.

Daar moet egter op gelet word dat die ontsmettingsmiddels en antiseptika onderskei word op grond daarvan of dit veilig is om op die slymvlies aan te bring, en die veiligheid hang dikwels af van die konsentrasie van die verbinding.


Algemeen

Eienskappe

Hantering van inligting

  1. Kontroleer alle houers vir lekkasie of breek.
  2. Verwyder die bevrore selle uit die droëys-verpakking en plaas die selle onmiddellik by 'n temperatuur onder -130°C, verkieslik in vloeibare stikstofdamp, tot gereed vir gebruik.

Hanteringsprosedure Om die hoogste vlak van lewensvatbaarheid te verseker, ontdooi die flessie en begin die kweek so gou as moontlik na ontvangs. Indien by aankoms, voortgesette berging van die bevrore kultuur nodig is, moet dit in vloeibare stikstofdampfase gestoor word en nie by -70°C nie. Berging by -70°C sal lei tot verlies aan lewensvatbaarheid.

  1. Ontdooi die flessie deur liggies te roer in 'n 37&°C waterbad. Om die moontlikheid van besmetting te verminder, hou die O-ring en dop uit die water. Ontdooi moet vinnig wees (ongeveer 2 minute).
  2. Haal die flessie uit die waterbad sodra die inhoud ontdooi is, en ontsmet deur in te dompel of met 70% etanol te spuit. Al die operasies vanaf hierdie punt moet onder streng aseptiese toestande uitgevoer word.
  3. Plaas die inhoud van die flessie in 'n sentrifugebuis wat 9,0 ml volledige kweekmedium bevat en draai ongeveer 5 x 7 minute teen ongeveer 125 x g.
  4. Resuspendeer die korrel met die aanbevole volledige medium (sien die spesifieke bondelinligting vir die verdunningsverhouding wat deur die kultuur aanbeveel word) en gooi dit in 'n kweekfles van 25 cm of 75 cm2. Dit is belangrik om oormatige alkaliniteit van die medium tydens die herstel van die selle te vermy. Daar word voorgestel dat die kweekvat wat die volledige groeimedium bevat, voor die byvoeging van die inhoud van die flessie ten minste 15 minute in die broeikas geplaas word sodat die medium sy normale pH (7,0 tot 7,6) kan bereik.
  5. Inkubeer die kultuur by 37 ° C in 'n geskikte broeikas. 'N CO van 5%2 in lugatmosfeer word aanbeveel as u die medium gebruik wat op hierdie produkblad beskryf word.

Kwaliteitsbeheer spesifikasies

Geskiedenis

Wettige vrywaring

Die produk word 'AS IS' verskaf, en die lewensvatbaarheid van ATCC & reg -produkte word vir 30 dae vanaf die datum van versending geregverdig, mits die klant die produk gestoor en hanteer het volgens die inligting op die produkinligtingsblad, webwerf en Sertifikaat van ontleding. Vir lewende kulture gee ATCC 'n lys van die mediaformulering en reagense wat effektief vir die produk gevind is. Alhoewel ander ongespesifiseerde media en reagense ook bevredigende resultate kan lewer, kan 'n verandering in die ATCC en/of aanbeveelde protokolle van die depot die herstel, groei en/of funksie van die produk beïnvloed. Indien 'n alternatiewe mediumformulering of reagens gebruik word, is die ATCC-waarborg vir lewensvatbaarheid nie meer geldig nie. Behalwe soos uitdruklik hierin uiteengesit, word geen ander waarborge van enige aard verskaf nie, uitdruklik of geïmpliseer, insluitend, maar nie beperk nie tot, enige geïmpliseerde waarborge vir verkoopbaarheid, geskiktheid vir 'n spesifieke doel, vervaardiging volgens cGMP -standaarde, tipies, veiligheid, akkuraatheid , en/of nie -oortreding.

Hierdie produk is slegs bedoel vir laboratoriumnavorsing. Dit is nie bedoel vir dierlike of menslike terapeutiese gebruik, vir menslike of dierlike gebruik of vir diagnostiese gebruik nie. Enige voorgestelde kommersiële gebruik word verbied sonder 'n lisensie van ATCC.

Alhoewel ATCC redelike pogings aanwend om akkurate en bygewerkte inligting op hierdie produkblad te bevat, lewer ATCC geen waarborge of verklarings oor die akkuraatheid daarvan nie. Aanhalings uit wetenskaplike literatuur en patente word slegs vir inligtingsdoeleindes verskaf. ATCC waarborg nie dat hierdie inligting akkuraat of volledig is nie en dat die kliënt die enigste verantwoordelikheid dra om die akkuraatheid en volledigheid van sodanige inligting te bevestig.

