Inligting

Kan Listeria monocytogenes endotoksien as 'n A-B toksien optree?

Kan Listeria monocytogenes endotoksien as 'n A-B toksien optree?


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Ek dink nee, maar ek is nie seker nie aangesien Listeria Gram-positief is en waarskynlik lipopolisakkaried het (uitsondering onder Gram-positiewe bakterieë).

Kan Listeria monocytogenes se endotoksien soos eksotoksien A-B optree? (In watter komponent B komponent A binne -in die sel en komponent A die toksisiteit veroorsaak.)


Met inagneming van groot navorsing wat ons gedoen het nadat die antwoord aanvaar is, moet ek belangrike inligting oor die onderwerp byvoeg. Die ou (en aanvaarde) antwoord volg ter wille van duidelikheid in "" punte.

Ons het gevind dat, ten spyte van die vroeëre verslae, die nuutstes nie daarin geslaag het om endotoksienagtige struktuur in die Listeria-gebore materiaal te vind nie. Die meeste akademiese besprekings oor die kwessie sê dat daar nie 'listeriese endotoksien' bestaan ​​nie, en daarom het ek 'n regte antwoord op 'n 'gekompromitteerde' vraag gegee.

Ek moet sê dat die vraag nog steeds briljant is, want dit het goeie navorsing bevorder en 'n belangrike bron vir almal wat inligting oor listeriese "endotoksien" soek, behoort te wees.

Listeria endotoksien is nie 'n proteïen nie. Dit ontbreek dus aan ensiematiese aktiwiteit en werk indirek deur aan sensitiewe reseptore op makrofage te bind. Dit kan dus nie self lyse veroorsaak nie.

Met inagneming van AB-eksotoksiene, is A-subeenheid 'n proteïen wat ensiematiese aktiwiteit het (verantwoordelik vir toksienwerking) en subeenheid B geen ensiematiese aktiwiteit het nie (proteïen verantwoordelik vir binding aan reseptore).

Die antwoord op u briljante vraag is dus NEE, Listeria endotoksien kan nie optree as AB-eksotoksien nie-proteïen en nie-ensiematies.

Moet ook nie verwar word met Listeriolysin O nie, wat die eXotoxin-proteïen van listeria is, wat porie-vormende proteïene is.


Net om 'n paar belangrike relevante inligting by die antwoord van @Ilan te voeg.

Daar is geen bewyse vir die teenwoordigheid van endotoksien/lipopolisakkaried nie Listeria.

Daar was 'n vroeë verslag van die teenwoordigheid van LPS (Wexler & Oppenheim, 1979) maar dit is weerspreek deur 'n latere studie (Maitra et al., 1986). Die endotoksienaktiwiteit van Gram-negatiewe bakterieë word sterk geassosieer met die lipied A-deel van die LPS. Lipied A word gesintetiseer uit N-asetielglucosamien in 'n drie-stap-pad wat deur die gene lpxA, lpxC en lpxD gekodeer word. Ek het die rye vir die ooreenstemmende verkry E coli genprodukte en het BLAST -soektogte teen die Listeria monocytogenes genoom met hierdie resultate:

lpxA - beste treffer E = 0,11

lpxC - geen noemenswaardige treffer nie

lpxC - beste treffer E = 1e -04

die laaste treffer is op 'n 2,3,4,5-tetrahydropyridine-2,6-karboksilaat N-suksinieltransferase terwyl die E coli geen kodeer vir 'n UDP-3-O- (3-hydroxymyristoyl) glukosamien N-asieltransferase. Die ooreenkoms in die rye blyk te wees omdat hulle albei lede van 'n groot superfamilie van asieltransferases is.

Ek kom tot die gevolgtrekking Listeria monocytogenes sintetiseer nie lipied A nie en het dus geen LPS, en geen endotoksien nie.

Wexler, H. en J. D. Oppenheim. 1979. Isolasie, karakterisering en biologiese eienskappe van 'n endotoksienagtige materiaal van die gram-positiewe organisme Listeria monocytogenes. Infekteer.Immun. 23:845-857.

Maitra, SK et al. (1986) Vestiging van beta-hidroksi-vetsure as chemiese merkermolekules vir bakteriële endotoksien deur gaschromatografie-massaspektrometrie. Appl. Env. Mikrofoon. 52: 510-514


12.1.3: Virulensie -faktore

  • Bygedra deur OpenStax
  • Algemene biologie by OpenStax CNX
  • Verduidelik hoe virulensiefaktore bydra tot tekens en simptome van aansteeklike siektes
  • Onderskei tussen endotoksiene en eksotoksiene
  • Beskryf en onderskei tussen verskillende tipes eksotoksiene
  • Beskryf die meganismes wat virusse gebruik vir adhesie en antigeniese variasie

In die vorige afdeling het ons verduidelik dat sommige patogene meer virulent is as ander. Dit is te danke aan die unieke virulensie faktors geproduseer deur individuele patogene, wat die omvang en erns van die siekte bepaal wat hulle kan veroorsaak. 'N Patogeen & rsquos virulensie faktore word gekodeer deur gene wat geïdentifiseer kan word met behulp van molekulêre Koch & rsquos postulate. As gene wat virulensie -faktore kodeer, geïnaktiveer word, word die virulensie in die patogeen verminder. In hierdie afdeling ondersoek ons ​​verskeie tipes en spesifieke voorbeelde van virulensiefaktore en hoe hulle bydra tot elke stap van patogenese.


Oorsig van L. monocytogenes

          Wetenskaplikes was bewus daarvan Listeria monocytogenes sedert die 1920's (4), maar daaroor is nog baie onbekend. Die lewensiklus daarvan is egter noukeurig bestudeer, aangesien dit verskil van die meeste patogene. Hierdie verskille lei tot variasies tussen effektiewe behandelingsmetodes wanneer dit besmet is met L. monocytogenes en ander algemene gram-positiewe patogene is die spesifieke patogenese daarvan anders as die meeste wat bekend is. L. monocytogenes is steeds 'n warm onderwerp vir navorsing vanweë die berugte dodelike dood deur infeksie (3). Om die meganismes wat gashere gebruik om infeksie te voorkom effektief te ontleed, moet u eers die lewensiklus en virulensie faktore verstaan L. monocytogenes.


Abstrak

Listeria monocytogenes is 'n voedselgedraagde patogeen wat verantwoordelik is vir 'n siekte genaamd listeriose, wat potensieel dodelik is in individue met immuunonderdrukking. Hierdie bakterie, wat die eerste keer as 'n model gebruik is om sel-gemedieerde immuniteit te bestudeer, het oor die afgelope 20 jaar na vore gekom as 'n paradigma in infeksiebiologie, selbiologie en fundamentele mikrobiologie. In hierdie oorsig beklemtoon ons onlangse vooruitgang in die begrip van menslike listeriose en L. monocytogenes biologie. Ons beskryf onverwagte maniere om gasheer se biologie te kap, wat wissel van veranderinge in organelmorfologie tot direkte effekte op gasheertranskripsie via 'n nuwe klas bakteriese effektore genaamd nukleomoduliene. Ons bespreek dan die vordering met die verstaan ​​van infeksie in vivo, insluitend die ontdekking van weefselspesifieke virulensie faktore en die 'wapenwedloop' tussen bakterieë wat meeding om 'n nis in die mikrobiota. Laastens beskryf ons die kompleksiteit van bakteriese regulering en fisiologie, met nuwe insigte in die werkingsmeganismes van 'n reeks riboreguleerders wat krities is vir doeltreffende metaboliese regulering, antibiotika weerstand en interspesie-kompetisie.


Bespreking

Die porievormende proteïen LLO is 'n primêre determinant van L. monocytogenes patogenese wat 'n uitgesproke suur pH-optimum het en in 'n suur vakuolêre kompartement optree om ontsnapping van die bakterie in die gasheer-sitosol te bemiddel. In hierdie studie het ons die rol van die suur -pH -optimum in die patogenese van L. monocytogenes infeksie. Deur residue te ruil met die minder pH-sensitiewe ortoloog PFO, het ons 'n LLO-mutant, L461T, geïdentifiseer wat by 'n neutrale pH 10 keer meer aktief was as wildtipe LLO. L. monocytogenes sintetisering van LLO L461T was 100 keer minder virulent in muise as bakterieë wat die wilde-tipe LLO afskei, wat aandui dat die suur pH optimum van LLO 'n belangrike rol speel tydens infeksie. Weefselkultuurtoetse het aan die lig gebring dat bakterieë wat LLO L461T sintetiseer, nie gebrekkig was in die omvang of pH van fagosomale ontsnapping, verspreiding van sel tot sel of as ontsnapping uit die dubbelmembrane vesikel wat gevorm is tydens verspreiding van sel tot sel nie. Bakterieë wat egter LLO L461T sintetiseer, het gasheerplasmamembrane gepermeabiliseer, soos getoon deur (a) gentamisien sensitiwiteit van intrasellulêre bakterieë, (b) vrystelling van LDH vanaf gasheerselle, en (c) kleuring van DNA binne geïnfekteerde selle met 'n membraan-impermeant kleurstof. Die resultate van hierdie studie dui dus sterk aan dat die suur pH -optimum van LLO nodig is om skade aan besmette gasheerselle te voorkom.

LLO is uniek onder die CDC's deurdat sy aktiwiteit normaalweg by 'n neutrale pH onderdruk word. Die biochemiese basis van die LLO pH-optimum word nie verstaan ​​nie, dit kan pH-sensitiwiteit in membraanbinding, oligomerisering en/of porieëvorming weerspieël. Dit was verbasend dat 'n enkele aminosuurverandering, van leucine na threonine, die hemolitiese aktiwiteit van LLO by 'n neutrale pH aansienlik kon verhoog. Nie leucien of treonien alleen bevat eienskappe wat sensitiwiteit vir pH kan aandui nie. Die verandering van 'n nie -polêre leucien na 'n polêre treonienresidu bied die potensiaal van 'n bykomende waterstofbinding en 'n vermindering in hidrofobisiteit, maar by gebrek aan 'n gedetailleerde struktuur vir LLO, is dit moeilik om die invloed van hierdie veranderinge te bepaal. As ons egter 'n algemene strukturele ooreenkoms met PFO aanneem, omdat LLO en PFO 42% identies is (Rossjohn et al., 1997), dan is die L461T -mutasie geleë op 'n buitenste lus van die vierde domein. Domein 4 is geïmpliseer in beide membraanbinding en oligomerisering (Nakamura et al., 1995 Bayley, 1997). Daarom is dit moontlik dat die mutasie op 'n pH-sensitiewe manier interaksies met die doel lipied-tweelaag of met ander monomere kan verander. Daar is ook bewyse dat domein 4 beduidende beweging moet ondergaan ten opsigte van die ander domeine wanneer die monomeer die lipied -tweelaag binnedring (Gilbert et al., 1999). In die besonder is die transmembraanhaarspelde van domein 3 voorgestel om met domein 4 te pak wanneer dit in die membraan geplaas word. Die mutasie van leucine 461 na treonien kan intramolekulêre interaksies beïnvloed op 'n manier wat die sitolisien minder sensitief vir pH sal maak. Die presiese effek van die L461T -mutasie wag op addisionele biochemiese analise.

Daar is talle voorbeelde van patogene wat versuurde kompartemente benut via pH-afhanklike proteïene, insluitend die virale hemagglutiniene (Hernandez et al., 1996) en bakteriële en protosoë gifstowwe (Ley et al., 1990 Falnes en Sandvig, 2000). Hierdie presedente het ons laat veronderstel dat die suuroptimum van LLO 'n meganisme bied om optimale porievormende aktiwiteit met die rypwording van die fagosoom te koördineer om doeltreffende fagosomale ontsnapping moontlik te maak, en enige versteuring van hierdie koördinasie sou lei tot minder doeltreffende ontsnapping. In ooreenstemming met hierdie hipotese het 'n aantal studies getoon dat bafilomycin A1, 'n farmakologiese remmer van fagosomale versuring, die ontsnapping van L. monocytogenes uit 'n fagosoom (Conte et al., 1996 Beauregard et al., 1997). Daarom was dit verbasend om te ontdek dat die bakterieë wat 'n mutante LLO meer aktief teen 'n neutrale pH sintetiseer, met 'n soortgelyke doeltreffendheid en dieselfde pH as die wildtipe bakterieë uit die fagosoom ontsnap het. Hierdie data dui daarop dat alhoewel versuring van die fagosoom belangrik is vir bakteriese ontsnapping, die pH-sensitiwiteit nie deur LLO-aktiwiteit gemanifesteer word nie. Aangesien bafilomisien A1 rypwording van endosome blokkeer (van Weert et al., 1995), dui hierdie data daarop dat 'n ander pH-afhanklike proses as LLO-aktiwiteit betrokke is by vakuolêre perforasie en ontsnapping.

