Inligting

Assays tydens geneesmiddelontdekking

Assays tydens geneesmiddelontdekking



We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

Nadat ek die definisie van Assay nagevors het, sit ek met die idee dat 'n toets na wetenskaplike sifting verwys. Dit kan van chemikalieë, mikrobes, ens.

Ek verstaan ​​dat wetenskaplikes tydens dwelmontdekkingstoetse vir chemiese verbindings kyk wat 'n effektiewe middel kan vorm.

Maar kan iemand verduidelik, of vir my 'n paar skakels voorsien wat die proses van toetse verder bespreek, of hoe dit werk of plaasvind tydens geneesmiddelontdekking? Eerlik gesê, ek is ook nog 'n bietjie verward oor die definisie van "Assay" self.

Dankie.


Daar kan aan 'n toets gedink word as 'n proef of toets wat ontwerp is om die hoeveelheid van 'n stof in 'n monster kwantitatief te bepaal.

Dus kan 'n biochemikus 'n proteïentoets gebruik om die hoeveelheid proteïen in 'n monster kwantitatief te bepaal, of 'n farmakoloog kan 'n monster toets om die hoeveelheid geneesmiddel wat teenwoordig is kwantitatief te bepaal, of 'n ensiemoloog kan 'n ensiemtoets uitvoer om die hoeveelheid ensiem te bepaal aktiwiteit in 'n monster.

Kom ons neem die geval van die ensiemoloog. Ek neem 'n lewermonster, homogeniseer dit, sentrifugeer en neem die supernatant (oplosbare) fraksie. Ek wil die hoeveelheid van 'n gegewe ensiemaktiwiteit kwantitatief bepaal.

Ek doen dit deur 'n toets uit te voer deur (sê) 'n monster van die supernatant by 'n skemerkelkie te voeg wat 'iets doen' slegs as die ensiem van belang teenwoordig is. Die 'doen iets' kan 'n kleurverandering wees, waar die skemerkelkie alles bevat wat nodig is vir die ensiem om te werk (alle substrate, kofaktore, ens.) en waar die ensiem een ​​van die substrate omskep na 'n gekleurde produk. Ek het nou 'n ensiemtoets wat vir my sê of die ensiem teenwoordig is (die proef), wat kwantitatief gemaak kan word met verwysing na die hoeveelheid kleur wat in 'n gegewe tyd geproduseer word.

Soos ek dinge onthou, was Sherlock Homes redelik goed met die toetse, en het dit gebruik om sy geologiese monsters te toets, maar ek kan nie die kwotasie vind nie.


Ek is 'n aptekersstudent en ek kan probeer verduidelik hoe hulle doen om nuwe medisyne te vind. Trouens, daar is baie verskillende maniere om dit te doen, dit hang af van watter soort nuwe dwelm jy soek.

Soms werk jy aan 'n siekte waarvan die patologiese molekulêre werkingsmeganisme welbekend is en waar baie middels reeds effektief is. In hierdie geval kan die 'toets' net gaan oor die verbetering van 'n bekende molekule deur 'n klein deel van die molekule by te voeg of te verander (vervang 'n ketoon deur byvoorbeeld 'n alkohol). Altyd in hierdie geval weet jy op watter molekulêre reseptor jy moet optree, sy 3D-struktuur, sy samestelling, sy ligging in die menslike liggaam en miskien die belangrikste (maar jy weet dit nie elke keer nie en in hierdie geval, jy kan op hierdie punt begin) hoe en watter deel van jou dwelm op enige deel van die reseptor inwerk.

Dan het jy molekulêre biblioteke waar jy jou nuwe dwelm kan deursoek. Hulle word op verskillende maniere gevoed: iemand wat 'n nuwe chemiese reaksie gevind het wat 'n chemiese funksie kan byvoeg waar jy nie voorheen kon nie en verskeie nuwe verbindings genereer deur sy nuwe metode toe te pas. Al hierdie verbindings kan aan 'n nasionale biblioteek gegee word waar toegang moontlik is. Jy kan ook intermediêre verbindings van reaksie vind. Dit gebeur in openbare navorsing omdat private laboratoriums hul ontdekkings geheim hou.

Soms werk jy aan 'n siekte waar die gewone geneesmiddel nie regtig ooreenstem met die reseptor nie, in hierdie geval het jy 3D-gereedskap wat molekule en reseptor kan modelleer om te kwantifiseer hoe hulle ooreenstem. Dit word bereik op baie baie molekules uit hierdie biblioteek en hierdie metodes genereer min middels wat by die beste pas.