Hierdie produk word gestuur op die voorwaarde dat die kliënt verantwoordelik is vir en alle risiko en verantwoordelikheid aanvaar in verband met die ontvangs, hantering, berging, wegdoening en gebruik van die ATCC-produk, insluitend sonder beperking alle toepaslike veiligheids- en hanteringsvoorsorgmaatreëls om gesondheid te minimaliseer of omgewingsrisiko. As voorwaarde vir die ontvangs van die materiaal, stem die klant in dat enige aktiwiteit wat met die ATCC -produk uitgevoer word, en enige nageslag of aanpassings uitgevoer sal word in ooreenstemming met alle toepaslike wette, regulasies en riglyne. Hierdie produk word 'AS IS' verskaf sonder enige verklarings of waarborge, behalwe soos uitdruklik hierin uiteengesit, en in geen geval sal ATCC, sy ouers, filiale, direkteure, beamptes, agente, werknemers, opdragte, opvolgers en affiliasies aanspreeklik wees vir indirekte spesiale, toevallige of gevolglike skade van enige aard in verband met of voortspruitend uit die gebruik van die produk deur die kliënt. Alhoewel redelike pogings aangewend word om die egtheid en betroubaarheid van materiaal op deposito te verseker, is ATCC nie aanspreeklik vir skade wat voortspruit uit die verkeerde identifikasie of wanvoorstelling van sulke materiaal nie.


Resultate

Apoptotiese DNA -fragmentasie word veroorsaak deur beide DTT en H.2O2 maar op verskillende tydskale

Blootstelling van HL-60-selle aan DTT of H.2O2 het gelei tot 'n tydsafhanklike apoptotiese seldood soos bepaal deur die DNA-fragmentasie-toets (Figuur 1A). Die 2 mM DTT -konsentrasie is in hierdie eksperimente gebruik, aangesien dit die hoogste apoptosevlak in hierdie sellyn veroorsaak (Tartier et al, ter voorbereiding). Apoptotiese DNA -lere word op agarosegel met ethidiumbromied gevisualiseer (Figuur 1B, C). DNA-fragmentasie is aansienlik verhoog na 2 uur en was maksimum op 4-5 uur na behandeling met H2O2 (100 μM). Met DTT (2 mM) begin DNA -fragmentasie 2-3 uur en is dit maksimum 5-6 uur na aanvang van blootstelling aan DTT. Gevolglik word DTT-geïnduseerde apoptose 1-2 uur vertraag relatief tot dié wat veroorsaak word deur H2O2. Die DNA -fragmentasie word veroorsaak deur die verminderde vorm van DTT, aangesien behandeling met geoksideerde DTT nie DNA -fragmentasie veroorsaak nie (data word nie getoon nie).

Apoptotiese DNA-fragmentasie in HL-60-selle behandel deur DTT of H.2O2. (A) HL-60 selle, met 'n konsentrasie van 5 × 105 selle/ml, is behandel met 2 mM DTT (▪) of 100 μM H2O2(○) by 37 ° C. Die geneesmiddels is afgespoel na blootstelling van 2 uur en die selle is by 37 ° C geïnkubeer tot op die vasgestelde tyd. Die persentasie DNA -fragmentasie is getoets soos beskryf in die materiaal en metodes. Waardes is gemiddeldes±standaardfoute (S.E.) van vier eksperimente. (B, C) Agarose-gelelektroforese van DNA wat 0 tot 6 uur uit HL-60-selle onttrek is na behandeling met 2 mM DTT (B) of 100 μM H2O2 (C)

Selle wat met DTT behandel word, toon 'n lae, maar langdurige produksie van intrasellulêre waterstofperoksied

DCFH-DA diffundeer passief deur selmembrane, waar die asetaat deur intrasellulêre esterases afgesplit word om DCFH te vorm. DCFH word algemeen gebruik om die opwekking van reaktiewe suurstof -tussenprodukte op te spoor. 35,36 Resultate wat in Figuur 2A getoon word, dui aan dat selle wat met 2 mM DTT behandel is, die generasie van ROS begin toon binne 5 min na die byvoeging van die geneesmiddel, die ROS-generasie verskyn maksimaal op 15 min, dan verminder generasie tot beheer, onbehandelde vlakke deur 2 uur. Ter vergelyking, selle wat met H2O2 toon die maksimum DCF fluoressensie op die vroegste meetbare tyd punt, dan waarneembare ROS afname met tyd om beheer vlakke te bereik in ongeveer 1 uur (Figuur 2B). Ook, hoewel die H2O2-behandelde selle bereik dieselfde maksimum ROS-vlakke as met menadion-behandelde selle, die DTT-behandelde selle bereik nooit die maksimum ROS-vlak nie. Hierdie data dui daarop dat DTT ROS op 'n stadiger manier produseer as wat plaasvind wanneer 'n bolus van H2O2 word by selle gevoeg en stem ooreen met ons vorige data wat toon dat die halfleeftyd vir DTT-oksidasie (dws produksie van H2O2) is ongeveer 1,3 uur in medium 29 en effens minder as 'n uur in die teenwoordigheid van selle (gehou et al, ongepubliseer).