Alhoewel die presiese meganisme van vakuolêre ontsnapping nie verstaan ​​word nie, is daar onlangse bewyse dat CDC's, insluitend LLO, kan optree as bemiddelaars van proteïenaflewering aan die gasheersitosol, soortgelyk aan die gram -negatiewe tipe III -afskeidingstelsel (Sibelius et al., 1996 Wadsworth en Goldfine, 1999 Madden et al., 2001). As LLO inderdaad optree om sitosoliese aflewering vanaf die fagosoom te bemiddel, is dit moontlik dat die suurafhanklikheid nodig is vir die aktivering van 'n ander pH-sensitiewe bakteriële effektor. Ten minste een ander L. monocytogenes virulensiefaktor, 'n breë-reeks fosfolipase C, word vrygestel tydens vakuolêre versuring (Marquis en Hager, 2000), dus is dit moontlik dat LLO eenvoudig 'n porie moet vorm om die oordrag van die pH-sensitiewe effektor na die sitosol toe te laat om te medieer vesikulêre ontsnapping. Nog 'n moontlikheid is dat 'n gasheerfaktor betrokke by die ontsnappingsproses vereis dat versuring geaktiveer of gelokaliseer word na die fagosoom.

Die mees opvallende fenotipe uitgestal deur L. monocytogenes wat LLO L461T uitdruk, was die verhoogde skade wat aan die gasheerselle se membrane aangerig is. Die eenvoudigste verduideliking vir hierdie waarneming is dat LLO L461T aktief is binne die neutrale pH van die sitosol en 'n drempel verbysteek waarby die aantal porieë wat deur die toksien gevorm word, die gasheersel se membraanherstelmeganismes oorweldig (Walev et al., 2001). Alternatiewelik is dit moontlik dat die mutasie deur 'n onbekende meganisme tot gasheerselskade kan lei. Ons data dui egter duidelik aan dat bakterieë wat LLO L461T sintetiseer, J774 -gasheerselle reeds 5 uur na infeksie deurdring, terwyl permeabilisering deur die wilde tipe 8 uur benodig. Daar word beraam dat een bakterie een LLO -molekule per minuut afskei (Villanueva et al., 1995). Gebaseer op hierdie tempo en die verdubbelingstye vir elke stam, het ons bereken dat die gasheersel ten tyde van permeabilisering gekonfronteer word met die produksie van ~35 LLO L461T molekules per minuut, genoeg monomere om ongeveer een porie saam te stel. Daarteenoor produseer die wilde tipe bakterieë 420 LLO per minuut wanneer hulle die gasheersel deurdring na 8 uur se groei. Hierdie berekeninge dui aan dat bakterieë wat LLO L461T sintetiseer, die gasheersel deurdring met ongeveer een twaalfde van die produksietempo van wilde tipe. Hierdie verskil dui aan dat die unieke suuraktiwiteitsoptimum van wilde tipe LLO dit moontlik maak L. monocytogenes om ten minste 10 keer die aantal nageslag per besmette gasheersel te produseer voordat beduidende gasheerskade voorkom.

Baie faktore dra by tot die vermoë van die gasheersel om die teenwoordigheid van LLO binne die sitosol te hanteer. In die lig van studies wat daarop dui dat die gasheer se sitosoliese proteases LLO skei (Villanueva et al., 1995 Decatur en Portnoy, 2000), is 'n alternatiewe verklaring vir die groter toksisiteit van LLO L461T dat dit minder vatbaar is vir proteolitiese afbraak. Ons het 'n ongeveer tweeledige hoër konsentrasie LLO L461T in die sitosol van J774 -gasheerselle waargeneem, maar tog gevind dat gelyke hoeveelhede LLO in vitro geproduseer word. Miskien weerspieël die groter konsentrasie LLO L461T die feit dat die sitolisien makliker in die neutrale pH van die sitosol kom, waar dit teen proteolitiese agteruitgang beskerm is, soos bewys is vir ander CDC's (Nakamura et al., 1995). Ongeag die presiese meganisme wat lei tot die groter konsentrasie van intrasellulêre LLO L461T, het ons gevind dat intrasellulêre konsentrasies van LLO nie korreleer met membraanpermeabilisering nie. 'N Merodiploïde LLO -stam wat twee keer soveel LLO produseer, was nie meer sitotoksies as die wilde tipe nie, wat daarop dui dat 'n tweeledige toename in die LLO -konsentrasie alleen nie membraanskade onder hierdie toestande beïnvloed nie. 'n Merodiploïede stam wat beide die LLO L461T en die wilde-tipe LLO sintetiseer, het egter soortgelyk opgetree as die LLO L461T-stam in die plaqueing-toets, wat gentamisien-sensitiewe gedenkplate (ongepubliseerde data) produseer, wat daarop dui dat die mutant se sitotoksiese fenotipe dominant oor die wilde tipe is. . Hierdie data dui daarop dat die verhoogde gasheermembraanskade te wyte was aan die 10-voudige groter aktiwiteit van LLO L461T by 'n neutrale pH en nie bloot intrasellulêre LLO-konsentrasie nie.

Die resultate van hierdie studie het dit getoon L. monocytogenes die uitdrukking van LLO L461T was ∼100-voudig minder virulent as die wilde tipe. Ons veronderstel dat die verhoogde skade aan die plasmamembraan wat in weefselkultuur waargeneem word, korreleer met die defek in virulensie in vivo. Daarbenewens het ons gevind dat die LLO L461T so vroeg as 12 uur na infeksie minder goed by immunologies naïewe muise groei (ongepubliseerde data). Dus, die aanpasbare immuunrespons speel waarskynlik min rol in die bemiddeling van die defek van die mutante bakterieë. Die defek weerspieël eerder die werking van die aangebore immuunrespons of 'n meer basiese defek in die bakteriële lewensiklus in vivo. Ons kan 'n aantal scenario's voorstel wat kan lei tot die mutant se virulensie -defek. Een moontlikheid is dat 'n beskadigde sel nie meer die voordele van 'n intrasellulêre leefstyl bied nie, ongeag of dit veroorsaak word deur die verlies aan toegang tot voedingstowwe, verminderde aktienmotiliteit, 'n verlies aan beskerming teen humorale verdediging of 'n ander onbekende meganisme. Omdat die mutant egter normaalweg teen lae gentamisienkonsentrasies groei en versprei, is 'n meer waarskynlike moontlikheid dat die mutant 'n groter inflammatoriese reaksie by die brandpunte van infeksies ontlok as gevolg van groter sitotoksisiteit, en sodoende 'n groter aantal leukosiete na die fokus van infeksie werf. Die hemolitiese aktiwiteit van LLO veroorsaak die produksie van inflammatoriese sitokiene, wat lei tot aktivering en chemotaksie van neutrofiele en monosiete, wat grootliks verantwoordelik is vir die bevat van die bakterieë (Unanue, 1997 Kayal et al., 1999 Sibelius et al., 1999).

Die resultate van hierdie studie ondersteun die konsep dat L. monocytogenes het ontwikkel om skade aan sy gasheersel te verminder. Om maksimum virulensie te bereik, moet die bakterieë 'n ewewig handhaaf tussen die produksie van 'n molekule wat sitolities genoeg is om ontsnapping uit die vesikel te bemiddel, maar tog nie te giftig vir besmette gasheerselle nie. Ons veronderstel dit L. monocytogenes het 'n pato-aanpasbare mutasie verkry (Sokurenko et al., 1999) wat die oerresidu 461 na 'n leusien omskakel. Hierdie mutasie kom slegs by patogene voor Listeria en skakel LLO om van 'n toksien wat geskik is vir 'n ekstrasellulêre patogeen na dié van 'n intrasellulêre patogeen. LLO is dus hoogs aktief waar dit moet wees, in die suur fagosoom, maar relatief onaktief in die neutrale pH van die sitosol. Saam met data wat voorheen gepubliseer is dat LLO 'n PES-agtige volgorde bevat wat ook die toksisiteit daarvan verminder (Decatur en Portnoy, 2000), impliseer ons data dat L. monocytogenes het verskeie mislukte meganismes ontwikkel om die aktiwiteit van LLO te reguleer, 'n molekule wat die potensiaal het om sy intrasellulêre nis te vernietig. Daar word inderdaad vermoed dat die gasheersel dieselfde suur eienskappe van die endositiese weg gebruik om die aktiwiteit van sy eie potensieel gevaarlike lysosomale ensieme te kompartementeer (Mellman et al., 1986).


S-Adenosielmetionien Metabolisme en Veroudering

5.3 Tipes radikale SAM -ensieme

Minstens 'n dosyn tipes radikale SAM -ensieme is betrokke by sentrale metabolisme en DNA -herstel, by die sintese van baie noodsaaklike kofaktore en nukleotiedanaloë wat as antibiotika, neoplastiese middel optree, vertaalgetrouheid en sintese van F420, die kofaktor vir hidriedoordrag, verbeter. in energiemetabolisme [6,172] (tabel 3.1). Spoorfotoprodukte lyase kan UV-geïnduseerde timiendimere in DNA herstel in die afwesigheid van lig [6]. Van kliniese belang is antibiotika teen geneesmiddelweerstandige bakteriese patogene, bv. Clostridium difficileen gifstowwe wat die werking van mitochondria en chloroplaste kan beïnvloed [6,173–175]. 'N Voorbeeld van 'n komplekse formasie is die molybdeen-bevattende "FeMo-Co" [MoFe7S9C] groep in stikstofase wat die vermindering van stikstof in ons atmosfeer tot NH kataliseer3 [6] . Bekende kofaktore sluit in gemodifiseerde tetrapyrroles soos (bacterio) chlorofil, heem en kobalamiene [22]. Anaërobiese ribonukleotiedreduktase verminder CTP tot dCTP, 'n tempo-beperkende stap in DNA-metabolisme wat streng afhanklik is van SAM [176]. Die swael-invoegende ensiem biotiensintase (BS/BioB) gebruik twee FeS-groepe in 'n moeilike laaste stap in die sintese van vitamien B1 (noodsaaklik in die metioniensiklus). Die verminderde SAM-afhanklike [4Fe–4S] +-groep skenk een elektron aan SAM wat 'n 5'-deoksiedenosien-radikaal produseer, wat dan 'n tweede helfte-groepering, [2Fe–2S], benodig om 'n swaelatoom in die biotienvoorloper in te voeg [6,177,178 ].


Kan Listeria monocytogenes endotoksien as 'n AB-gifstof optree? - Biologie

Bakteriële toksigenese

Toksigenese, of die vermoë om gifstowwe te produseer, is 'n onderliggende meganisme waardeur baie bakteriële patogene siektes produseer. Op chemiese vlak is daar twee hooftipes bakteriese toksiene, lipopolisakkariede, wat verband hou met die selwand van gram-negatiewe bakterieë, en proteïene, wat vrygestel word van bakteriese selle en kan optree op weefselplekke wat verwyder is van die plek van bakteriële groei. Die selverwant gifstowwe word na verwys as endotoksiene en die ekstrasellulêr Diffundeerbare gifstowwe word na verwys as eksotoksiene.

Endotoksiene is sel-geassosieerde stowwe wat strukturele komponente van bakterieë is. Die meeste endotoksiene is in die selkoevert geleë. In die konteks van hierdie artikel verwys endotoksien spesifiek na die lipopolisakkaried (LPS) of lipooligosakkaried (LOS) wat in die buitenste membraan van gramnegatiewe bakterieë geleë is. Alhoewel strukturele komponente van selle, kan oplosbare endotoksiene vrygestel word van groeiende bakterieë of van selle wat gelys word as gevolg van effektiewe gasheer verdedigingsmeganismes of deur die aktiwiteite van sekere antibiotika. Endotoksiene werk gewoonlik in die omgewing van bakteriële groei of teenwoordigheid.

Eksotoksiene word gewoonlik deur bakterieë afgeskei en werk op 'n plek wat verwyder is van bakteriële groei. In sommige gevalle word eksotoksiene egter slegs vrygestel deur lisis van die bakteriële sel. Eksotoksiene is gewoonlik proteïene, minimaal polipeptiede, wat ensiematies of deur direkte aksie met gasheerselle optree en 'n verskeidenheid gasheerreaksies stimuleer. Die meeste eksotoksiene werk op weefselplekke ver van die oorspronklike punt van bakteriële inval of groei. Sommige bakteriese eksotoksiene werk egter op die plek van patogeenkolonisasie en kan 'n rol speel by inval.