Dan werk jy aan hierdie middels om hulle te verbeter en versoenbaar te maak met spysverteringversperrings as jy 'n orale dwelm wil hê, of met die galeniese vorm wat jy nodig het. Hierdie punt gaan oor die verbetering van die passing met die reseptor deur 'n paar dele van die molekule te verander.

Trouens, wanneer jy weet op watter molekule jy wil optree, begin dit alles met IT-instrumente wat interaksies meet tussen hierdie molekule waarop jy wil optree en ander ewekansige molekules.

Wanneer jy nie die molekulêre meganismes van jou siekte ken nie, moet jy dit vantevore vind, anders gaan jy dubbelblind werk.

Dit is 'n paar deel van die werklikheid, ek hoop dit het die laaste deel van jou vraag beantwoord.


Die belangrikheid van ADMET in vroeë geneesmiddelontdekking en -ontwikkeling

Sartorius
3 Junie 2020

D rug ontdekking en ontwikkeling is 'n ingewikkelde en lang proses, een wat 'n groot mate van finansiële, arbeid en tydinvestering verg. Tog ervaar geneesmiddelontwikkeling 'n hoë slytasiekoers, aangesien vermoedelike verbindings nie die gewenste doeltreffendheid lewer nie, of navorsers ontdek dat dit onaanvaarbare risiko's vir menslike gesondheid inhou. ADMET-toetse (absorpsie, verspreiding, metabolisme, eliminasie en toksisiteit) kenmerk belowende farmakologiese verbindings, wat beide dié met potensiaal en dié met groot diskwalifiserende nadele identifiseer.

Mandy Xu is die vise-president van dwelmmetabolisme en farmakokinetika vir Pharmaron, 'n internasionale kontraknavorsingsorganisasie met sy hoofkwartier in Beijing, China wat toegewy is aan die verskaffing van medisynenavorsing en -ontwikkelingsdienste vir die lewenswetenskappe-industrie. Xu, 'n gegradueerde van die Peking-universiteit, lei tans 'n span van meer as 200 individue in die verskaffing van in vitro ADMET-oplossings vir navorsers in die biotegnologie- en farmaseutiese industrie. "My span fokus hoofsaaklik op vroeë ontdekking ... om die aktiwiteit van 'n verbinding te bepaal en om te sien of dit geduld en in vivo gebruik kan word," het Xu gesê.

Waarom is ADMET belangrik vir vroeë geneesmiddelontdekking?

“ADMET-toetse word gebruik om al die eienskappe van 'n potensiële middel te ondersoek. My span verskaf ADMET-dienste wat alle fases van geneesmiddelontwikkeling insluit, van vroeë geneesmiddelontdekking deur gebruik te maak van in vitro-tegnologieë, pre-kliniese ADMET-studies om IND (ondersoekende nuwe geneesmiddel) voorlegging te ondersteun, tot by kliniese AME (absorpsie, metabolisme en eliminasie). ) studies vir NDA (nuwe dwelmaansoek) indiening,” het Xu gesê. “Gewoonlik hou mense daarvan om so gou as moontlik ADMET-profiele op nuut gesintetiseerde verbindings uit te voer. Op hierdie manier kan hulle biologiese keuring doen om doeltreffendheid te evalueer en te bepaal of daar terselfdertyd enige potensiaal vir dwelmveiligheidskwessies is.”

Volgens Xu help ADMET-profilering om potensiële risiko's tydens kliniese ontwikkeling te verminder. “Omdat mislukkings in die ontwikkeling van geneesmiddels die gevolg kan wees van doeltreffendheid- of veiligheidskwessies, weet ons dat ADMET-profilering nodig is om te bepaal of 'n verbinding geskik is om na die kliniese stadium voort te gaan of nie. Ons gebruik in vitro-strategieë om dinge te analiseer en te voorspel soos hoe goed 'n verbinding in vivo geabsorbeer kan word en hoe die saamgestelde metabolisme en ekskresiekinetika lyk. Ons het ook in vitro panele om toksisiteit te evalueer om te evalueer of 'n verbinding sitotoksies is of potensiële lewer- en harttoksisiteit het, en ons gebruik hierdie resultate om toksisiteit binne die menslike liggaam te voorspel."

Watter toetse gebruik jy in jou laboratorium vir ADMET-profilering tydens vroeë geneesmiddelontdekking?