Intrasellulêre waterstofperoksied gemeet met DCFH-DA in HL-60 selle behandel met 2 mM DTT (A) of 100 μM H2O2 (B) vir verskillende tye. Die positiewe kontrole is selle wat 15 minute lank met 1 mM menadion behandel is (A). DCFH-DA is 30 minute voor ontleding deur vloeisitometrie by selle gevoeg. Die getoonde resultaat is tipies van drie herhaalde eksperimente

DTT-geïnduseerde apoptotiese DNA-fragmentasie word nie verhoed deur H te verwyder nie2O2 gebruik katalase of piruvaat

Katalase reageer ensiematies met H2O2 om water te produseer, maar eksogeen bygevoeg katalase kan nie die meeste seltipes binnedring nie. Piruvaat reageer vinnig met H2O2 en kan beide intrasellulêr en ekstrasellulêr optree. 37 Die data in Tabel 1 toon dat DTT-geïnduseerde apoptose nie voorkom word deur die verwydering van H2O2 deur óf katalase óf piruvaat, alhoewel beide middels apoptotiese DNA-fragmentasie wat veroorsaak word deur H voorkom2O2. So 'n resultaat dui daarop dat, alhoewel DTT H kan genereer2O2 intrasellulêr (Figuur 2A), die H2O2 is nie verantwoordelik vir die DTT-geïnduseerde apoptose nie.

Aktivering van kaspase 3 is nodig vir DTT-geïnduseerde apoptose

Die verwerking van die sogenaamde 'eksekuteur' caspase 3-proteïen in sy aktiewe vorm en daaropvolgende splitsing van verskillende substrate deur die aktiewe caspase 3 hou verband met apoptose wat deur 'n wye verskeidenheid middels veroorsaak word. 6,7,10 Daarom is beide caspase-verwerking en caspase-aktiwiteit gemeet in DTT-behandelde selle, die voormalige deur Western blot-analise van procaspase-splitsing en die latere deur die vermoë van caspases om natuurlike of sintetiese fluorescerende peptiedsubstrate te kloof, te toets.

Caspase 3-splitsing in 19- en 17-kDa-produkte is duidelik na 2 uur DTT-behandeling (Figuur 3A). Die 17- en 11-kDa-fragmente (laasgenoemde word nie deur die teenliggaam wat gebruik word herken nie) is die aktiewe subeenhede van kaspase 3. 10,15,38,39 Die vermoë van geaktiveerde kaspase 3 om 'n natuurlike substraat, DFF-45/ICAD te splyt (Figuur 3B), en die spesifieke sintetiese substraat, z-DEVD-AFC (Figuur 3C), word ook getoon. Splyting van beide substrate was waarneembaar 1-2 uur na die aanvang van DTT-behandeling, en maksimum aktiwiteit met die fluoresserende substraat, ongeveer 0.7 nmol AFC geklief/h/10 6 selle, is bereik op 4-5 uur (Figuur 3C). Splyting van die natuurlike substraat DFF-45/ICAD is spesifiek vir kaspase 3-agtige aktiwiteit aangesien die byvoeging van z-DEVD-cmk, 'n onomkeerbare inhibeerder van kaspase 3, die splitsing daarvan voorkom (Figuur 3B). Sodra dit geklief is, stel DFF-45/ICAD die proteïen DFF-40 vry, ook bekend as Caspase Activated DNase (CAD), wat verantwoordelik is vir ten minste 'n deel van die apoptotiese DNA-fragmentasie, 24 soos wat in Figuur 1 gesien word. 40,41

Caspase 3-aktiwiteit na 2 mM DTT-behandeling. (A) Western klad van procaspase 3 (p32) verwerk tot sy aktiewe peptiede p19 en p17. (B) Westerse klad van DFF-45/ICAD, 'n natuurlike substraat van kaspase 3. Die laaste baan stem ooreen met 6 uur DTT-behandeling plus 200 μM z-DEVD-cmk, 'n kaspase 3-inhibeerder. (C) Caspase-aktiwiteite gemeet as splitsing van fluorescerende peptied-AFC: z-DEVD-AFC vir caspase 3 (•), z-VDVAD-AFC vir caspase 2 (▪), z-LEHD-AFC vir caspase 9 (X) en Ac-IETD-AFC vir caspase 8 (▴). Waardes is middele±S.E. van vier eksperimente. T = 0 is die sellulêre uittreksel sonder DTT -behandeling. Let daarop dat die DTT (5 mM) wat in die kaspasereaksiebuffer ingesluit is, nie kaspases in die kontrolemonsters kan aktiveer nie

Caspases 2, 8, 9 en 1 speel klein rolle, indien enige, in DTT-geïnduseerde apoptose