BAKTERIESE PROTEÏEN-GIFTIGINGS

Eksotoksiene word gewoonlik tydens eksponensiële groei deur lewende bakterieë afgeskei. Die produksie van die gifstof is oor die algemeen spesifiek vir 'n spesifieke bakteriese spesie wat die siekte veroorsaak wat met die gifstof verband hou (byvoorbeeld slegs Clostridium tetani produseer slegs tetanustoksien Corynebacterium diphtheriae produseer die difterie toksien). Gewoonlik produseer virulente stamme van die bakterie die gifstof, terwyl nie -virulente stamme dit nie doen nie, en die gifstof is die belangrikste determinant van virulensie (bv. Tetanus en difterie). Op 'n stadium is gedink dat die produksie van eksotoksien hoofsaaklik beperk is tot Gram-positiewe bakterieë, maar duidelik produseer beide Gram-positiewe en Gram-negatiewe bakterieë oplosbare proteïengifstowwe.

Bakteriële proteïengifstowwe is die kragtigste menslike gifstowwe wat bekend is en behou hoë aktiwiteit by baie hoë verdunnings. Die dodelikheid van die sterkste bakteriese eksotoksiene word vergelyk met die dodelikheid van strignien, slanggif en endotoksien in tabel 1 hieronder.

TABEL 1. LETHALITEIT VAN BAKTERIËLE PROTEIENGIFTE

Toksien
Giftige dosis (mg)
Gasheer
Dodelike toksisiteit
in vergelyking met:



Strygnien Endotoksien (LPS) Slanggif
Botulinum toksien 0,8x10 -8 Muis 3x10 6 3x10 7 3x10 5
Tetanus toksien 4x10 -8 Muis 1x10 6 1x10 7 1x10 5
Shiga toksien 2.3x10 -6 Haas 1x10 6 1x10 7 1x10 5
Difterie toksien 6x10 -5 proefkonyn 2x10 3 2x10 4 2x10 2

Gewoonlik dui die plek van skade wat deur 'n eksotoksien veroorsaak word, die ligging aan vir die aktiwiteit van die gifstof. Terme soos enterotoksien, neurotoksien, leukosidien of hemolisien is beskrywende terme wat die teikenplek van sommige goed gedefinieerde proteïentoksiene aandui. 'N Paar bakteriese gifstowwe wat duidelik die dood van 'n dier veroorsaak, staan ​​bloot bekend as dodelike gifstowwe, en alhoewel die aangetaste weefsels en die teikenplek of substraat bekend is, is die presiese meganisme waarmee die dood plaasvind nie duidelik nie (bv. miltsiekte LF).

Sommige bakteriese gifstowwe word as indringers gebruik omdat hulle plaaslik optree om bakteriële indringing te bevorder. Voorbeelde hiervan is ekstrasellulêre ensieme wat weefselmatrikse of fibrien afbreek, sodat die bakterieë kan versprei. Dit sluit kollageenase, hyaluronidase en streptokinase in. Ander gifstowwe, wat ook as invasiene beskou word, verlaag membraankomponente, soos fosfolipases en lesitinases. Die porievormende gifstowwe wat 'n porie in eukariotiese membrane plaas, word ook as indringers beskou, maar hulle sal hier hersien word.

Sommige proteïengifstowwe het baie spesifieke sitotoksiese aktiwiteit (d.w.s. hulle val spesifieke soorte selle aan). Byvoorbeeld, tetanus en botulinum gifstowwe val slegs neurone aan. Maar sommige gifstowwe (soos geproduseer deur stafilokokke, streptokokke, clostridia, ens.) breë sitotoksiese aktiwiteit en veroorsaak nie-spesifieke dood van verskeie tipes selle of skade aan weefsels, wat uiteindelik tot nekrose lei. Gifstowwe wat fosfolipases is, tree op hierdie manier op. Dit geld ook vir porie-vormende hemolysiene en leukocidiene.

Bakteriese proteïen gifstowwe is sterk antigene. In vivo neutraliseer spesifieke teenliggaampies die toksisiteit van hierdie bakteriese eksotoksiene (antitoksien). In vitro kan spesifieke antitoksien hul aktiwiteit egter nie heeltemal belemmer nie. Dit dui daarop dat die antigene determinant van die gifstof van die aktiewe gedeelte van die proteïenmolekule kan verskil. Die mate van neutralisasie van die aktiewe plek kan afhang van die afstand vanaf die antigeniese plek op die molekule. Aangesien die toksien egter volledig in vivo geneutraliseer is, dui dit daarop dat ander gasheerfaktore 'n rol moet speel in toksienneutralisasie in die natuur.

Proteïene eksotoksiene is inherent onstabiel. Mettertyd verloor hulle hul giftige eienskappe, maar behou hul antigene. Dit is die eerste keer ontdek deur Ehrlich wat die term "toksoïed" vir hierdie produk geskep het. Toksoïede is ontgifde gifstowwe wat hul antigenisiteit en hul immuniseringsvermoë behou. Die vorming van toksoïede kan versnel word deur gifstowwe met 'n verskeidenheid reagense te behandel, insluitend formalien, jodium, pepsien, askorbiensuur, ketone, ens. Die mengsel word vir 'n paar weke by 37 grade by pH-reeks 6 tot 9 gehandhaaf. Die gevolglike toksoïede kan gebruik word vir kunsmatige immunisering teen siektes veroorsaak deur patogene waar die primêre determinant van bakteriële virulensie toksienproduksie is. Toksoïede is effektiewe immuniseringsmiddels teen witseerkeel en tetanus wat deel is van die DPT (DTP)-entstof.

Gifstowwe met ensiematiese aktiwiteit

As proteïene, baie bakteriële gifstowwe lyk soos ensieme op 'n aantal maniere. Soos ensieme, is hulle gedenatureer deur hitte, suur en proteolitiese ensieme, hulle katalisties optree, en hulle stal uit spesifisiteit van aksie. Die substraat (in die gasheer) kan 'n komponent van weefselselle, organe of liggaamsvloeistof wees.

'N Plus B -subeenheid -reëling

Baie proteïentoksiene, veral dié wat intrasellulêr optree (met betrekking tot gasheerselle), bestaan ​​uit twee komponente: een komponent (subeenheid A) is verantwoordelik vir die ensiematiese aktiwiteit van die gifstof die ander komponent (subeenheid B) is besig met bindend na 'n spesifieke reseptor op die gasheerselmembraan en die oordrag van die ensiem oor die membraan. Die ensiematiese komponent is nie aktief totdat dit vrygestel word van die inheemse (A+B) gifstof. Geïsoleerde A-subeenhede is ensiematies aktief maar het nie binding en seltoegangvermoë nie. Geïsoleerde B -subeenhede kan aan doelselle bind (en selfs die binding van die inheemse gifstof blokkeer), maar dit is nie -giftig.

Daar is 'n verskeidenheid maniere waarop toksiensubeenhede gesintetiseer en gerangskik kan word: A + B dui aan dat die toksien gesintetiseer en afgeskei word as twee afsonderlike proteïensubeenhede wat op die teikenseloppervlak in wisselwerking tree A-B of A-5B dui aan dat die A- en B -subeenhede afsonderlik gesintetiseer word, maar geassosieer word deur nie -kovalente bindings tydens afskeiding en binding aan hul doelwit 5B dui aan dat die bindingsdomein van die proteïen uit 5 identiese subeenhede saamgestel is. A/B dui 'n toksien aan wat gesintetiseer is as 'n enkele polipeptied, verdeel in A- en B-domeine wat deur proteolitiese splitsing geskei kan word.

Bevestiging en toediening van gifstowwe

Daar is ten minste twee meganismes van gifstof binnedringing in teikenselle.

In een meganisme genoem direkte toegang, bind die B-subeenheid van die inheemse (A+B) toksien aan 'n spesifieke reseptor op die teikensel en veroorsaak die vorming van 'n porie in die membraan waardeur die A-subeenheid na die sel sitoplasma oorgedra word.

In 'n alternatiewe meganisme bind die inheemse toksien aan die teikensel en word die A+B-struktuur in die sel ingeneem deur die proses van reseptor-gemedieerde endositose (RME). Die gifstof word in die sel geïnternaliseer in 'n membraan-omhulde vesikel genaamd 'n endosoom. H + -ione kom in die endosoom wat die interne pH verlaag, wat veroorsaak dat die A + B subeenhede skei. Die B subeenheid beïnvloed die vrystelling van die A subeenheid uit die endosoom sodat dit sy teiken in die sel sitoplasma sal bereik. Die B subeenheid bly in die endosoom en word na die seloppervlak herwin.

In albei gevalle hierbo, moet 'n groot proteïenmolekule in 'n tweelaag van die membraanlipied plaas, óf die selmembraan óf die endosoommembraan. Hierdie aktiwiteit word weerspieël in die vermoë van die meeste A+B- of A/B -gifstowwe, of hul B -komponente, om in kunsmatige lipied -lae te plaas, wat ioondeurlaatbare paaie skep. As die B -subeenheid 'n hidrofobiese gebied (van aminosure) bevat wat in die membraan insteek (soos in die geval van die difterietoksien), kan dit die T (translokasie) domein van die gifstof genoem word.

Dit is bekend dat 'n paar bakteriese gifstowwe (bv. Difterie) beide direkte toegang en RME gebruik om gasheerselle binne te gaan, wat nie verbasend is nie, aangesien beide meganismes 'n variasie op 'n tema is. Bakteriële gifstowwe met soortgelyke ensiematiese meganismes kan deur hul meganismes hul teikenselle binnedring. Dus, die difterie toksien en Pseudomonas eksotoksien A, wat identiese meganismes van ensiematiese aktiwiteit het, gaan hul gasheerselle op effens verskillende maniere binne. Die adenilaat siklase toksien van Bordetella pertussis (pertussis AC) en miltsiekte EF vervaardig deur Bacillus anthracis, tree op dieselfde manier op om die produksie van cAMP uit intrasellulêre ATP -reserwes van gasheerselle te kataliseer. Die miltsiekte -toksien betree egter selle deur reseptor -gemedieerde endositose, terwyl die pertussis -adenilaat siklase die selmembraan direk deurkruis.

Die spesifieke reseptore vir die B subeenheid van gifstowwe op teikenselle of weefsels word gewoonlik sialogangliosides (glikoproteïene) genoem G-proteïene op die selmembraan. Die cholera -toksien gebruik byvoorbeeld die ganglioside GM1, en tetanustoksien gebruik ganglioside GT1 en/of GD1b as reseptore op gasheerselle.

Die bekendste en bestudeerde bakteriese gifstof is die difterie -toksien, vervaardig deur Corynebacterium diphtheriae. Difterietoksien is 'n bakteriese eksotoksien van die A/B -prototipe. Dit word vervaardig as 'n enkele polipeptiedketting met 'n molekulêre gewig van 60 000 dalton. Die funksie van die proteïen kan in twee dele onderskei word: subeenheid A, met 'n m.w. van 21.000 dalton, bevat die ensiematiese aktiwiteit vir die remming van rekfaktor-2 wat betrokke is by gasheersproteïensintese subeenheid B, met 'n m.w. van 39 000 dalton, is verantwoordelik vir binding aan die membraan van 'n vatbare gasheersel. Die B subeenheid besit 'n gebied T (translokasie) domein wat in die endosoom membraan invoeg en sodoende die vrystelling van die ensiematiese komponent in die sitoplasma verseker.

Figuur 1. Difterietoksien (Dtx). A (rooi) is die katalitiese domein B (geel) is die bindingsdomein wat die reseptor vir selaanhegting vertoon. sy "geslote" opset.

In vitroword die inheemse gifstof in 'n onaktiewe vorm geproduseer wat deur die proteolitiese ensiem trypsien geaktiveer kan word in die teenwoordigheid van tiol (reduktiemiddel). Die ensiematiese aktiwiteit van Fragment A word in die ongeskonde gifstof gemasker. Fragment B is nodig om Fragment A in staat te stel om die sitoplasma van vatbare selle te bereik. Die C-eindpunt van Fragment B is hidrofiel en bevat determinante wat interaksie het met spesifieke membraanreseptore op sensitiewe selmembrane en die N-terminale einde van Fragment B (die T-domein genoem) is sterk hidrofobies. Dit is bewys dat die spesifieke membraanreseptor vir die B-fragment 'n transmembraan heparienbindende proteïen op die oppervlak van die vatbare sel is.