Omvattende en akkurate ADMET-profilering vereis 'n diverse en presiese gereedskapkas. "Ons gebruik gewoonlik meer as honderd toetse in totaal," sê Xu met 'n laggie, voordat hy verduidelik het dat hierdie toetse in vyf breë kategorieë geklassifiseer kan word: oplossingseienskappe, geneesmiddelabsorpsie en -vervoer, metaboliese stabiliteit en identifikasie, geneesmiddel-middel-interaksies, en in vitro toksisiteit.

Die bepaling van oplossingseienskappe is die eerste stap. "Ons het toetse om te kyk na parameters soos pKa-waardes, verdelingskoëffisiënte, tydelike stabiliteit, en die mate waarin 'n verbinding met proteïen of weefsel bind," het Xu voortgesit. “Sodra dit gedoen is, wend ons ons tot toetse wat bedoel is om geneesmiddelabsorpsie en vervoer te evalueer. Ons het ’n omvattende dwelmvervoerder-toetsplatform wat in ons laboratorium opgestel is.”

Wanneer dit kom by die karakterisering van metaboliese aktiwiteit, gebruik Xu en haar span hoë-resolusie massaspektrometrie om die struktuur van enige metaboliete wat teenwoordig mag wees toe te lig. Laastens is 'n verskeidenheid sel- of ensiemgebaseerde toetse beskikbaar vir die evaluering van geneesmiddel-middel-interaksies en vir toksisiteit-evaluasies teen spesifieke organe soos die lewer en hart. "Ons kan evalueer of 'n verbinding byvoorbeeld 'n substraat, inhibeerder of induseerder teen CYP's (sitochrome P450s) is," het Xu gesê. Hierdie toetse gee Xu se span buigsaamheid en omvang om aan die behoeftes van navorsers regoor die wêreld te voldoen, of hulle nou 'n voorlopige skerm wil hê of hulle wil 'n pasgemaakte battery toetse vir omvattende saamgestelde evaluasie gebruik.

Wanneer jy 'n in vitro-toets ontwerp of kies, wat is die sleutelparameters om te verseker dat 'n in vitro-toets in vivo toepaslike data verskaf?

Terwyl Xu se span hoofsaaklik in vitro-toetse gebruik om ADMET-profiele uit te voer, verstaan ​​hulle die noodsaaklikheid dat die inligting wat verskaf word, relevant moet wees vir in vivo situasies en scenario's. Xu se span kweek primêre selle en primêre sellulêre komponente, soos hepatosiete en lewer- of derm-afgeleide mikrosome, om geneesmiddelmetabolisme en -stabiliteit te ondersoek.

Die waarde van 'n toets vir ADMET-profilering is nie net gebaseer op die in vivo-relevansie daarvan nie, maar dit hang ook af van die akkuraatheid en betroubaarheid van die data wat dit genereer. Basiese instrumente, soos pipette, filters en balanse, word dikwels oor die hoof gesien omdat hulle in byna alle lewenswetenskaplaboratoriums gevind kan word, maar dit is van kritieke belang vir hierdie proses. Xu se span wetenskaplikes benodig pipette vir vloeistofhantering en oordrag, en gebruik beide enkel- en multikanaalpipette soos deurvloeivereistes vereis. Die gebruik van ergonomies ontwerpte gereedskap help om die risiko van herhalende spanningsbeserings te verminder, bevorder betroubaarheid en verminder moegheid-geïnduseerde verskille.

Balans is 'n groot deel van enige biologie of farmakokinetiese laboratorium, en kenmerke soos statiese eliminasie en outomatiese nivellering is 'n seën om akkuraatheid te handhaaf. "Akkurate balanse is belangrik vir al ons toetse," het Xu gesê. "Ons moet die vaste verbindings wat ons toets, wat dikwels in poeiervorm kom, opweeg om voorraad- en werkoplossings te skep." Laastens gebruik Xu se span 'n watersuiweringstelsel om oplossings en media vir selkultuur voor te berei. Die stelsel verminder sekondêre kontaminasie deur weggooibare sakke te gebruik om gesuiwerde water te berg, terwyl dit ook die tyd wat nodig is vir skoonmaak en instandhouding verminder.