Oor die algemeen moet caspase 3 deur ander caspases of proteases verwerk word om geaktiveer te word. Daarom het ons vervolgens die moontlike betrokkenheid by thiol-geïnduseerde apoptose van caspases 2, 8, 9 en 1/4 ondersoek, wat almal in ander omstandighede caspase 3 kan aktiveer. 6,15 Die effekte van onomkeerbare seldeurlaatbare kaspase -remmers is eers bestudeer. z-DEVD-cmk, z-LEHD-fmk en Ac-YVAD-cmk, inhibeerders van kaspases 3, 9 en 1/4, onderskeidelik, is getoets, sowel as die pan-kaspase inhibeerder z-VAD-fmk (Figuur 4) ). DTT-geïnduseerde DNA-fragmentasie word aansienlik verminder deur z-VAD-fmk (3.5-voudige afname by 50 μM totale inhibisie met 100 μM – data nie getoon nie), maar word slegs gedeeltelik verminder deur z-DEVD-cmk (tweevoudige afname by 200 μM ). Dit stem ooreen met 'n gedeeltelike afname van PARP-splitsing deur z-DEVD-cmk (data word nie getoon nie). Aan die ander kant voorkom z-DEVD-cmk splitsing van DFF-45 (Figuur 3B). z-VAD-fmk verhoed ook DFF-45-splitsing heeltemal, maar voorkom slegs gedeeltelik splitsing van PARP (data word nie getoon nie). Die gegewens in figuur 4A, wat slegs gedeeltelike beskerming toon deur z-DEVD-cmk, tesame met die PARP-splitsingswaarnemings, dui daarop dat 'n protease bykomend tot caspase 3 betrokke is by die tiool-geïnduseerde pad. Die remmers Ac-YVAD-cmk en z-LEHD-fmk rem nie die DNA-fragmentasie wat deur DTT-behandeling veroorsaak word nie, wat daarop dui dat caspases 1/4 en 9 nie by hierdie pad betrokke is nie. 'N Lae splitsingsaktiwiteit van caspase 9 in die rigting van sy sintetiese substraat is egter waargeneem (Figuur 3C). Die splitsing het 4 uur na behandeling begin en maksimum aktiwiteit bereik (ongeveer 0.1 nmol AFC/h/10 6 selle) na 5 uur.

Effek van kaspase-remmers op DTT- en H.2O2- geïnduseerde apoptose. HL-60-selle is 1 uur vooraf behandel met die aangeduide hoeveelheid kaspase-remmer, en daarna is die selle behandel met 2 mM DTT (A) of 100 μM H2O2 (B) vir 2 uur met toets 4 uur na die verwydering van die middel. Waardes is middele±S.E. van 3-4 eksperimente. Inhibeerders het nie beduidende uitwerking op selle op sigself nie (behalwe vir z-LEHD-fmk wat 10% apoptose veroorsaak)

In teenstelling met die beduidende beskerming teen DTT-geïnduseerde apoptose wat z-DEVD-cmk bied (Figuur 4A), het hierdie caspase 3-remmer geen effek op H2O2geïnduseerde apoptose (Figuur 4B). Alhoewel die caspase 9-remmer z-LEHD-fmk geen effek het op DTT-geïnduseerde apoptose nie, verminder dit H2O2-veroorsaak 25% apoptose (figuur 4B). Hierdie waarnemings dui daarop dat die relatiewe belangrikheid van verskillende caspases ten minste gedeeltelik wissel vir apoptose veroorsaak deur DTT en H2O2.

Die rolle van caspases 2 en 8 is beoordeel deur die skeuringskinetiek van hul sintetiese substrate in ag te neem (Figuur 3C). Aktiwiteit van beide kaspases neem toe 3-4 uur na die aanvang van DTT-behandeling met 'n maksimum aktiwiteit wat op 5 uur bereik word (ongeveer 0,2 nmol AFC/h/10 6 selle). Hierdie toename vind dus later plaas as die toename in kaspase 3-aktiwiteit. Vir caspase 8 is hierdie laat aktivering bevestig deur Western blot, wat toon dat 'n beduidende splitsing van procaspase 8 eers na 4 en 6 uur DTT-behandeling (figuur 5A) gesien word, baie na die aktivering van caspase 3. Die toevoeging van z -DEVD-cmk, 'n inhibeerder selektief vir kaspase 3, tot DTT-behandelde selle veroorsaak 'n beduidende afname in prokaspase 8-splyting (Figuur 5B). Hierdie bevinding, tesame met die stadige en klein aktivering van kaspase 8 in vergelyking met kaspase 3 (Figuur 3C), dui daarop dat kaspase 8 stroomaf van kaspase 3 geaktiveer word. Samevattend dui die data daarop dat kaspases 2, 8, 9 en 1/4 nie goeie kandidate om stroomop van caspase 3 te wees, maar hulle word later geaktiveer in die thiol-geïnduseerde apoptotiese proses as deel van 'n terugvoerlus om die apoptose-sein te versterk. Hierdie aktivering vind plaas op 'n tydstip wanneer selle reeds uitgebreide DNA-fragmentasie ondergaan (Figuur 1A).

Verwerking van procaspase-8. (A) Western klad van procaspase-8 (p55) na die aangeduide tye van DTT-behandeling. Caspase 8-aktivering word gesien as die verlies van die band by 55 kDa (pro-vorm). (B) Effek van 'n inhibeerder van kaspase 3-aktivering op DTT-geïnduseerde verwerking van prokaspase 8. Selle is vir 6 uur met 2 mM DTT±200 μM z-DEVD-cmk behandel. Geen aktivering van caspase-8 word gesien wanneer caspase 3 gerem word nie