Die difterietoksien betree sy doelselle deur óf direkte ingang óf reseptor -gemedieerde endositose. Die eerste stap is die onomkeerbare binding van die C-terminale hidrofiliese gedeelte van Fragment B (AA 432-535) aan die reseptor. Tydens RME word die hele toksien dan in 'n endositiese vesikel opgeneem. In die vesikel daal die pH tot ongeveer 5 wat die ontvouing van die A- en B -kettings moontlik maak. Dit stel hidrofobiese streke van beide die A- en B -kettings bloot wat in die vesikelmembraan kan insteek. Die gevolg is blootstelling van die A -ketting aan die sitoplasmiese kant van die membraan. Daar stel reduksie en proteolitiese splitsing die A-ketting in die sitoplasma vry. Die A -fragment word vrygestel as 'n verlengde ketting, maar herwin sy aktiewe (ensiematiese) bolvormige konformasie in die sitoplasma. Die A-ketting kataliseer die ADP-ribosilering van verlengingsfaktor-2 (EF-2) soos in Figuur 2 getoon.


Figuur 2. Toetrede en aktiwiteit van difterietoksien (Dtx) in vatbare selle. Die B-domein van die toksien bind aan 'n verwante reseptor op 'n vatbare sel. Die gifstof word in 'n endosoom opgeneem deur reseptor -gemedieerde enkositose. Versuring van die endositiese vesikel laat die A- en B -kettings oopvou wat die hidrofobiese T -domein van die gifstof blootstel. Die T-domein plaas in die endosoommembraan en translokeer die A-fragment in die sitoplasma waar dit sy ensiematiese konfigurasie herwin. Die ensiematiese A -komponent gebruik NAD as substraat. Dit kataliseer die aanhegting van die ADP-ribose gedeelte van NAD aan rekverlengingsfaktor (EF-2) wat sy funksie in proteïensintese inaktiveer.

Tabel 2 beskryf verskeie bakteriële gifstowwe met bekende ensiematiese aktiwiteit en die biologiese effekte van die gifstowwe by mense.

TABEL 2. BIOLOGIESE EFFEKTE VAN SOMMIGE BAKTERIESE EKSOTOKSIENE MET ENSIMATIESE AKTIWITEIT

GIFTIGHEID (subeenheid arr)* ENSIMATIESE AKTIWITEIT BIOLOGIESE EFFEKTE
Cholera-toksien (A-5B) ADP ribosilate eukaryotiese adenilaat siklase Gs regulerende proteïen Aktiveer adenilate cyclase verhoogde vlak van intrasellulêre cAMP bevorder afskeiding van vloeistof en elektroliete in dermepiteel wat lei tot diarree
Witseerkeel toksien (A/B) ADP ribosilateer verlengingsfaktor 2
Dit belemmer proteïensintese in diereselle, wat lei tot die dood van die selle
Pertussis toksien (A-5B) ADP ribosilate adenylate cyclase Gi regulerende proteïen
Blokke inhibisie van adenilaatsiklase verhoogde vlakke van cAMP beïnvloed hormoonaktiwiteit en verminder fagositiese aktiwiteit
E coli hitte-labiele gifstof LT (A-5B) ADP ribosilateer adenilaat siklase Gs regulerende proteïen Soortgelyk aan of identies aan cholera-toksien
Shiga -toksien (A/5B Glikosidase-splyting van ribosomale RNA (split 'n enkele adenienbasis van die 28S rRNA)
Inaktiveer die soogdier 60S ribosomale subeenheid en lei tot inhibisie van proteïensintese en dood van die vatbare selle patologie is diarree, hemorragiese kolitis (HC) en/of hemolitiese uremiese sindroom (HUS)
Pseudomonas Eksotoksien A (A/B) ADP ribosileer verlengingsfaktor-2 analoog aan difterie-toksien
Dit belemmer proteïensintese in vatbare selle, wat lei tot die dood van die selle
Botulinumtoksien (A/B) Zn ++ afhanklike protease werk op synaptobrevin by motorneuron ganglioside
Inhibeer presinaptiese asetielcholien vrystelling van perifere cholinergiese neurone wat lei tot slap verlamming
Tetanus-toksien (A/B) Zn ++ afhanklike protease werk op sinaptobrevien in sentrale senuweestelsel
Inhibeer neurotransmitter vrystelling van inhiberende neurone in die SSS wat lei tot spastiese verlamming
Miltsiekte toksien LF (A2+B) Metalloprotease wat MAPKK (mitogeen-geaktiveerde proteïenkinase kinase) ensieme skei

Gekombineer met die B -subeenheid (PA), veroorsaak LF sitokienvrystelling en dood van teikenselle of proefdiere
Bordetella pertussis AC -gifstof (A/B) en Bacillus anthracis EF (A1+B)
Kalmodulien-gereguleerde adenilaatsiklases wat die vorming van sikliese AMP vanaf ATP in vatbare selle kataliseer, asook die vorming van ioondeurlaatbare porieë in selmembrane
Verhoog cAMP in fagosiete wat lei tot inhibisie van fagositose deur neutrofiele en makrofage veroorsaak ook hemolise en leukolise
Staphylococcus aureus Exfoliatin B. Splits desmoglein 1, 'n cadherin wat in desmosome in die epidermis voorkom
(ook 'n superantigeen)

Skeiding van die stratum granulosum van die epidermis, tussen die lewende lae en die oppervlakkige dooie lae.

* toksiensubeenheidrangskikkings: AB of A-5B dui subeenhede aan wat afsonderlik gesintetiseer is en deur niekovalente bindings geassosieer word. A/B dui subeenheiddomeine van 'n enkele proteïen aan wat deur proteolitiese splitsing geskei kan word. A+B dui subeenhede aan wat gesintetiseer en afgeskei word as afsonderlike proteïensubeenhede wat interaksie het by die teikenseloppervlak dui 5B aan dat die bindingsdomein uit 5 identiese subeenhede saamgestel is.

Porievormende toksiene, soos die naam aandui, plaas 'n transmembraanporie in 'n gasheerselmembraan, en ontwrig daardeur die selektiewe invloei en uitvloei van ione oor die membraan. Hierdie groep gifstowwe bevat die RTX-gifstowwe van Gram-negatiewe bakterieë, streptolisien O wat deur S. pyogenes, en S. aureus alfa-toksien. Oor die algemeen word hierdie gifstowwe geproduseer as subeenhede wat self saamstel as 'n porie op die eukariotiese membraan.

S. aureus alfa-toksien word beskou as die model vir die oligomerisering van porievormende sitotoksiene. Die alfa-toksien word gesintetiseer as 'n 319 aminosuur voorloper molekule wat 'n N-terminale seinvolgorde van 26 aminosure bevat. Die afgeskeide volwasse toksien, of protomeer, is 'n hidrofiele molekule met 'n molekulêre gewig van 33 kDa. Sewe toksien-protomere kom saam om 'n 232 kDa-sampioenvormige heptamer te vorm wat uit drie afsonderlike domeine bestaan. Die dop- en randdomeine van die heptamer is aan die oppervlak van die plasmamembraan geleë, terwyl die stamdomein as 'n transmembraan-ioonkanaal deur die membraan dien.

TABEL 3. ENKELE POORVORMENDE BAKTERIESE GIFTIGINGS

Toksien
Bakteriese bron
Doel
Siekte
perfringiolysien O
Clostridium perfringens
cholesterol
gas gangreen
hemolisien
Escherichia coli
selmembraan
UTI
listeriolisien
Listeria monocytogenes
cholesterol
sistemiese meningitis
miltsiekte EF
Bacillus anthracis
selmembraan
miltsiekte (edeem)
alfa-toksien Staphylococcus aureus
selmembraan
absesse
pneumolisien
Streptococcus pneumoniae
cholesterol
longontsteking otitis media
streptolisien O
Streptococcus pyogenes
cholesterol
keelontsteking
leukosidien
Staphylococcus aureus fagosietmembraan
pyogeniese infeksies

Superantigene: gifstowwe wat die immuunstelsel stimuleer

Verskeie bakteriese toksiene kan direk op die T-selle en antigeen-presenterende selle van die immuunstelsel inwerk. Verswakking van die immunologiese funksies van hierdie selle deur gifstof kan tot menslike siektes lei. Een groot familie gifstowwe in hierdie kategorie is die sogenaamde pirogeniese eksotoksiene wat deur stafilokokke en streptokokke geproduseer word, wie se biologiese aktiwiteite kragtige stimulasie van die immuunstelsel, pirogenisiteit en verbetering van endotoksienskok insluit.

Pyrogeen eksotoksiene word gifstowwe van 22 kDa tot 30 kDa afgeskei, en sluit in stafilokokko enterotoksiene serotipes A-E, G en H groep A streptokokke pyrogeen eksotoksiene A-C stafilokokkale eksfoliatien toksien en stafylokokke TSST-1.

Oor die algemeen is die kragtige immunostimulerende eienskappe van superantigene 'n direkte gevolg van toksienbinding aan verskillende streke buite die peptiedbindingspleet van die belangrikste histoversoenbaarheidsklas II-molekules (MHC II), uitgedruk op die oppervlak van antigeen-presenterende selle, en aan spesifieke Vß elemente op die T-selreseptor van T-limfosiete. Dit lei tot 'n massiewe verspreiding van tot 20% van perifere T-selle. Saam met die verspreiding van T-selle is 'n massiewe vrystelling van sitokiene uit limfosiete (bv. Interleukien-2, tumor nekrose faktor & szlig, gamma interferon) en monosiete (bv. IL-1, IL-6, tumornekrose faktor a). Hierdie sitokiene dien as bemiddelaars van hipotensie, hoë koors en diffuse eritematiese uitslag wat kenmerkend is van toksiese skoksindroom.

Die stafilokokke enterotoksiene is superantigene, maar dit is nie bekend of hierdie aktiwiteit bydra tot braking of diarree kenmerkend van stafilokokke voedselvergiftiging nie.

Beheer van sintese en die vrystelling van proteïentoksiene

Die regulering van sintese en afskeiding van baie bakteriële gifstowwe word streng beheer deur regulerende elemente wat sensitief is vir omgewingsseine. Byvoorbeeld, die produksie van difterie-toksien word totaal onderdruk deur die beskikbaarheid van voldoende hoeveelhede yster in die medium vir bakteriese groei. Slegs onder toestande waarin die hoeveelheid yster in die groeimedium beperk word, word gifstofproduksie depressief. Die uitdrukking van cholera -toksien en verwante virulensie faktore (adhesiene) word beheer deur osmolariteit en temperatuur in die omgewing. In B. pertussis, die induksie van verskillende virulensiekomponente is verbyster, sodat aanvanklike faktore aanvanklik geproduseer word om die infeksie vas te stel, en gifstowwe word gesintetiseer en later vrygestel om die gasheer se verdediging teen te werk en bakteriële oorlewing te bevorder.

Die prosesse waardeur proteïentoksiene saamgestel en deur bakteriële selle afgeskei word, is ook veranderlik. Baie van die klassieke eksotoksiene word gesintetiseer met 'n NH terminale leier (sein) reeks wat bestaan ​​uit 'n paar (1-3) gelaaide aminosure en 'n stuk (14-20) hidrofobiese aminosure. Die seinvolgorde kan bind en in die sitoplasmiese membraan invoeg tydens translasie sodat die polipeptied afgeskei word terwyl dit gesintetiseer word. Die seinpeptied word gesplit soos die toksien (proteïen) in die periplasma vrygestel word. Alternatiewelik kan die gifstof intrasitoplasmies gesintetiseer word en dan aan 'n leiersekwensie gebind word om deur die membraan te beweeg. Dikwels word chaperone proteïene benodig om hierdie proses te lei. Sommige multikomponent gifstowwe, soos die cholera toksien, se sub -eenhede word gesintetiseer en afsonderlik in die periplasma afgeskei waar dit saamgestel word. By gram-negatiewe bakterieë vorm die buitenste membraan 'n ekstra deurlaatbaarheidsversperring wat 'n proteïengifstof gewoonlik moet bemiddel as dit in 'n oplosbare vorm vrygestel moet word. Daar is voorgestel dat sommige Gram-negatiewe eksotoksiene (bv. E coli ST enterotoksien) kan vrygestel word in membraanvesikels wat uit buitemembraankomponente bestaan. Aangesien hierdie vesikels moontlik buitemembraangeassosieerde aanhegtingsfaktore besit, kan hulle as "slim bomme" optree wat spesifiek met teikenselle kan inwerk en moontlik binnegaan om hul inhoud van gifstof vry te stel.