Toksikologiestrategieë vir dwelmontdekking: hede en toekoms

Slytasie as gevolg van nie-kliniese veiligheid verteenwoordig 'n groot kwessie vir die produktiwiteit van farmaseutiese navorsing en ontwikkeling (N&O) organisasies, veral tydens die saamgestelde optimalisering stadiums van geneesmiddel ontdekking en die vroeë stadiums van kliniese ontwikkeling. Fokus op die vermindering van nie-kliniese veiligheidsverwante slytasie is nie 'n nuwe konsep nie, en verskeie benaderings is oor die afgelope twee dekades geëksperimenteer. Voorlaai-toetstregters in Discovery met in vitro toksisiteitstoetse wat ontwerp is om vinnig ongunstige molekules te identifiseer, was die benadering wat die meeste farmaseutiese R&D-organisasies 'n paar jaar gelede aanvaar het. Hierdie benadering het egter ook 'n nie-weglaatbare geleentheidskoste. Gevolglik is beduidende verfynings aan die "misluk vroeg, misluk dikwels"-paradigma onlangs voorgestel om die kompleksiteit van die akkurate kategorisering van verbindings met vroeë datapunte te weerspieël sonder om ander belangrike kontekstuele aspekte in ag te neem, veral doeltreffende sistemiese en weefselblootstelling. Hierdie oorsig verskaf 'n oorsig van toksikologiese benaderings en modelle wat in farmaseutiese ontdekking gebruik kan word by die reeks-/loodidentifikasie- en loodoptimaliseringstadium om chemiepogings te lei en in te lig, sowel as 'n persoonlike siening oor hoe om dit die beste te gebruik om nie-kliniese veiligheid te bereik. -verwante uitvaldoelwitte wat ooreenstem met 'n volhoubare farmaseutiese R&D-model. Die omvang van hierdie oorsig is beperk tot klein molekules, aangesien groot molekules geassosieer word met uitdagings wat heel anders is. Laastens word 'n perspektief gegee oor hoe verskeie opkomende tegnologieë die toksisiteitsevaluering kan beïnvloed.


Fenotipiese toetse

Evotec is 'n wêreldleier in die uitvoering van sellulêre en weefselgebaseerde beeldtoetse. 'n Uitgebreide infrastruktuur is beskikbaar met moderne beeldtoestelle (Phenix, Opera, Operette, IN Sel Ontleder) insluitend 'n toegewyde kundige span wat fokus op die ontwikkeling van nuwe beeldanalise-skrifte.
Hoë-inhoud beelding-gebaseerde toetse (HCA's) maak die kombinasie van komplekse sellulêre modelle met siekte-relevante toetsuitlesings moontlik. Dit laat die modellering van siekte toe in vitro, die oorbrugging van die gaping tussen rekombinante sellulêre sisteme en in vivo studies, en selfs oorbrugging in die kliniek.

Sinapsvorming in primêre neurone van rotte

HCA-toepassings sluit in die ontwikkeling en implementering van toetse vir fenotipiese treffer-identifikasieskerms, maar ook siekte-relevante sel-gebaseerde toetse vir samestelling karakterisering tydens H2L en loodoptimering.
Evotec het 'n verskeidenheid sellulêre modelstelsels suksesvol geëvalueer, insluitend primêre neuronale kulture, nierselle, immuunselle, tumorselle, longselle, spier- en beta-selle sowel as pasiënt-afgeleide stamselle. Verder is beeldvorming 'n sleutelplatform vir weefselgebaseerde teikenvalideringsaktiwiteite, insluitend in die SSS-area, met behulp van ex vivo histologie en immuno-histochemie benaderings.


3. Ontwikkeling: Kinetika, geneesmiddelverspreiding, veiligheid, biomerkers en doeltreffendheid

'n Biologiese teiken, selfs een met validerende data, sal slegs nuttig wees vir geneesmiddelontwikkeling as dit moontlik is om molekules te maak wat die teiken beïnvloed op 'n manier wat goed verdra en terapeuties bruikbaar kan wees. Verder moet gewys word dat daardie molekules eienskappe het wat hulle in staat stel om soos 'n medisyne op te tree wanneer dit aan mense gegee word. Die molekules moet farmakokinetiese (PK) eienskappe hê wat dit moontlik maak om 'n voorspelbare en konsekwente verband te wees tussen die dosis van die geneesmiddel wat gegee word, blootstelling van die geneesmiddel op die voorgestelde plek van werking, en die binding van die geneesmiddel aan die teiken van terapeutiese belang. . Die prekliniese en latere kliniese studies wat nodig is om hierdie PK-eienskappe van 'n voorgestelde medisyne te bepaal, is omvattend [13] en is veral kompleks vir SSS-teikens as gevolg van die bloed-breinversperring. Gelukkig het vooruitgang in medisinale chemie en biologiese PK-modellering die aantal molekules wat kliniese ontwikkeling betree met onbevredigende PK-eienskappe verminder [13]. Inderdaad, dit verteenwoordig 'n gebied waarin die identifisering van 'n probleem, onbevredigende PK/biobeskikbaarheid, gelei het tot die implementering van effektiewe strategieë om 'n beduidende oorsaak van geneesmiddelontwikkelingsmislukkings reg te stel. Gedurende 1991 het onbevredigende PK/biobeskikbaarheidseienskappe van eksperimentele middels die belangrikste oorsaak van afslyting verteenwoordig, wat verantwoordelik is vir ongeveer 40% van die mislukkings in die ontwikkeling van geneesmiddels. Teen 2000 het hierdie oorsaak van slytasie egter tot minder as 10% gedaal [14]. Die waardering dat voorheen suksesvolle middels tipies fisies-chemiese en strukturele eienskappe binne sekere reekse het, en die toepassing van hierdie kennis wanneer die sintese van nuwe chemiese entiteite oorweeg word, soos voorgestel deur Chis Lipinski in sy “rule of five” [15] , het het die ontwikkeling van beide sistemiese en SSS-middels positief beïnvloed.