DTT-geïnduseerde apoptose behels nie mitochondriale sein nie

Die opening van die mitochondriale permeabiliteitsoorgang (PT) porie blyk 'n algemene gebeurtenis in apoptose te wees wat veroorsaak word deur verskeie stimuli wat oksidatiewe stres veroorsaak, bv. waterstofperoksied of t-butielhidroperoksied. 32,42 Dit is getoon dat wanneer PT plaasvind, die opening van die porieë en die daaropvolgende ineenstorting van die mitochondriale transmembraanpotensiaal (ΔΨm) 'n onomkeerbare stap uitmaak wat tot apoptose lei. 43,44,45 Mitochondriale sitochroom c vrystelling kan ook plaasvind en kan óf die daling in ΔΨ voorafgaanm 12,13,20 of voorkom saam met die PT -porie -opening. 46,47 Met DTT-behandeling is daar 'n effense en stadige afname van die ΔΨm (Figuur 6), wat ongeveer dieselfde tydsverloop volg as wat gesien word vir apoptotiese DNA-fragmentasie in hierdie sellyn, begin by 3 uur en bereik 'n maksimum 6 uur na behandeling (Figuur 1A). Daarteenoor veroorsaak die mitochondriale ontkoppelaar mClCCP 'n vinnige afname in ΔΨm tot lae vlakke. Die klein afname in ΔΨm veroorsaak deur DTT weerspieël slegs nie-spesifieke veranderinge in mitochondria op relatief laat tye in die apoptotiese pad. So 'n aanname word bevestig deur die toevoeging van siklosporien A ('n ligand van siklofilien D wat 'n bestanddeel van die PT-porie is wat bekend is om die opening daarvan te belemmer), 15,48,49 by DTT-behandelde selle. Siklosporien A het geen effek op die stadige afname van ΔΨ niem geïnduseer deur DTT (Figuur 6).

Meting van mitochondriale transmembraanpotensiaal ΔΨm. Opname (persentasie van maksimum beheer) van die fluorochrome DiOC6(3) in HL-60 selle behandel met 2 mM DTT (•) of 2 mM DTT plus 10 μM CSA (○). 100 μM mClCCP (▪) is as 'n positiewe kontrole gebruik. 'N Afname in DiOC6(3) opname deur selle is 'n aanduiding van ontwrigting van die mitochondriale transmembraanpotensiaal ΔΨm. Waardes is middele±S.E. van 3–6 eksperimente

Sitochroom c vlak is ook ontleed deur Western klad in beide sitosoliese en mitochondriale fraksies van DTT of H2O2 behandelde selle. Resultate met DTT -behandeling toon geen beduidende verandering in sitochroom nie c vlakke in enige fraksie (Figuur 7A), behalwe 'n effense sitosoliese toename van sitochroom c na 6 uur. Hierteenoor word HL-60-selle behandel met H2O2 toon 'n vinnige ophoping van sitochroom c in die sitosol (begin by 30 minute) met 'n parallelle afname in die mitochondriale kompartement waar die sitochroom c word onopspoorbaar by 4-6 uur behandeling (Figuur 7B). Geen sitochroomoksidase (subeenheid II) is in die sitosoliese fraksie opgespoor nie, wat aandui dat daar weglaatbare mitochondriale kontaminasie in die preparate was. Aangesien sitosoliese sitochroom c onontbeerlik is vir kaspase 9-aktivering, 15,21 is die laat en klein sitosoliese toename wat hier waargeneem word in ooreenstemming met die laat aktivering van kaspase 9 wat gesien word in die studie van die splitsing van sy fluoresserende substraat in DTT-behandelde selle (Figuur 3C) ). Die data impliseer dat mitochondriale sein nie 'n belangrike rol speel in die DTT-geïnduseerde apoptose nie, maar dit blyk eerder op 'n later tydstip by te dra, miskien as deel van 'n versterkingsmeganisme. Die H.2O2 resultate toon dat HL-60 selle die sitochroom aktiveer c pad na apoptose vroeg in reaksie op ten minste sommige stimuli.

Sitochroom c immunoblotting. Sitochroom c vlak van beide sitosoliese en mitochondriale kompartemente is geassesseer na verskillende blootstellingstye van HL-60-selle aan 2 mM DTT (A) of 100 μM H2O2 (B). Aktienproteïen word gebruik as 'n laaikontrole in die sitosoliese fraksie. Sitochroomoksidase subeenheid II (COX) word gebruik as 'n mitochondriale laaibeheer en as 'n mitochondriale merker. Die afwesigheid daarvan in die sitosoliese breuk dui aan dat daar geen mitochondriale besmetting in die breuk is nie


Betekenis van vlamme:


Vlam die lus : Deur die lus in die vlam van die Bunsen -brander te hou, word alle besmettende organismes doodgemaak en sodoende die lus gesteriliseer. Die lus moet 'n paar sekondes rooiwarm gloei. Maak seker dat jy die lus effens afkoel voordat jy organismes van die inokulumkultuur (die kultuur wat oorgedra moet word) optel nadat jy die lus afgevlam het. Wanneer jy 'n kultuur van 'n bord oorplaas, koel die lus af deur aan die heel rand van agar te raak. By die oordrag van 'n sous, sal die rooiwarm lus 'n sissende geluid maak sodra u dit in die kultuur plaas. Die lus sal outomaties afkoel sodra dit in aanraking kom met die sous, maar wag 'n paar of twee sekondes voordat die lus vol entstof uit die buis verwyder word. (Die warm lus kan aërosole veroorsaak wanneer dit die media wat mikroörganismes bevat, raak. Dit sal veroorsaak dat sommige van die sous en bakterieë kort kook, wat 'n bakterie bevat wat aerosol bevat. Hierdie bakterieë in die lug kan die lugweë of die lug binnedring. As u 'n sisgeluid hoor as u die hitte -gesteriliseerde lus in die souskultuur plaas, dui dit aan dat die lus nie voldoende afgekoel is nie).