Die genetiese vermoë om 'n toksien te produseer, insluitend regulatoriese gene, kan gevind word op die baksteriese chromosoom, plasmiede en lisogeniese bakteriofage. Soms kom hulle binne patogenisiteit-eilande voor. In elk geval, die prosesse van genetiese uitruiling in bakterieë, veral vervoeging en transduksie, kan genetiese elemente tussen stamme en spesies bakterieë mobiliseer. Horisontale geenoordrag (HGT) Dit is bekend dat gene wat virulensie kodeer, tussen bakteriesoorte voorkom. Dit verduidelik hoe E coli en Vibrio cholerae produseer 'n byna identiese gifstof wat deur diarree veroorsaak word, asook hoe E. coli O157: H7 die vermoë verkry het om shigatoksien uit die Shigella dysenteriae te produseer. Die dermkanaal is waarskynlik 'n ideale habitat vir bakterieë om HGT met mekaar te ondergaan.

Daar is afdoende bewyse vir die patogene rol van difterie, tetanus en botulinum gifstowwe, verskillende enterotoksiene, stafilokokke toksiese skoksindroom gifstowwe en streptokokke pyrogeen eksotoksiene. En daar is goeie bewyse vir die patologiese betrokkenheid van pertussis -toksien, miltsiekte -gifstof, shiga -toksien en die nekrotiserende gifstowwe van clostridia by bakteriese siektes. Maar hoekom sekere bakterieë sulke kragtige gifstowwe produseer, is geheimsinnig en is analoog aan die vraag waarom 'n organisme 'n antibiotika moet produseer. Die produksie van 'n gifstof kan 'n rol speel om 'n bakterie by 'n spesifieke nis aan te pas, maar dit is nie noodsaaklik vir die lewensvatbaarheid van die organisme nie. Die meeste toksigeniese bakterieë leef vrylik in die natuur en in assosiasies met mense in 'n vorm wat fenotipies identies is aan die toksigeniese stam, maar sonder die vermoë om die gifstof te produseer.

'N Opsomming van bakteriële proteïengifstowwe en hul aktiwiteite word in Tabelle 4. Gegee. Besonderhede van die werkingsmeganismes van hierdie gifstowwe en hul betrokkenheid by die patogenese van siektes word in hoofstukke bespreek met die spesifieke bakteriese patogene.

Vir meer inligting en verwysings oor bakteriese gifstowwe gaan na hierdie webwerf: Bakteriese gifstowwe: Vriende of vyande?


Gebruik as 'n transfeksie -vektor

Omdat L. monocytogenes is 'n intrasellulêre bakterie, sommige studies het hierdie bakterie as 'n vektor gebruik om gene te lewer in vitro. Huidige transfeksiedoeltreffendheid bly swak. Een voorbeeld van die suksesvolle gebruik van L. monocytogenes in in vitro oordragtegnologieë is in die lewering van geenterapieë vir gevalle van sistiese fibrose. [29]

Kanker entstof

A lewendige verswakte L. monocytogenes kanker-entstof, ADXS11-001, is onder ontwikkeling as 'n moontlike behandeling vir servikale karsinoom. [30]


Daar is getoon dat hierdie gifstof die belangrikste virulensie -faktor in die infeksie is C. perfringens die bakterie kan nie siekte veroorsaak sonder hierdie gifstof nie. [1] Voorts beskerm inenting teen die alfatoksientoksied muise teen C. perfringens gas gangreen. [2] Gevolglik help kennis oor die funksie van hierdie spesifieke proteïen die begrip van mionekrose grootliks.

Die alfatoksien het 'n merkwaardige ooreenkoms met gifstowwe wat deur ander bakterieë sowel as natuurlike ensieme vervaardig word. Daar is beduidende homologie met fosfolipase C -ensieme van Bacillus cereus, C. bifermentans, en Listeria monocytogenes. [3] Die C-terminale domein toon ooreenkoms met nie-bakteriële ensieme soos pankreaslipase, sojaboonlipoksigenase en sinaptotagmin I. [4]

Die alfatoksien is 'n sinkmetallofosfolipase, wat sink benodig vir aktivering. Eerstens bind die toksien aan 'n bindingsplek op die seloppervlak. Die C-terminale C2-agtige PLAT-domein bind kalsium en laat die toksien toe om aan die fosfolipiedkopgroepe op die seloppervlak te bind. Die C-terminale domein betree die fosfolipied-tweelaag. Die N-terminale domein het fosfolipase aktiwiteit. Hierdie eienskap laat hidrolise van fosfolipiede soos fosfatidielcholien toe, wat endogene fosfolipase C naboots. Die hidrolise van fosfatidielcholien produseer diacylglycerol, wat 'n verskeidenheid van tweede boodskapper-bane aktiveer. Die eindresultaat sluit aktivering van arakidonsuurweg en produksie van tromboksaan A in2, produksie van IL-8, bloedplaatjie-aktiverende faktor, en verskeie intersellulêre adhesiemolekules. Hierdie aksies kombineer om edeem te veroorsaak as gevolg van verhoogde vaskulêre deurlaatbaarheid. [3]


Belangrikheid en kenmerke van Listeria monocytogenes in Pluimveeprodukte

Listeria monocytogenes is een van die mees algemene voedselverwekkende patogene. Pluimveevleis en produkte is die belangrikste voertuie van patogene stamme van L. monocytogenes vir mens. Pluimveeprodukte maak deel uit van die gewone dieet van mense, en as gevolg van voedingsinhoud, meer proteïeninhoud en minder vetinhoud, kry hulle meer aandag. In vergelyking met rooivleis is pluimveevleis meer ekonomies. Dit het dus 'n groter tempo van verbruik gehad, veral in braaivleisvorm waarin die groei van bakterieë bevoordeel word. Subtik van L. monocytogenes isolate is noodsaaklik vir epidemiologiese ondersoek en vir die identifisering van die bron van besmetting. In die volgende resensie, die belangrikste faset van teenwoordigheid van L. monocytogenes in pluimvee bespreek sal word. Mees patogene serotipes van L. monocytogenes is in verskillende produkte van pluimveevleis opgespoor. Ongelukkig het hierdie geïsoleerde patogene soms weerstand teen antibiotika wat algemeen gebruik word vir die behandeling van menslike infeksies.

1. Eienskappe van Listeria monocytogenes

Listeria spp. is klein gram-positiewe staaf (0,5-4 μm in deursnee en 0,5–2 μm in lengte), nie-spoorvormende, fakultatiewe anaërobiese, katalase-positiewe en oksidase-negatiewe organismes. Listeria het tuimelmotiliteit by 20–25°C as gevolg van peritrichous flagella. Gebaseer op somatiese (O) en flagellêre (H) antigene, is 13 serotipes geïdentifiseer in Listeria monocytogenes (L. monocytogenes) insluitend 1/2a, 1/2b, 1/2c, 3a, 3b, 3c, 4a, 4ab, 4b, 4c, 4d, 4e en 7 [1]. Met behulp van multiplex PCR -toets, word vier groot serovars van L. monocytogenes stamme kan in vier afsonderlike serogroepe gekategoriseer word, IIa (serovars 1/2a, 1/2c, 3a en 3c), IIb (1/2b, 3b, 4b, 4d en 4e), IIc (1/2c en 3c) , en IVb (4b, 4d en 4e) deur op vier merkergene [2] te fokus. Voedsel- of voedselproduksie -omgewing word algemeen besmet met serotipes 1/2a, 1/2b, 1/2c en 4b. Die optimale groeitemperatuur van L. monocytogenes is 30–37 ° C, maar dit kan oorleef tussen 0 en 45 ° C. L. monocytogenes kan by yskastemperature vermeerder, is bestand teen ontsmettingsmiddels en kleef aan verskeie oppervlaktes [1]. Sodra dit in die verwerkingsaanlegte ingebring is, is dit in staat om te oorleef en vir 'n lang tydperk onder ongunstige toestande te bly [1]. In die voedselbedryf, L. monocytogenes is in staat om biofilm te vorm wat kan dien as 'n moontlike bron van besmetting [3]. L. monocytogenes is 'n wydverspreide organisme in die natuur, met hoofreservoirs van grond en voer. Boonop is dit geïsoleer van gesonde mense en diere of besmette mak en wilde diere [4].

2. Listeriose

L. monocytogenes is die hoofoorsaak van voedselgedraagde listeriose by mense. Selde is voedselgedraagde infeksies aangemeld deur L. ivanovii en L. seeligeri. Stamme van L. monocytogenes het verskillende patogene potensiaal, aangesien sommige stamme baie virulent is, terwyl sommige van hulle nie -aansteeklike middels is [4, 5]. Bepaling van die patogene potensiaal van L. monocytogenes is belangrik uit die oogpunt van voedselveiligheid en openbare gesondheid [6]. Identifikasie van virulente stamme kan verkry word deur die opsporing van sommige gene wat direk verband hou met patogenisiteit van L. monocytogenes [7]. L. monocytogenes gaan gasheer selle binne deur gebruik te maak van 'n familie van oppervlakproteïene genaamd internaliene, veral InlA en inlB. Boonop neem InlC en InlJ ook deel aan die postintestinale stadiums van L. monocytogenes infeksie [8]. Vermeende interne van L. monocytogenes word gekodeer deur inlC (lmo1786) en inlJ (lmo2821) gene. Die etiologiese organisme van die menslike listeriose bevat inlJ (lmo2821) [9]. L. monocytogenes dra 'n porie-vormende gifstof genaamd listeriolysien O (LLO) ('n 58 KDa proteïen wat deur hlyA-geen gekodeer word) wat noodsaaklik is vir die virulensie van die bakterie [4]. LLO lyseer die membraan van die vakuool en help uiteindelik die ingang van L. monocytogenes in die sitoplasma [4]. Verskeie metodes is gebruik om die virulensie van L. monocytogenes. Sommige van hulle sluit in muisvirulensietoets, selkultuur en die gebruik van spesifieke gene en proteïene [8]. Tabel 1 toon 'n paar spesifieke gene wat gebruik word om die virulensie van L. monocytogenes isoleer in pluimvee.

Voedselgedraagde listeriose het drie hoof kliniese kenmerke, naamlik meningitis, septisemie en aborsie. By gesonde mense kan dit koorsagtige gastro-enteritis veroorsaak, maar by vatbare persone (kinders, bejaardes, immuungedrang en swanger vroue) kan dit lei tot septisemie en meningitis [1].

Listeriose is die vierde algemeen soönotiese siekte in Europa, met die jaarlikse voorkoms van 0,41 gevalle per 100 000 bevolking [10]. In Asiatiese lande bestaan ​​daar selde verslae van listeriose as gevolg van die mislukking van opsporing of verslag. Dit kan ook die gevolg wees van 'n laer voorkoms of uitsluiting van listeriose vir differensiële diagnose deur dokters. Maar L. monocytogenes word beskou as een van die etiologiese faktore van spontane aborsies en doodgeboorte in Indië [11].

Mense ouer as 65 jaar en pasgeborenes het die hoogste infeksiesyfer gehad L. monocytogenes [12]. Moederlike oordrag na pasgeborenes is in 79% van die gevalle aangemeld. Listeriose het die hoogste sterftesyfer onder voedselgedraagde siektes [10]. Isolasie van L. monocytogenes van verskillende soorte RTE-voedsel het dit 'n merkwaardige voedselgedraagde patogeen gemaak [13, 14].