Die reeks potensieel veilige en verdraagbare dosisse van 'n molekule moet bepaal word voor menslike toetsing. Toksikologiestudies in ten minste twee nie-menslike spesies word gewoonlik gebruik om 'n geprojekteerde veilige dosisreeks te bepaal en om inligting oor verbindingsverspreiding, orgaanspesifieke toksisiteit en metabolisme te verskaf [16]. Hierdie studies moet inligting verskaf oor die opkoms van nadelige effekte namate die dosis van die samestelling verhoog word en leiding gee oor verbindingspesifieke monitering wat nodig mag wees in vroeë kliniese studies. Ernstige, onomkeerbare nadelige effekte wat in hierdie studies waargeneem is binne sommige veelvoude van die geprojekteerde doeltreffende dosis sal waarskynlik verdere ontwikkeling van die verbinding voorkom. Saamgestelde mislukkingskoerse as gevolg van toksisiteit voor menslike toetsing is relatief hoog [7] , en is verantwoordelik vir soveel as 30% van geneesmiddelafslyting wat tydens die kliniese stadium van ontwikkeling plaasvind [14] , wat die behoefte beklemtoon om rugsteunverbindings te hê vir teikens wat goed is bekragtig en van hoë strategiese belang. Die ander sleuteloorsaak van slytasie is 'n gebrek aan doeltreffendheid, wat verantwoordelik is vir sowat 30% van geneesmiddelontwikkelingsmislukkings [14] en heel moontlik meer vir SSS-middels waarin diermodelle van doeltreffendheid onbetwisbaar onvoorspelbaar is as gevolg van die kompleksiteit van die menslike brein in vergelyking met knaagdierdiermodelle en die komplekse etiologie van neurologiese afwykings.

Soos aangedui in Fig.ਁ, word slegs ongeveer 1 uit 8 verbindings wat kliniese ontwikkeling in die farmaseutiese industrie betree uiteindelik goedgekeur vir bemarking. Soos opgemerk, is die sukseskoers baie laer vir siektes soos AD. Die onlangse oorsig wat voorheen genoem is [4] het bevind dat 244 verbindings kliniese ontwikkeling vir AD tussen 2002 en 2012 betree het, met slegs een van hulle (memantine—n N-metiel-D-aspartaat-reseptorantagonis en simptomaties, eerder as siekteprogressie, geneesmiddel) regulatoriese goedkeuring dit is 'n mislukkingskoers van 99,6%. Selfs met die buitengewoon hoë druipsyfer in hierdie siekte, het maatskappye voortgegaan om te belê omdat die onvervulde mediese behoefte groot is en daar wetenskaplik aanneemlike teikens is om na te streef. Die meeste (78%) van die 413 kliniese proewe (244 unieke molekules) wat van potensiële medisyne vir AD tussen 2002 en 2012 uitgevoer is, is deur die farmaseutiese industrie ondersteun [4].


Farmakodinamiese toetse om prekliniese en kliniese ontwikkeling van pre-mRNA-splyting modulerende geneesmiddelkandidate te fasiliteer