Vlam die mond van die proefbuis: Deur die mond van 'n buis deur die vlam van 'n Bunsen -brander te beweeg, ontstaan ​​'n konveksiestroom wat lug uit die buis dryf. Dit verhoed dat lugbesmettings die buis binnedring. Die hitte van die Bunsen -brander laat ook die lug rondom jou werkarea styg, wat die kans verminder dat mikroörganismes in die lug jou kulture kan besmet.


Agar skuins: Kulture word dikwels oorgedra na agar -skuins, benewens sousbuise en agarplate. 'N Agar skuins is 'n proefbuis wat agar bevat, waarin die vaste agar 'n skuins in die proefbuis vorm. As u 'n agar skuins inokuleer, trek die lus met die inokulum baie liggies oor die oppervlak in 'n sigsagformasie terwyl u versigtig is om nie die oppervlak te breek nie. 'n Naald kan in plaas van 'n lus gebruik word om 'n agar-skuins in te ent deur die naald wat die inokulum bevat in die agar te steek (Fig 1).


Inleiding

Menslike granulositiese anaplasmose (HGA), 'n opkomende bosluisoordraagbare zoönose in die Verenigde State en ander dele van die wêreld, word veroorsaak deur Anaplasma phagocytophilum, 'n Gram-negatiewe verpligte intrasellulêre bakterie (Goodman et al., 1996 Dumler en Bakken, 1998). ’n Sleutelkenmerk in die patogenese van HGA is die vermoë van hierdie patogeen om in granulosiete wat normaalweg patogene vernietig, binne te gaan en te prolifereer. A. phagocytophilum induseer tyrosienfosforylering van 'n 160– kDa proteïen by interaksie met die gasheer menslike myeloïede selle (Lin en Rikihisa, 2004). Proteïentirosienfosforylering is nodig vir bakteriële toetrede en verspreiding, soos aangetoon met 'n breë spektrum tyrosienkinase-remmer (Yoshiie et al., 2000 Mott et al., 2002 Lin en Rikihisa, 2003 2004). Onlangse studies het dit getoon A. phagocytophilum veroorsaak spesifiek tyrosienfosforylering van 'n 160 kDa gasheer selproteïen ROCK1 en 'n 190 kDa bakteriële proteïen AnkA (IJdo et al., 2007 Thomas en Fikrig, 2007).

Die menslike genoom kodeer vir ongeveer 90 tyrosienkinases, waarvan 58 reseptortyrosinkinases is en 32 sitosoliese tyrosinkinases (Robinson et al., 2000). As 'n belangrike post-translasionele verandering wat meestal in eukariote voorkom, speel proteïentirosienfosforylering 'n kritieke rol in die regulering van 'n reeks fundamentele biologiese funksies, insluitend sellulêre aktivering, proliferasie, differensiasie en onkogenese (Hubbard en Till, 2000). Verskeie bakteriële effektorproteïene wat deur tipe III-afskeiding of tipe IV-afskeiding (T4S)-apparaat in gasheerselle getranslokeer is, is bekend dat dit tirosiengefosforileer is (Backert en Selbach, 2005). By tirosienfosforylering verskaf hierdie proteïene bakteriële reseptore, of verander gasheer seingebeurtenisse en speel hulle 'n kritieke rol in bakteriese inval en patogenese (Cascales en Christie, 2003 Ghosh, 2004). Gene wat 'n VirB/D4 T4S-masjinerie kodeer, is geïdentifiseer in A. phagocytophilum en ander verpligte intrasellulêre α-proteobakterieë (Ohashi et al., 2002 Dunning Hotopp et al., 2006). Een studie het getoon dat die T4S-masjinerie betrokke is by die infeksie van A. phagocytophilum in gasheerselle (Niu et al., 2006) is die substrate van die T4S -masjinerie egter nie geïdentifiseer nie.

In hierdie studie het ons die 160 kDa proteïen geïdentifiseer, 'n belangrike en toenemend tyrosien-gefosforyleerde proteïen tydens infeksie van A. phagocytophilum (Lin en Rikihisa, 2004), as die A. phagocytophilum AnkA-proteïen, en gedemonstreer dat dit in die gasheersel met Abi-1 interaksie het, en verder dat Abl-1 en AnkA betrokke is by infeksie. Ons resultate het ook getoon dat AnkA die T4S-substraat is.