3. Subtik van L. monocytogenes

As gevolg van uiteenlopende stamme van L. monocytogenes, subtipe van isolate vir bevolkingsgenetika, bronopsporing en die epidemiologiese ondersoek is van kardinale belang vir die beheer en voorkoming van listeriose. Tik van L. monocytogenes is nodig om die bronne van besmetting te identifiseer en ondersoeke na uitbrake van listeriose op voedsel [15, 16]. Fenotipiese en genotipiese subtipering is die twee hoofmetodes wat deur navorsers gebruik is. As 'n fenotipiese metode word serotipering oor die algemeen gebruik vir L. monocytogenes stamme wat verband hou met uitbrake van siektes. As gevolg van die betrokkenheid van slegs drie serotipes by uitbrake van listeriose en 'n lae diskriminerende krag van serotipering by die onderskeiding van serotipes 4a, 4b en 4c, het serotipering nie genoeg krag vir die subtipe van L. monocytogenes [16]. Dus, PCR-gebaseerde subtiperingsprosedure soos ewekansige amplifikasie van polimorfiese DNA-polimerasekettingreaksie (RAPD-PCR), herhalende ekstrageniese palindrome-PCR (REP-PCR), enterobakteriese herhalende intergeniese konsensus-PCR (ERIC-PCR), en gepulseerde veld Gelelektroforese (PFGE) kry deesdae meer aandag. RAPD-toets versterk 'n paar ewekansige streek in die L. monocytogenes genome wat verskillende patrone genereer. RAPD is meer koste -effektief en vinniger as ander tikmetodes, veral vir 'n lae aantal stamme. RAPD-PCR-tegniek is een van die belangrikste metodes vir die karakterisering van bakteriële stam [15-18]. Enterobakteriese herhalende intergeniese konsensus-PCR (ERIC-PCR) is 'n hoogs betroubare, eenvoudige en ekonomiese metode wat in staat is om duidelike vingerafdruk te produseer in Listeria [19]. ERIC-PCR analise kan die isolate van dieselfde serotipe skei. Dit is ook in staat om te onderskei L. monocytogenes isolate wat in een monster met soortgelyke serotipe opgespoor is [18].

Beperkingsfragmentlengte Polimorfismes (RFLP) versterk een of sommige van die huishoudelike of virulensieverwante gene (bv. Hly, actA en inlA) van L. monocytogenes en dan verteer PCR produkte met beperking ensieme [16]. Dit benodig 'n lae kopiegetal DNA om die eksperiment uit te voer [16]. Dit het egter 'n laer diskriminerende krag en moet saam met ander subtipe tegnieke gebruik word, en dit is ook duurder as RAPD -toets [20]. Een van die ander metodes van genotipering van L. monocytogenes isolate is Amplified Fragment Length Polymorphisms (AFLP) metode. In AFLP is die vertering van DNA van isolate gedoen met twee beperkingsensieme, waaronder EcoRI, MseI of TaqI [16]. Een van die belangrikste voordele van AFLP is die hoë diskriminerende krag van hierdie toets [20]. In teenstelling hiermee is die slaggat van hierdie metode lae presisie in fragmentgroottes, wat lei tot laer reproduceerbaarheid [16].

PFGE is 'n instrument waarin, deur groot DNA-fragmente bloot te stel aan veranderende elektriese veld, isolate gesubtipeer is. Hierdie tegniek was meer diskriminerend as AFLP, maar is meer tydrowend, duur en arbeidsintensief in vergelyking met AFLP [20].

L. monocytogenes het ook 'n paar willekeurig verspreide, herhalende volgorde -elemente, soos herhalende ekstrageniese palindrome (REP's) van 35-40 bp met 'n omgekeerde herhaling. Hierdie streke bied 'n paar nuttige punte vir die onderskeid tussen stamme L. monocytogenes isolate. Met behulp van REP-PCR is die oorsprong van isolate geïdentifiseer. Dit het 'n gelyke vlak van diskriminasie teenoor PFGE. Dit word dus voorgestel as 'n geskikte tegniek vir die vinnige tik van hierdie isolate [16].

4. Listeria in die Pluimvee

4.1. Voorkoms van Listeria Spp. en L. monocytogenes in die Pluimvee

Een van die belangrikste voertuie van Listeria is pluimveekuddes wat die organisme in die omgewing en pluimveekarkasse kan versprei weens onhigiëniese praktyk [21]. Soms, Listeria is geïsoleer van die ontlasting van pluimvee en hoender. Listeria spp. is in verskillende pluimveeprodukte opgespoor [13, 22–25]. Volgens ander studies is 8% tot 99% van die pluimveeprodukte besmet Listeria spp. [13, 24, 26, 27].

L. monocytogenes is voorheen gerapporteer van verskillende pluimveeprodukte, van rou produkte tot gekookte produkte [13, 22, 28–35]. Schäfer et al. (2018) het die besmettingsyfer van bors- en dymonsters van hoender onderskeidelik as 8,64 en 44,19%gerapporteer [36]. 12,7 % van die kalkoenvleis was positief L. monocytogenes [37]. Tabel 2 toon die besmettingsgraad van pluimveevleis en produkte met Listeria spp. en L. monocytogenes.

Volgens Tabel 2 was rou pluimveevleis en produkte meer besmet met L. monocytogenes as gekookte.

4.2. Serotipes van Listeria monocytogenes in Pluimvee

Serotipes 1/2b en 3b (serogroep IIb) van L. monocytogenes was die oorheersende geïsoleerde serotipes (52,77%) in hoenderkarkasse in Iran, en IVa -serogroep wat 4a en 4c serotipes bevat, is ook in 27,77% hoenderkarkasse [6] aangetref. Die algemeenste serotipe in pluimveeprodukte in die VSA [38] was dieselfde. Maar in 'n ander studie is serotipe 4b gerapporteer as die mees algemene serotipe in pluimveeprodukte wat in 44.9% van die monsters opgespoor is, terwyl die voorkoms van serotipe 1/2b 10.2% was [33].

Die voorkoms van serogroep IVb was onderskeidelik 2,77% en 12,5% in hoenderkarkasse [6] en RTE -voedsel [14]. Menslike listeriose word hoofsaaklik veroorsaak deur 1/2a, 1/2b en 4b serovars van L. monocytogenes. 4b -serotipe word egter nie algemeen in voedsel [6] aangetref nie.

Verse kalkoenvleismonsters is besmet L. monocytogenes serotipes soos volg: 4b (of 4d, 4e) (51,4%), 1/2a (of 3a) (27,0%) en 1/2b (of 3b) (21,6%) [39]. Serotipe 4b is egter gereeld van kalkoenvleis en -pote geïsoleer, terwyl 1/2b algemeen was in kalkoenborsmonsters [39].

Ongeveer 16,66% van die hoenderkarkasse wat in Iran geneem is, was besmet met serogroep IIa wat 1/2a, 3a, 1/2c en 3c serotipes bevat [6]. 'N Ander serologiese studie oor pluimveeprodukte berig 1/2a serotipe in 40,8% en 1/2c serotipe in 4,08% van die monsters [33]. In ander studies was 1/2a -serotipe die oorheersende serotipe in pluimveeprodukte van Portugal en Estland [40, 41], terwyl in Finland 1/2c die belangrikste was [42]. Die geïdentifiseerde serogroepe in RTE -voedsel was 1/2a, 3a en 1/2c, 3c met die koers van onderskeidelik 65,6% en 21,9% [14]. Gebaseer op bogenoemde studies, is pluimveevleis 'n moontlike bron van patogene serotipes van L. monocytogenes.

4.3. Antimikrobiese vatbaarheid van Listeria monocytogenes

Listeria spp. is bestand teen antimikrobiese middels as gevolg van wydverspreide mobiele genetiese elemente en konjugatiewe transposons [33]. Twaalf uit 36 L. monocytogenes isolate was sensitief vir 11 getoetste antimikrobiese middels [22]. Nie een van die isolate het weerstand teen ampicillien en vankomisien gehad nie [22]. Sommige navorsers het weerstand teen ampicillien in L. monocytogenes isolate, maar al hul isolate was sensitief vir vankomisien [33]. Zeinali et al. (2017) het weerstand teen eritromisien waargeneem in 52,77% van L. monocytogenes isolate, maar in 'n ander studie is dit in 15.2% van die isolate aangemeld [33]. 8 uit 23 van L. monocytogenes isolate het weerstand teen eritromisien gehad [37]. Weerstand teen penisillien is 'n algemene bevinding in 'n aantal studies [22, 33, 37, 43]. Verder, 'n hoë vatbaarheid van L. monocytogenes na ampicillien en penisillien word ook gerapporteer [22, 27, 44-46]. Tetrasiklien is 'n antimikrobiese middel wat gereeld op pluimveeboerderye gebruik word en ook vir die behandeling van infeksie by mense. Weerstand teen hierdie middel word altyd waargeneem in L. monocytogenes [13, 22, 33, 47, 48]. 'N Lae aantal isolate was bestand teen gentamisien [22, 49]. Standaard terapie van listeriose word gedoen deur gebruik te maak van ampicillien of penisillien G saam met 'n aminoglikosied soos gentamisien. Die tweede lyn van behandeling behoort aan trimethoprim. Weerstand teen trimethoprim L. monocytogenes dra by tot die pIP823-plasmied. Daar is 'n hoë vatbaarheid vir hierdie middel L. monocytogenes isolate van voedsel [22, 49]. Meeste van die L. monocytogenes isolate het weerstand teen veelvuldige medisyne. Gelukkig is hulle meestal sensitief vir algemeen gebruikte antibiotika wat gebruik is om menslike listeriose te genees.

4.4. Tik van L. monocytogenes Isolate in pluimvee

Isolate van die L. monocytogenes met dieselfde RAPD-kluster het aan verskillende serogroep behoort [15, 54-56]. Vier verskillende groepe is onderskei tussen 26 isolate van L. monocytogenes van hoenderkarkasse deur RAPD-analise met drie verskillende primers, naamlik OPM-01, HLWL 74 en D8635 [57]. Hierdie 26 isolate van L. monocytogenes het 16 antibiogrampatrone [57].

L. monocytogenes isolate met soortgelyke polssoorte is in dieselfde groep in die RAPD-toets geklassifiseer. Hulle was ook klonaal verwant [14]. Verskillende laboratoriums het RAPD-toets gebruik vir subtipering van L. monositogene isolate [14, 58], insluitend isolate van verskillende pluimveeverwerkingsaanlegte [58, 59].

Verskeie isolate van RTE-voedsel is deur RAPD getik, hoewel dit nie onderskei kon word deur REP-PCR [14]. Agt en twintig isolate van L. monocytogenes van hoendervleis het 27 RAPD -tipes bestaan. Hulle was bestand teen drie of meer antimikrobiese middels [60].

Vyftien isolate van L. monocytogenes van eende het drie antibiogrampatrone, vyf RAPD -trosse en drie enkels. Dus, RAPD het 'n hoër krag in die onderskeiding van isolate [58].

Hoender en menslike isolate van L. monocytogenes is ingedeel in vyf groepe in RAPD -toets [54]. Alle menslike isolate is in een groep gekategoriseer [54]. Hierdie isolate het verskillende serogroepe gehad [54]. Dit was 'n algemene bevinding in ander studies [15, 55, 56, 61]. Dit kan wees as gevolg van versterking van onspesifieke lokusse in RAPD -toets [15]. Die meeste genetiese ooreenkomste is gesien onder isolate met 'n gemeenskaplike steekproefgebied [54]. Dieselfde RAPD-kluster is gesien in sommige Lactobacillus-stamme van algemene bron [62]. Die diskriminasievermoë van RAPD -toets is hoër as serotipering [54, 56]. Isolate in dieselfde RAPD -profiel het verskillende serotipes en is op verskillende gebiede opgespoor [15, 32, 54, 55, 63, 64].

29 isolate en 5 verwysingsstamme van L. monocytogenes is gegroepeer in 4 trosse en 1 enkelvoud deur REP-PCR [65]. Daar was 'n hoë genetiese diversiteit onder isolate. Volgens Shi et al. (2015), isolate wat tot dieselfde serotipe en oorsprong behoort, het dieselfde groep in REP-PCR gehad. 15 isolate van L. monocytogenes van eende en hul omgewings is deur RAPD en REP getik. Hulle is onderskeidelik in 5 groepe en 3 enkellopendes en 2 groepe en 3 enkellopendes ingedeel. Hierdie bevinding dui op die geskiktheid van hierdie instrumente vir die diskriminasie van stamme [58]. Soni et al. (2012) het ook opgemerk dat kliniese isolate van L. monocytogenes het soortgelyke ERIC- en REP -vingerafdrukke gehad, maar verskil baie van die water- en melkisolate [47]. Oliveira et al. (2018) het 12 pulsotipes gevind onder 38 isolate van L. monocytogenes [17]. 40 isolate van L. monocytogenes het 10 verskillende vingerafdrukprofiele in ERIC-PCR geproduseer. Soortgelyke vingerafdruk is gesien vir isolate van dieselfde monster, maar daar was twee stamme in een monster met verskillende vingerafdrukke [18]. L. monocytogenes 'n hoë genetiese diversiteit gehad het, en vir 'n goeie differensiasie van isolate is die gebruik van ten minste twee subtipe benaderings nodig.