Die spliceosoom het onlangs na vore gekom as 'n nuwe teiken vir kankerchemoterapie en nuwe antitumor spliceosoom-geteikende middels is onder ontwikkeling. Hier beskryf ons twee tipes nuwe farmakodinamiese toetse wat geneesmiddelontdekking en ontwikkeling van hierdie intrigerende klas innoverende terapeutika fasiliteer, die eerste toets is nuttig vir prekliniese optimering van kleinmolekule-middels wat die SF3B1-spliceosomale proteïen in diere teiken, die tweede toets is 'n ex vivo-gevalideerde, gel-gebaseerde toets vir die meting van geneesmiddelblootstelling in menslike leukosiete. Die eerste toets maak gebruik van 'n hoogs spesifieke bioluminescerende splitsingsverslaggewer, gebaseer op die oorslaan van eksons 4-11 van 'n Luc-MDM2 konstruk, wat spesifiek aktiewe luciferase lewer wanneer dit behandel word met klein-molekule spliceosoom modulators. Ons demonstreer dat hierdie verslaggewer gebruik kan word om alternatiewe splitsing in heel selle in vitro te monitor. Ons beskryf hier dat sellyne wat die verslaggewer dra in vivo gebruik kan word vir die doeltreffende farmakodinamiese analise van middels tydens geneesmiddeloptimalisering en -ontwikkeling. Ons demonstreer ook dosis- en tydafhanklike op-teikenaktiwiteit van sudemycin D6 (SD6), wat lei tot dramatiese tumorregressie. Die tweede toets maak staat op die behandeling van vars geneem menslike bloed met SD6 ex vivo behandeling. Veranderinge in alternatiewe splitsing word bepaal deur RT-PCR deur gebruik te maak van gene wat voorheen in in vitro eksperimente geïdentifiseer is. Die Luc-MDM2 alternatiewe splitsing bioluminescerende verslaggewer en die splitsingsveranderinge wat in menslike leukosiete waargeneem word, behoort die makliker translasie van nuwe splitsingsmodulators in kliniese toepassing moontlik te maak.

Sleutelwoorde: Kanker-ekson-oorslaan verslaggewer in vivo beelding pre-mRNA splitsing spliceosoom modulators sudemycin D6.

Syfers

Skematiese oorsig van die splitsing...

Skematiese oorsig van die splitsingsreaksie. (A) Eksons word getoon as bokse, introne...

Karakterisering van die ekson-oorslaanverslaggewer...

Karakterisering van die ekson-oorslaanverslaggewer. (A) Die Luc-MDM2-konstruksie bevat dele van 'n...

SD6 Dosisreaksie, ortogonale RT-PCR...

SD6 Dosisreaksie, ortogonale RT-PCR-toets en toetsvalidering. (A, B en C)...

In vivo meting van spliceosoom ...

In vivo meting van spliceosoommodulasie deur bioluminescerende beelding BLI. (A) Atimies (naak)...

Alternatiewe splitsingsveranderinge vanaf sudemycin...

Alternatiewe splitsingsveranderinge van sudemisienbehandeling van menslike bloed. (A) Vars getekende mens...


Stap 3: Kliniese Ontwikkeling

Sodra prekliniese navorsing voltooi is, gaan navorsers oor na kliniese geneesmiddelontwikkeling, insluitend kliniese proewe en vrywillige studies om die middel vir menslike gebruik te verfyn.

Kompleksiteit van studie-ontwerp, gepaardgaande koste en implementeringskwessies

Die kompleksiteit van kliniese proef ontwerp en die gepaardgaande koste en implementeringskwessies kan proewe wat tydens hierdie fase uitgevoer word, beïnvloed. Proewe moet veilig en doeltreffend wees en onder die medisyne-ontwikkelingsbegroting voltooi word, met behulp van 'n metodologie om te verseker dat die geneesmiddel so goed moontlik werk vir sy beoogde doel. Hierdie streng proses moet korrek opgestel word en baie vrywilligers inskryf om effektief te wees.

Kliniese proewe – Dosis-eskalasie, enkel-stygende en meervoudige dosis-studies

Behoorlike dosering bepaal medikasie doeltreffendheid, en kliniese proef ondersoek dosis eskalasie, enkel stygende, en veelvuldige dosis studies om die beste pasiënt dosis te bepaal.

Fase I – Gesonde Vrywilligerstudie

Hierdie fase is die eerste keer dat die middel op mense getoets word, minder as 100 vrywilligers sal navorsers help om die veiligheid en farmakokinetika, absorpsie, metaboliese en eliminasie-effekte op die liggaam te bepaal, sowel as enige newe-effekte vir veilige dosisreekse.

Fase II en Fase III – Studies in pasiëntbevolking

Fase II beoordeel dwelmveiligheid en doeltreffendheid in 'n bykomende 100-500 pasiënte, wat 'n placebo of standaardmedikasie kan ontvang wat voorheen as behandeling gebruik is. Ontleding van optimale dosissterkte help om skedules te skep terwyl nadelige gebeurtenisse en risiko's aangeteken word. Fase III neem 1 000-5 000 pasiënte in, wat medikasie-etikettering en instruksies vir behoorlike dwelmgebruik moontlik maak. Fase III-proewe vereis uitgebreide samewerking, organisasie en koördinering en regulering van die Onafhanklike Etiekkomitee (OVK) of Institusionele Hersieningsraad (IRB) in afwagting van volskaalse produksie na geneesmiddelgoedkeuring.

