Inligting

Met watter soort “grootte” skei SDS-PAGE?

Met watter soort “grootte” skei SDS-PAGE?


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Wat is die presiese eienskap van die proteïen wat migrasie van bande in SDS-PAGE beïnvloed; is dit lengte, volume of massa?

Byvoorbeeld, salGGGGGGGGGG(glisien 10-meer; mw <600) migreer meer of minder asWWWWW(triptofaan 5-meer; mw >900)?


Die protokol vir SDS-PAGE gebruik 'n oplossing van natriumdodesielsulfaat (SDS, ook bekend as laurylsulfaat) om gevoude proteïenmolekules te solubiliseer en te lineariseer en om hulle 'n negatiewe lading te gee ongeveer eweredig aan die lengte (en min of meer tot die massa) van die proteïen, afhangende van die volgorde daarvan. Sommige rye kan die SDS makliker bind, terwyl ander dalk nie, so die verhouding tussen lading en massa/lengte is nie perfek nie.

Die gelineariseerde (en dikwels gereduseerde, tipies met DTT of β-merkapto-etanol) proteïenoplossing word geskei deur poliakrielamied-gelelektroforese (PAGE), waarin die negatief-gelaaide proteïen(e) migreer deur die porieë in 'n gel as gevolg van 'n elektriese veld wat oor toegepas word. die gel. Kleiner proteïene loop vinniger en word (deur baie verskillende metodes) nader aan die onderkant van die jel gevisualiseer, terwyl groter proteïene nader aan die bokant is. Tipies word 'n standaard molekulêre gewig merker langs die monsters van belang uitgevoer sodat benaderde molekulêre massa gemeet kan word. 'n Aantal situasies kan veroorsaak dat die monsters nie presies volgens hul berekende molekulêre massa migreer nie, insluitend hoë vlakke van glikosilering, fosforilering of ander post-translasionele modifikasies, sowel as veranderlike binding aan die SDS soos hierbo bespreek.