5. Gevolgtrekking

Ten slotte, vanuit die voedselveiligheidsperspektief, die teenwoordigheid van L. monocytogenes in die pluimvee is vleis en produkte 'n veelvlakkige moontlike gevaar. Dit is eerstens te wyte aan sommige gebraaide en gebraaide kosse gebaseer op hoendervleis wat kan lei tot die oorlewing van L. monocytogenes in eindprodukte en, tweedens, die teenwoordigheid van isolate met meer geneesmiddels wat die antibiotika -weerstandigheid na die gemeenskap oordra. Sommige isolate was ook patogene serotipes wat 'n groot rol speel by uitbrake van menslike listeriose. Subtikdata het die heterogene aard van die L. monocytogenes isolate. RAPD, REP-PCR en ERIC-PCR het 'n aansienlike diskriminerende krag en is koste-effektief en minder vervelig en tydrowend.

Botsende belange

Die skrywers verklaar dat daar geen belangebotsings is nie.

Verwysings

  1. D. Meloni, "Fokus op die belangrikste morfologiese en fisiologiese kenmerke van die voedselgedraagde patogeen Listeria monocytogenes," Tydskrif vir Veeartsenykunde en Navorsing, vol. 1, pp. 1-2, 2014. Kyk op: Google Scholar
  2. M. Doumith, C. Buchrieser, P. Glaser, C. Jacquet en P. Martin, “Differentiation of the major Listeria monocytogenes serovars deur multipleks PCR," Tydskrif vir Kliniese Mikrobiologie, vol. 42, nr. 8, pp. 3819–3822, 2004. Kyk by: Uitgewerswebwerf | Google Scholar
  3. A. Colagiorgi, I. Bruini, P. A. Di Ciccio, E. Zanardi, S. Ghidini en A. Ianieri, "Listeria monocytogenes Biofilms in die wonderland van die voedselbedryf," Patogene, vol. 6, nee. 3, bl. e41, 2017. Kyk by: Google Scholar
  4. D. Liu, M. L. Lawrence, A. J. Ainsworth en F. W. Austin, "Op pad na 'n verbeterde laboratoriumdefinisie van Listeria monocytogenes virulence," Internasionale Tydskrif vir Voedselmikrobiologie, vol. 118, nr. 2, pp. 101–115, 2007. Kyk by: Uitgewerswebwerf | Google Scholar
  5. D. Liu, A. J. Ainsworth, F. W. Austin en M. L. Lawrence, "Karakterisering van virulente en avirulente Listeria monocytogenes-stamme deur PCR-amplifikasie van vermeende transkripsionele reguleerder en internalin-gene." Tydskrif vir Mediese Mikrobiologie, vol. 52, nr. 12, pp. 1065–1070, 2003. Kyk by: Uitgewerswebwerf | Google Scholar
  6. T. Zeinali, A. Jamshidi, M. Bassami en M. Rad, "Serogroep-identifikasie en Virulensie-geenkarakterisering van Listeria monocytogenes wat uit hoenderkarkasse geïsoleer is," Iranian Journal of Veterinary Science and Technology, vol. 7, nee. 2, pp. 9–19, 2015. Kyk by: Google Scholar
  7. C. Sabet, M. Lecuit, D. Cabanes, P. Cossart en H. Bierne, "LPXTG proteïen InlJ, 'n nuut geïdentifiseerde internalin wat betrokke is by Listeria monocytogenes virulensie," Infeksie en immuniteit, vol. 73, nee. 10, pp. 6912–6922, 2005. Kyk by: Publisher Site | Google Scholar
  8. D. Liu, M. L. Lawrence, F. W. Austin en A. J. Ainsworth, ''n Multiplex PCR vir spesie- en virulensie-spesifieke bepaling van Listeria monocytogenes,” Tydskrif vir Mikrobiologiese Metodes, vol. 71, nee. 2, pp. 133–140, 2007. Kyk by: Uitgewerswebwerf | Google Scholar
  9. D. Liu, A. J. Ainsworth, F. W. Austin, en L. L. Lawrence, "Gebruik van PCR-primers afgelei van 'n vermeende transkripsionele regulator-geen vir spesiespesifieke bepaling van Listeria monocytogenes," Internasionale Tydskrif vir Voedselmikrobiologie, vol. 91, nee. 3, pp. 297–304, 2004. Kyk by: Uitgewerswebwerf | Google Scholar
  10. FSA (Europese Voedselveiligheidsowerheid) en ECDC (Europese Sentrum vir Siektevoorkoming en -beheer), "Die Europese Unie-opsommingsverslag oor neigings en bronne van soönoses, soönotiese agente en voedselgedraagde uitbrake in 2012," EFSA Tydskrif, vol. 12, nee. 2, 3547 bladsye, 2014. Kyk by: Uitgewerswerf | Google Scholar
  11. Wêreldgesondheidsorganisasie (WGO), "Basiese inligting oor opkomende aansteeklike siektes (EID's): listeriose: wat ons moet weet," http://www.searo.who.int/entity/emerging_diseases/Zoonoses_Listeriosis.pdf, 2013. Kyk by : Uitgewerswerf | Google Scholar
  12. J. Denny en J. McLauchlin, "Human listeria monocytogenes infeksies in Europa-'n geleentheid vir verbeterde Europese toesig," Euro toesig, vol. 13, pp. 80–82, 2008. Kyk op: Google Scholar
  13. T. M. Osaili, A. R. Alaboudi, en E. A. Nesiar, “Prevalence of Listeria spp. en antibiotika vatbaarheid van Listeria monocytogenes geïsoleer uit rou hoender en gereed-om-te-eet hoenderprodukte in Jordanië,” Voedselbeheer, vol. 22, nee. 3-4, pp. 586–590, 2011. Kyk by: Uitgewerswebwerf | Google Scholar
  14. H. Jamali en K. L. Thong, “Genotipiese karakterisering en antimikrobiese weerstand van Listeria monocytogenes van klaar-om-te-eet-voedsel, ” Voedselbeheer, vol. 44, pp. 1–6, 2014. Kyk by: Uitgewerswebwerf | Google Scholar
  15. L. M. Lawrence, J. Harvey en A. Gilmour, "Ontwikkeling van 'n ewekansige versterking van polimorfe DNA -tikmetode vir Listeria monocytogenes," Toegepaste en omgewingsmikrobiologie, vol. 59, nee. 9, pp. 3117–3119, 1993. Kyk op: Google Scholar
  16. D. Liu, “Identifikasie, subtipe en virulensiebepaling van Listeria monocytogenes, 'n belangrike patogeen wat deur voedsel oorgedra word, " Tydskrif vir Mediese Mikrobiologie, vol. 55, nee. 6, pp. 645–659, 2006. Kyk by: Publisher Site | Google Scholar
  17. T.S. Oliveira, L.M. Varjão, L.N.N. da Silva et al., "Listeria monocytogenes by hoenderslaghuis: Voorkoms, genetiese verwantskap tussen isolate en evaluering van antimikrobiese vatbaarheid," Voedselbeheer, vol. 88, pp. 131–138, 2018. Kyk by: Uitgewerswebwerf | Google Scholar
  18. G. Cufaoglu en N. D. Ayaz, "Listeria monocytogenes risiko verbonde aan hoender tydens slag en biobeheer met drie nuwe bakteriofage, ” Tydskrif vir Voedselveiligheid, Artikel -ID e12621, 2019. Kyk op: Google Scholar
  19. M. Chen, Q. Wu, J. Zhang, Z. Yan en J. Wang, "Voorkoms en karakterisering van Listeria monocytogenes geïsoleer van kleinhandelbare voedsel in Suid-China," Voedselbeheer, vol. 38, nee. 1, pp. 1–7, 2014. Kyk by: Publisher Site | Google Scholar
  20. R. Di Cagno, G. Minervini, E. Sgarbi et al., "Vergelyking van fenotipiese (Biologiese stelsel) en genotipiese (ewekansige versterkte polimorfiese DNA-polimerase kettingreaksie, RAPD-PCR, en versterkte fragmentlengte polimorfisme, AFLP) metodes vir tik Lactobacillus plantarum isolate van rou groente en vrugte, ” Internasionale Tydskrif vir Voedselmikrobiologie, vol. 143, nr. 3, pp. 246–253, 2010. Kyk op: Uitgewerswebwerf | Google Scholar
  21. K. Dhama, A. K. Verma, S. Rajagunalan, A. Kumar, R. Tiwari, S. Chakraborty et al., "Listeria monocytogenes infeksie by pluimvee en die belangrikheid daarvan vir die volksgesondheid, met spesiale verwysing na voedselgedraagde zoonoses," Pakistan Journal of Biological Sciences, vol. 16, nee. 7, pp. 301–308, 2013. Kyk by: Uitgewerswebwerf | Google Scholar
  22. T. Zeinali, A. Jamshidi, M. Bassami en M. Rad, “Isolasie en identifikasie van Listeria spp. in hoenderkarkasse wat in noordoos van Iran bemark word,” International Food Research Journal, vol. 24, nr. 2, pp. 881–887, 2017. Kyk op: Google Scholar
  23. M. Jalali en D. Abedi, "Voorkoms van listeria spesies in voedselprodukte in Isfahan, Iran," Internasionale Tydskrif vir Voedselmikrobiologie, vol. 122, nr. 3, pp. 336–340, 2008. Kyk by: Uitgewerswebwerf | Google Scholar
  24. J. Chen, X. Luo, L. Jiang et al., "Molekulêre kenmerke en virulensiepotensiaal van Listeria monocytogenes isoleer van Chinese voedselstelsels, ” Voedselmikrobiologie, vol. 26, nr. 1, pp. 103–111, 2009. Kyk op: Uitgewerswebwerf | Google Scholar
  25. M. Elmali, H. Y. Can en H. Yaman, "Voorkoms van listeria monocytogenes in pluimveevleis," Voedselwetenskap en -tegnologie, vol. 35, nee. 4, pp. 672–675, 2015. Kyk by: Uitgewerswebwerf | Google Scholar
  26. L. M. Lawrence en A. Gilmour, "Incidence of Listeria spp. en Listeria monocytogenes in 'n pluimveeverwerkingsomgewing en in pluimveeprodukte en hul vinnige bevestiging deur multipleks PCR," Toegepaste en omgewingsmikrobiologie, vol. 60, nee. 12, pp. 4600–4604, 1994. Kyk by: Google Scholar
  27. I. Sakaridis, N. Soultos, E. Iossifidou, A. Papa, I. Ambrosiadis en P. Koidis, "Voorkoms en antimikrobiese weerstand van Listeria monocytogenes geïsoleer in hoenderslagplase in Noord-Griekeland,” Tydskrif vir Voedselbeskerming, vol. 74, nee. 6, pp. 1017–1021, 2011. Kyk by: Publisher Site | Google Scholar
  28. D. Gunasena, C. Kodikara, K. Ganepola en S. Widanapathirana, "Voorkoms van Listeria monocytogenes in voedsel in Sri Lanka," Tydskrif van die National Science Foundation of Sri Lanka, vol. 23, pp. 107–114, 1995. Kyk by: Google Scholar
  29. M. Uyttendaele, P. De Troy en J. Debevere, "Die voorkoms van Salmonella, Campylobacter jejuni, Campylobacter coli en Listeria monocytogenes in pluimvee karkasse en verskillende tipes pluimvee produkte te koop op die Belgiese kleinhandelmark," Tydskrif vir Voedselbeskerming, vol. 62, nee. 7, pp. 735–40, 1999. Kyk by: Google Scholar
  30. K. Kosek-Paszkowska, J. Bania, J. Bystroń, J. Molenda en M. Czerw, “Voorkoms van Listeria sp. in rou pluimveevleis en pluimveevleisprodukte, ” Bulletin van die Veterinêre Instituut in Pulawy, vol. 49, nr. 2, pp. 219–222, 2005. Kyk op: Google Scholar
  31. W. Van Nierop, A. G. Dusé, E. Marais et al., "Besmetting van hoenderkarkasse in Gauteng, Suid -Afrika, deur Salmonella, Listeria monocytogenes en Campylobacter," Internasionale Tydskrif vir Voedselmikrobiologie, vol. 99, nee. 1, pp. 1–6, 2005. Kyk by: Publisher Site | Google Scholar
  32. E. Atil, H. B. Ertas en G. Ozbey, "Isolasie en molekulêre karakterisering van Listeria spp. van diere, voedsel en omgewingsmonsters, ” Veterinêre medisyne, vol. 56, nee. 8, pp. 386–394, 2011. Kyk by: Uitgewerswebwerf | Google Scholar