Biologiese monsterversameling, Berging & Versending

Tydens kliniese proewe word biologiese monsters versamel, gestoor en vanaf toetsterreine gestuur volgens globale standaarde en regulasies. Vervoerhouers van biologiese monsters kan droë yspakke of ander temperatuurstabiliserende metodes insluit. Verskillende vereistes geld vir verskillende tipes biologiese monsters.

Farmakodinamiese (PD) Biomerkers

PD-biomerkers is molekulêre aanwysers van die geneesmiddel se uitwerking op die teiken menslike area, en verbind geneesmiddelregime en biologiese reaksies. Hierdie data kan help om rasionele kombinasies van geteikende middels te kies en geneesmiddelregimes en -skedules te optimaliseer. Rasionaliteit en hipotese-toetskrag word verhoog deur die gebruik van PD-eindpunte in menslike proewe.

Farmakokinetiese Analise

Farmakokinetiese analise is 'n eksperimentele proef wat die teorie bepaal van hoe 'n nuwe middel in die menslike liggaam optree. Die volume van verspreiding, opruiming en terminale halfleeftyd word gedefinieer deur kompartementele modellering.

Bioanalitiese metode ontwikkeling en validering

Bioanalitiese metodes bespeur analiete en metaboliete soos geneesmiddel- of biomerkers in biologiese of menslike monsters om geneesmiddeldoeltreffendheid en -veiligheid te bepaal. Die volledige bioanalitiese toets bestaan ​​uit monsterversameling, skoonmaak, ontleding en opsporing.

Geneesmiddel (analiet) en metabolietstabiliteit in biologiese monsters

Stabiliteit is belangrik in die bepaling van menslike geneesmiddeldoeltreffendheid, en biologiese monsters word vereis. Geneesmiddel- en geneesmiddelmetaboliete is vatbaar vir afbraak, wat die geneesmiddelkonsentrasie oor die leeftyd van die geneesmiddel kan verlaag.

Bloed-, plasma-, urine- en ontlasting-monsterontleding vir geneesmiddel en metaboliete

Biologiese monsters wat in kliniese proewe gebruik word, sluit in bloed, plasma, urine en ontlasting om verskeie eienskappe en effekte van die geneesmiddel en sy metaboliete op mense te bepaal en te ontleed.

Pasiëntbeskerming & # 8211 GCP, HIPAA, & Ongunstige gebeurtenis verslagdoening

Menslike pasiënte moet altyd tydens kliniese proewe beskerm word, en Goeie Kliniese Praktyke (GCP), die Wet op Gesondheidsversekering oordraagbaarheid en aanspreeklikheid (HIPAA), en verslagdoening van ongewenste gebeurtenisse aan IEC/IRB reguleer en verseker hul veiligheid.


Assays tydens geneesmiddelontdekking - Biologie

Komplekse fenotipiese beeldtoetse het ten doel om die biologie van belang na te boots.

Sellulêre profilering in hoë-inhoud toetse verbeter beskrywing van saamgestelde aksies.

Assessering van sellulêre vingerafdrukke van verbindings kan geneesmiddelontwikkeling transformeer.

Masjienleertoepassings maak ontleding van multidimensionele datastelle moontlik.

Terwyl teikengebaseerde geneesmiddelontdekkingstrategieë staatmaak op die presiese kennis van die identiteit en funksie van die geneesmiddelteikens, laat fenotipiese geneesmiddelontdekking (PDD)-benaderings die identifikasie van nuwe geneesmiddels gebaseer op kennis van 'n duidelike fenotipe toe. Beeldgebaseerde hoë-inhoud-sifting (HCS) is 'n kragtige PDD-strategie wat klein-molekule-effekte kenmerk deur die kwantifisering van kenmerke wat sellulêre veranderinge tussen of binne selpopulasies uitbeeld, en sodoende waardevolle datastelle vir daaropvolgende data-analise genereer. Hierdie data kan egter kompleks wees, wat beeldontleding van groot HCS-veldtogte uitdagend maak. Tegnologiese vooruitgang in beeldverkryging, verwerking en analise sowel as masjienleer (ML) benaderings vir die ontleding van multidimensionele datastelle het HCS as 'n lewensvatbare tegnologie vir klein-molekule geneesmiddelontdekking gemaak. Hier bespreek ons ​​HCS-konsepte, huidige werkvloeie sowel as geleenthede en uitdagings van beeldgebaseerde fenotipiese sifting en data-analise.