Bespreking

Ons resultate dui daarop dat die klas I PI3K inhibeerder GDC-0941 ABT-737–gemedieerde mitochondriale apoptose in AML-selle verbeter. Baie kleinmolekule-inhibeerders is ontwikkel om die PI3K/Akt/mTOR-weg te rig, 'n aantreklike kandidaat vir geteikende terapeutika, sommige is in kliniese proewe, en sommige is goedgekeur vir kankerterapie[3]. GDC-0941, wat as 'n enkele middel hoofsaaklik G1 sel-siklus-arrestasie met minimale apoptose, bevorder ABT-737 en geïnduseerde apoptose met BAX-aktivering, wat daarop dui dat blokkade van PI3K/Akt-sein die mitochondriale buitenste membraanpermeabilisering deur ABT-737 in AML-selle verbeter. Dit is bekend dat die doeltreffendheid van BH3 mimetiese ABT-737 as 'n enkele middel beperk is omdat dit styf bind aan Bcl-2, Bcl-xL en Bcl-w, maar nie aan Mcl-1 nie [10]. Vorige verslae dui daarop dat hoë uitdrukking van Mcl-1 bydra tot weerstand teen ABT-737 en dat verminderde uitdrukking van Mcl-1 sensitiwiteit vir ABT-737 [10, 11, 30] verleen. Mcl-1 blokkeer sitochroom c vrystelling uit mitochondria gedeeltelik deur heterodimerisering met proapoptotiese lid van die Bcl-2-familie BAX, waardeur BAX/BAK-aktivering en mitochondriale buitenste membraanpermeabilisering voorkom word en uiteindelik mitochondriale homeostase behoue ​​bly. Daarom is 'n strategie wat Mcl-1 teiken van kritieke belang om tumorselle te sensitiseer vir ABT-737, insluitend AML[10, 11]. Die assosiasie van verlaagde Mcl-1-vlakke met toenames in gesplete caspase-3 of in persentasies selle met verlies van Δ ψm en Bax-aktivering ondersteun die gevolgtrekking dat vermindering van Mcl-1 nou verwant is aan apoptose-induksie. Glikogeen sintase kinase-3 (GSK-3), 'n stroomaf teiken van PI3K/Akt sein wat deur Akt geïnaktiveer word, word geassosieer met die destabilisering van Mcl-1[31], en dit is bekend dat mTOR Mcl-1 translasie positief beheer[ 32]. GDC-0941 en ABT-737 het die groei van borskankerselle sinergisties belemmer, wat die uitdrukking van Mcl-1 verminder [33]. Hierdie resultate dui op die moontlikheid dat alternatiewe apoptotiese weë anders as Mcl-1 bygedra het tot apoptose geïnduseer deur GDC-0941 en ABT-737. In hierdie konteks het onlangse verslag 'n doeltreffende afname van McL-1 in AML-selle getoon na behandeling met dubbele PI3K/mTOR-remmer [34], wat 'n beduidende bydrae van mTOR-sein in die beheer van Mcl-1-stabiliteit aandui.

Baie onlangs het Spender et al. berig dat die gekombineerde inhibisie van PI3K/Akt/mTOR en ABT-737 sinergistiese kaspase-aktivering en toename in Bim/Mcl-1-uitdrukkingsverhoudings geïnduseer het, wat geassosieer is met 'n verlies van c-Myc-uitdrukking in Burkitt se limfoomselle [7]. Die sinergistiese apoptose induksie deur kombinasie van c-Myc inhibeerder met ABT-737 dui daarop dat c-Myc, die stroomaf teiken van PI3K/Akt/mTOR, weerstand teen ABT-737 bevorder [7]. c-Myc is een van die direkte teikengeenprodukte van Stat-5 wat met Akt/mTOR kruisgesprekke het en Bcl-2 en Bcl-xL [6] direk teiken, en die gekombineerde doelwit van Akt/mTOR met behulp van rapamycine en van Bcl Daar is getoon dat -2 en Bcl-xL met behulp van ABT-737 die voortbestaan ​​van Stat-5-afhanklike myeloproliferatiewe neoplasmas [35] onderdruk. Gegewe die voorgestelde belangrikheid van c-Myc in AML-biologie[36], kan verdere studies wat die rol van c-Myc in ABT-737-weerstand ontleed, insiggewend wees.

In hierdie studie het ons die doeltreffendheid van hierdie kombinasie verder ondersoek in AML-selle wat saam met MSC's gekweek is in hipoksiese toestande wat patologiese toestande van die leukemiese BM-mikro-omgewing naboots. Daar is onlangs gerapporteer dat matriks-aangehegte tumorselle 'n aanpasbare reaksie begin wat behels die opregulering van Bcl-2 antiapoptotiese gesinsproteïene Bcl-2 en Bcl-xL deur middel van cap-onafhanklike translasie en FOXO-gemedieerde transkripsie [37]. Op sy beurt was gekombineerde inhibisie van Bcl-2 en PI3K/mTOR in staat om matriks-geassosieerde weerstand van kankerselle effektief te stop [37]. Same-kultuur met MSC bevorder fosforylering van AKT en van mTOR stroomaf teiken pS6K in AML selle, in ooreenstemming met ons vorige bevindings [19]. Alhoewel Bcl-2 en Mcl-1 na bewering in leukemiese selle geïnduseer is in same-kultuur met stromale selle [38], het ons geen verandering in die uitdrukkingsvlakke van hierdie proteïene waargeneem nie. Hierdie verskille hou waarskynlik verband met die tipe stromale selle wat gebruik word (stromale sellyne vs menslike BM-afgeleide stromale selle in ons studie). Ons gepubliseerde data is nietemin in ooreenstemming met bevindings in ander studies en bevestig die waarneming dat menslike BM-afgeleide MSC beskerming bied teen tradisioneel gebruikte chemoterapeutiese middels [39]. Dit is denkbaar dat stroma-geïnduseerde aktivering van PI3K/AKT/mTOR-pad weerstand bemiddel deur post-translasionele modulasie van Bcl-2 familie proteïene, of transkripsionele modifikasie van ander apoptotiese spelers deur middel van FOXO transkripsionele faktor. Opvallend is dat ons beter beskermende effekte van AML pasiënt BM-afgeleide MSCs teen GDC-0941/ABT-737 waargeneem het in vergelyking met normale BM MSCs, en hierdie bevinding regverdig verdere sistematiese studies wat leukemie-afgeleide stromale selle gebruik. In die algemeen toon ons data die potensiaal van PI3K- en Bcl-2/Bcl-xL-remmers om indrukwekkende remming van AML-selgroei te veroorsaak, selfs onder beskermende toestande van stromale ko-kulture.