  33. A. A. Fallah, S. S. Saei-Dehkordi, M. Rahnama, H. Tahmasby en M. Mahzounieh, "Voorkoms en antimikrobiese weerstandspatrone van Listeria-spesies geïsoleer van pluimveeprodukte wat in Iran bemark word," Voedselbeheer, vol. 28, nee. 2, pp. 327–332, 2012. Kyk by: Uitgewerswebwerf | Google Scholar
  34. S. G. Goh, C. H. Kuan, Y. Y. Loo, W. S. Chang, Y. L. Lye, P. Soopna et al., "Listeria monocytogenes in kleinhandel rou hoendervleis in Maleisië," Pluimvee Wetenskap, vol. 91, nee. 10, pp. 2686–2690, 2012. Kyk by: Publisher Site | Google Scholar
  35. C. H. Kuan, S. G. Goh, Y. Y. Loo et al., "Voorkoms en kwantifisering van Listeria monocytogenes in hoenderafval op kleinhandelvlak in Maleisië, ” Pluimvee Wetenskap, vol. 92, nr. 6, pp. 1664–1669, 2013. Kyk by: Uitgewerswebwerf | Google Scholar
  36. D. F. Schäfer, J. Steffens, J. Barbosa et al., "Monitering van besmettingsbronne van Listeria monocytogenes in 'n pluimveeslaghuis," LWT- Voedselwetenskap en Tegnologie, vol. 86, pp. 393–398, 2017. Kyk by: Publisher Site | Google Scholar
  37. FS Bilir Ormanci, I. Erol, N. D. Ayaz, O. Iseri, en D. Sariguzel, "Immunomagnetiese skeiding en PCR -opsporing van Listeria monocytogenes in vleis in Turkye en antibiotika -weerstandigheid van die isolate," Britse Pluimvee Wetenskap, vol. 49, nee. 5, pp. 560–565, 2008. Kyk by: Uitgewerswebwerf | Google Scholar
  38. Y. Zhang, E. Yeh, G. Hall, J. Cripe, A. A. Bhagwat en J. Meng, "Karakterisering van Listeria monocytogenes wat uit kleinhandelvoedsel geïsoleer is," International Journal of Food Microbiology, vol. 113, nr. 1, pp. 47–53, 2007.Kyk by: Uitgewerswerf | Google Scholar
  39. I. Erol en N. D. Ayaz, "Serotipe verspreiding van listeria monocytogenes geïsoleer uit Turkye vleis deur multiplex pcr in Turkye," Tydskrif vir Voedselveiligheid, vol. 31, nee. 2, pp. 149–153, 2011. Kyk by: Publisher Site | Google Scholar
  40. A. Praakle-Amin, M. L. Hänninen en H. Korkeala, "Voorkoms en genetiese karakterisering van Listeria monocytogenes in kleinvee-braaikuikens in Estland," Tydskrif vir Voedselbeskerming, vol. 69, pp. 436–440, 2006. Kyk by: Google Scholar
  41. M. M. Guerra, J. McLauchlin en F.A. Bernardo, "Listeria in eetbare en onverwerkte voedsel wat in Portugal vervaardig word," Voedselmikrobiologie, vol. 18, nr. 4, pp. 423–429, 2001. Kyk by: Uitgewerswebwerf | Google Scholar
  42. M. K. Miettinen, L. Palmu, K. J. Björkroth en H. Korkeala, "Voorkoms van Listeria monocytogenes in braaikuikens op die abattoir, verwerkingsaanleg en kleinhandelvlak." Tydskrif vir Voedselbeskerming, vol. 64, nr. 7, pp. 994–999, 2001. Kyk op: Publisher Site | Google Scholar
  43. N. D. Ayaz en I. Erol, "Verwantskap tussen serotipe verspreiding en antibiotika weerstand profiele van listeria monocytogenes geïsoleer uit Grond Turkye," Tydskrif vir Voedselbeskerming, vol. 73, nee. 5, pp. 967–972, 2010. Kyk by: Publisher Site | Google Scholar
  44. J. A. Davis en C. R. Jackson, "Vergelykende antimikrobiese vatbaarheid van listeria monocytogenes, L. innocua en L. welshimeri," Mikrobiese middelweerstand, vol. 15, nee. 1, pp. 27–32, 2009. Kyk by: Publisher Site | Google Scholar
  45. A. Alonso-Hernando, M. Prieto, C. García-Fernández, C. Alonso-Calleja en R. Capita, “Toename met verloop van tyd in die voorkoms van veelvuldige antibiotika weerstand onder isolate van Listeria monocytogenes van pluimvee in Spanje,” Voedselbeheer, vol. 23, nr. 1, pp. 37–41, 2012. Kyk by: Publisher Site | Google Scholar
  46. B. Dhanashree, S. K. Otta, I. Karunasagar, W. Goebel en I. Karunasagar, “Incidence of Listeria spp. in kliniese en voedselmonsters in Mangalore, Indië, ” Voedselmikrobiologie, vol. 20, nee. 4, pp. 447–453, 2003. Kyk by: Publisher Site | Google Scholar
  47. D. K. Soni, R. K. Singh, D. V. Singh en S. K. Dubey, "Karakterisering van Listeria monocytogenes geïsoleerd uit Ganges -water, menslike kliniese en melkmonsters in Varanasi, Indië," Infeksie, genetika en evolusie, vol. 14, nee. 1, pp. 83–91, 2013. Kyk by: Uitgewerswebwerf | Google Scholar
  48. A. Morvan, C. Moubareck, A. Leclercq et al., "Antimikrobiese weerstand van Listeria monocytogenes -stamme wat van mense in Frankryk geïsoleer is," Antimikrobiese middels en chemoterapie, vol. 54, nee. 6, pp. 2728–2731, 2010. Kyk op: Uitgewerswebwerf | Google Scholar
  49. M. Conter, D. Paludi, E. Zanardi, S. Ghidini, A. Vergara en A. Ianieri, "Karakterisering van antimikrobiese weerstand van voedselgedraagde Listeria monocytogenes," International Journal of Food Microbiology, vol. 128, nr. 3, pp. 497–500, 2009. Kyk op: Uitgewerswebwerf | Google Scholar
  50. X. Cao, Y. Wang, Y. Wang en C. Ye, "Isolasie en karakterisering van Listeria monocytogenes van die swartkopmeeu ontlasting in Kunming, China," Tydskrif vir Infeksie en Openbare Gesondheid, vol. 11, nee. 1, pp. 59–63, 2018. Kyk by: Publisher Site | Google Scholar
  51. P. Antunes, C. Réu, J. C. Sousa, N. Pestana, en L. Peixe, "Voorkoms en vatbaarheid vir antimikrobiese middels van Listeria spp. en Listeria monocytogenes geïsoleerd van pluimveekarkasse in Porto, Portugal, ” Tydskrif vir Voedselbeskerming, vol. 65, nr. 12, pp. 1888–1893, 2002. Kyk by: Publisher Site | Google Scholar
  52. B. Gudbjörnsdóttir, M.-L. Suihko, P. Gustavsson et al., "Die voorkoms van Listeria monocytogenes in vleis-, pluimvee- en seekosplante in die Nordiese lande," Voedselmikrobiologie, vol. 21, nee. 2, pp. 217–225, 2004. Kyk by: Publisher Site | Google Scholar
  53. S. Kanarat, W. Jitnupong en J. Sukhapesna, "Voorkoms van Listeria monocytogenes in hoenderproduksieketting in Thailand," Thai Journal of Veterinary Medicine, vol. 41, nr. 2, pp. 155–161, 2011. Kyk op: Google Scholar
  54. T. Zeinali, A. Jamshidi, M. Rad en M. Bassami, "'n Vergelykingsanalise van isolate van listeria monocytogenes wat van hoenderkarkasse en mense herwin is deur RAPD PCR te gebruik," International Journal of Clinical and Experimental Medicine, vol. 8, nr. 6, pp. 10152–10157, 2015. Kyk by: Google Scholar
  55. R. Aurora, A. Prakash en S. Prakash, "Genotipiese karakterisering van Listeria monocytogenes geïsoleer van melk en klaar om te eet inheemse melkprodukte," Voedselbeheer, vol. 20, nee. 9, pp. 835–839, 2009. Kyk by: Publisher Site | Google Scholar
  56. S.-I. Mazurier en K. Wernars, "Tik van Listeria -stamme deur willekeurige versterking van polimorfiese DNA," Navorsing in mikrobiologie, vol. 143, nr. 5, pp. 499–505, 1992. Kyk by: Publisher Site | Google Scholar
  57. T. Zeinali, A. Jamshidi, M. Rad en M. Bassami, "Analise van antibiotika -vatbaarheidsprofiel en RAPD -tik van listeria monocytogenes isolate," Tydskrif vir Gesondheidswetenskappe en Tegnologie, vol. 1, nee. 1, pp. 11–16, 2017. Kyk op: Google Scholar
  58. F. Adzitey, G. R. Rahmat Ali, N. Huda, T. Cogan en J. Corry, "Voorkoms, antibiotikaweerstand en genetiese diversiteit van Listeria monocytogenes wat van eende afgeskei is, hul grootmaak- en verwerkingsomgewings in Penang, Maleisië," Voedselbeheer, vol. 32, nr. 2, pp. 607–614, 2013. Kyk by: Publisher Site | Google Scholar
  59. S. Keeratipibul en P. Techaruwichit, "Opsporing van bronne van Listeria-besmetting in 'n gaar hoendervleisfabriek deur PCR-RAPD-gebaseerde DNA-vingerafdrukke," Voedselbeheer, vol. 27, nr. 1, pp. 64–72, 2012. Kyk by: Publisher Site | Google Scholar
  60. E. Purwati, S. Radu, A. Ismail, C. Y. Kqueen en L. Maurice, "Karakterisering van Listeria monocytogenes wat van hoendervleis geïsoleer is: bewyse van konjugale oordrag van plasmied-gemedieerde weerstand teen antibiotika," Tydskrif vir diere- en veeartsenykundige vooruitgang, vol. 2, nr. 4, pp. 237–246, 2003. Kyk op: Google Scholar
  61. L. Cocolin, S. Stella, R. Nappi, E. Bozzetta, C. Cantoni en G. Comi, "Analise van PCR-gebaseerde metodes vir die karakterisering van Listeria monocytogenes-stamme wat uit verskillende bronne geïsoleer is," International Journal of Food Microbiology, vol. 103, nr. 2, pp. 167–178, 2005. Kyk by: Publisher Site | Google Scholar
  62. D. Corroler, I. Mangin, N. Desmasures en M. Gueguen, "'n Ekologiese studie van laktokokke wat uit rou melk geïsoleer is in die camembertkaas-geregistreerde aanwysingsgebied van oorsprong," Toegepaste en omgewingsmikrobiologie, vol. 64, pp. 4729–4735, 1998. Kyk op: Google Scholar
  63. S. Park, J. Jung, S. Choi et al., "Molekulêre karakterisering van Listeria monocytogenes gebaseer op die PFGE en RAPD in Korea," Vooruitgang in mikrobiologie, vol. 02, nie. 04, pp. 605–616, 2012. Kyk op: Google Scholar
  64. L. M. Lawrence en A. Gilmour, "Karakterisering van Listeria monocytogenes geïsoleer uit pluimveeprodukte en uit die pluimvee-verwerking omgewing deur ewekansige versterking van polimorfiese DNA en multilokus ensiem elektroforese," Toegepaste en omgewingsmikrobiologie, vol. 61, nee. 6, pp. 2139–2144, 1995. Kyk op: Google Scholar
  65. W. Shi, W. Qingping, Z. Jumei, C. Moutong en Y. Zéan, "Voorkoms, antibiotikaweerstand en genetiese diversiteit van Listeria monocytogenes wat geïsoleer is uit kleinhandelbare voedsel in China," Voedselbeheer, vol. 47, pp. 340–347, 2015. Kyk by: Publisher Site | Google Scholar

Kopiereg

Kopiereg © 2019 Abdollah Jamshidi en Tayebeh Zeinali. Dit is 'n oop toegangsartikel wat onder die Creative Commons Attribution License versprei word, wat onbeperk gebruik, verspreiding en reproduksie in enige medium moontlik maak, mits die oorspronklike werk behoorlik aangehaal word.


Kyk die video: APUESTA EBT Listeria Monocytogenes (September 2022).


Kommentaar:

  1. Molloy

    Between us, in my opinion, this is obvious. I will not speak on this topic.

  2. Ramey

    check it out, check it out.

  3. Etienne

    En is daar so 'n analoog?

  4. Gedalya

    Watter woorde ... wonderlik, die uitstekende sin

  5. Akile

    Hulle is verkeerd. Ek kan dit bewys.



Skryf 'n boodskap