Inligting

Hoe kan u verhoed dat 'n ou promotorstreek tydens ligasie op 'n plasmied in plaas van 'n nuwe een heg?

Hoe kan u verhoed dat 'n ou promotorstreek tydens ligasie op 'n plasmied in plaas van 'n nuwe een heg?



We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Wat ek probeer doen, is om 'n bestaande promotorgebied in 'n plasmied uit te haal en dit deur 'n nuwe een te vervang. Dus gebruik ek eers die toepaslike beperkingsensieme om van die bestaande promotorstreek ontslae te raak. Vervolgens voeg ek die nuwe promotorfragment by wat die toepaslike taai punte het, en dan deur afbinding wil ek die nuwe promotor in die plasmied plaas.

Aangesien die ou promotorstreek en die nuwe promotorstreek dieselfde 'taai punte' sal hê, hoe kan ek voorkom dat die ou promotorstreek tydens ligasie in die plasmied in plaas van die nuwe geplaas word?


  1. Draai dit op 'n gel na vertering en onttrek slegs die vektor.

  2. Behandel met 'n fosfatase na vertering. Dit sal religering voorkom aangesien jy ten minste een van jou fragmente nodig het om gefosforileer te word vir die afbinding om te werk.

  3. ('N moet, ongeag) volg 'n aantal kolonies aan die einde.

Ek beveel aan om al drie te doen.

Edit: opsie 4: verteer met 'n derde ensiem wat u ou promotor insny, maar nie die vektor of die nuwe promotor nie.


Kyk die video: De klimop of Hedera snoeien: Hoe doe je dat? Tuinmanieren (September 2022).