Ons het die effek van hipoksie op die effektiwiteit van GDC-0941/ABT-737 verder ondersoek. Onlangse studies het getoon dat hipoksie Mcl-1 deur HIF-1 α – afhanklike of – onafhanklike meganismes, op 'n seltipe afhanklike wyse afgereguleer [18]. Hierdie bevindinge dui aan dat hipoksie, 'n bekende weerstandsfaktor, paradoksaal moontlik verhoogde sensitiwiteit van hipoksiese tumorselle kan bemiddel vir BH3-nabootsing ABT-737. In ooreenstemming met die gepubliseerde data, het ons gevind dat hipoksie, 'n toestand wat voorkom by leukemiese BM, die uitdrukkingsvlakke van antiapoptotiese Mcl-1 in MOLM-13 en OCI-AML3-selle verlaag, en die weerstand teen ABT-737 in Mcl-1-afhanklike omgekeer het OCI-AML3 selle. Terwyl die neerslag van Mcl-1 die sensitiwiteit van OCI-AML3-selle skerp verhoog het tot ABT-737 onder normoksiese toestande, is geen verdere sensitiwiteit verleen deur sel in 'n hipoksiese omgewing te kweek nie, wat daarop dui dat vermindering van Mcl-1 'n hoofbemiddelaar van verhoogde sensitiwiteit is van AML -selle onder hipoksie. Alhoewel ons nie verhoogde sensitiwiteit vir ABT-737 of ABT-737/GDC-0941 in HL-60 en MOLM-13 onder hipoksiese toestande waargeneem het nie, het farmakologiese interaksies tussen twee geteikende middels sinergisties gebly. Hierdie sinergisme is gehandhaaf in shMcl-1-geïnfekteerde OCI-AML3, en wys op die bykomende meganismes van sensitisering vir seldood na gekombineerde blokkade van beide weë. Gesamentlik het ons resultate getoon dat alhoewel hipoksie McL-1-afhanklike weerstand teen ABT-737 omgekeer het, in die kombinasie van normoxia GDC-0941/ABT-737 was dit sinergisties, ongeag die stilte van Mcl-1. Hierdie bevindinge dui op die bydrae van ander moontlike meganismes wat mitochondriale apoptose reguleer tydens GDC-0941/ABT-737 behandeling. Rahmani et al. [34] het onlangs getoon dat PI3K/Akt-inhibisie Bim-binding aan Bcl-2/Bcl-xL verhoog het wat deur ABT-737 opgehef is, terwyl gekombineerde behandeling van PI3K/Akt-remmer met ABT-737 Bax/Bak-binding aan Mcl- verminder het. 1, Bcl-2, Bcl-xL. Hierdie bevindinge dui daarop dat apoptose-induksie veroorsaak deur die kombinasie van GDC-0941/ABT-737 'n multifaktoriële proses is, wat die vrystelling van Bim uit Bcl-2/Bcl-xL of Bak/Bax uit Mcl-1/Bcl-2/Bcl-xL komplekse behels. benewens McL-1-afregulering, wat uiteindelik tot apoptose-induksie lei deur middel van Bax/Bak-aktivering.

Oor die algemeen dui hierdie bevindinge aan dat 1) hoë uitdrukking van Mcl-1 nie noodwendig lei tot die weerstand teen ABT-737 in AML-ontploffings wat binne hipoksiese toestande van BM-mikro-omgewing voorkom nie 2) dubbele remming van Bcl-2 en PI3K-paaie belemmer AML-seloorlewing op 'n sinergistiese wyse en kan veral van toepassing wees onder die patologiese toestande van leukemiese BM -mikro -omgewing wat deur ons getoon word om weerstand teen sitotoksiese chemoterapeutiese middels te bevorder.

Samevattend regverdig die gepaardgaande remming van PI3K en antiapoptotiese Bcl-2 familie proteïene verdere ondersoek as aantreklike terapeutiese modaliteit in AML, wat spesifieke meganismes van matriksverwante en hipoksie-geïnduseerde AML-seloorlewing in die BM-mikro-omgewing kan oorkom.