Sean Lin is 'n postdoktorale navorser in die 'Assay Development and Screening Platform'-groep, Helmholtz Zentrum München. Hy het biologie aan die Heinrich Heine Universiteit van Düsseldorf (HHU) gestudeer en is met sy PhD deur die Max Planck Instituut vir Biochemie op die gebied van molekulêre selbiologie toegeken. Hy is verantwoordelik vir biochemiese sowel as selgebaseerde toetsontwikkeling, insluitend hoë-inhoud beeldingtoets gedurende die vroeë fase van geneesmiddelontdekking.

Kenji Schorpp is 'n senior personeelwetenskaplike in die 'Assay Development and Screening Platform'-groep, Helmholtz Zentrum München. Hy is verantwoordelik vir toetsontwikkeling en sifting van vroeë geneesmiddelontdekkingsprojekte, insluitend hoë-inhoud sifting, met spesiale belangstelling om die ubiquitin-stelsel te teiken. Voor dit het hy as 'n nadoktorale gewerk en is sy PhD toegeken deur die Max Planck Institute of Biochemistry, wat gefokus het op ubiquitin en ubiquitin-agtige proteïene.

Ina Rothenaigner is 'n nadoktorale in die 'Assay Development and Screening Platform'-groep, Helmholtz Zentrum München. Sy het biologie aan die Ludwig Maximilians Universiteit studeer, waar sy met haar PhD in die veld van virologie (MIV) toegeken is. Na 'n postdoktoraat in die veld van sebravis neurogenetika by Helmholtz en die CNRS/Frankryk, het sy by die Assay Development and Screening Platform Group aangesluit. Sy het ondervinding in selgebaseerde toetse en is verantwoordelik vir hoë-deurset- en hoë-inhoud siftingsanalise.

Kamyar Hadian is die hoof van die 'Assay Development and Screening Platform'-groep by die Helmholtz Zentrum München. Hy het 'n beduidende ervaring in biochemiese en fenotipiese sel-gebaseerde toetse vir hoë deurset en hoë inhoud sifting. Voor hierdie pos was hy 'n postdoktor wat selseining nagevors het, na aanleiding van sy PhD in MIV-navorsing, albei by die Helmholtz Zentrum München. Hy het biologie aan die Tegniese Universiteit München gestudeer.


Toegang opsies

Kry volledige joernaaltoegang vir 1 jaar

Alle pryse is NETTO pryse.
BTW sal later by die betaalpunt bygevoeg word.
Belastingberekening sal tydens afhandeling gefinaliseer word.

Kry tydsbeperkte of volledige artikeltoegang op ReadCube.

Alle pryse is NETTO pryse.


Metodes wat gebruik word in dwelmontdekking en -ontwikkeling

Die metode van keuse in dwelm-ontdekking in die afgelope twee dekades was teikengebaseerde sifting. Nou begin fenotipiese sifting na vore kom as 'n voorkeurmetode.


Fenotipiese sifting behels die sifting van 'n stel kandidaatmolekules wat getoets word op grond van die vermoë daarvan om effekte uit te oefen. Byvoorbeeld, die toets van 'n molekule in selle, geïsoleer van weefsels of organe, of diere, om te toets of molekule newe-effekte uitoefen. Histories het fenotipiese sifting positiewe eienskappe gehad in die identifisering van die eerste-in-klas-middels, terwyl teikengebaseerde sifting meer beste-in-klas-middels opgelewer het wat te wyte was aan die gebrek aan vooroordeel wanneer 'n geneesmiddel se werkingsmeganisme ontdek is. Maar, fenotipiese toetse is meer van 'n voordeel met betrekking tot die identifikasie van sel aktiewe verbindings, sê professor Elizabeth Sharlow van die Universiteit van Virginia Skool vir Geneeskunde, Virginia, VSA.

&ldquoFenotipiese toetse is uitdagend vanweë die behoefte aan, dikwels, ingewikkelde stroomafwaartse teikendekonvolusie-metodologieë,&rdquo verduidelik professor Elizabeth Sharlow van die Universiteit van Virginia School of Medicine, &ldquoEn dit is ook, in sommige gevalle, meer tydrowend om te implementeer wat in die lang termyn kan deurset beïnvloed. Dit alles moet in ag geneem word in die algehele siftingsparadigma en koste van die siftingstrategie.&rdquo

Die genomiese rewolusie in die laaste paar dekades het veroorsaak dat farmaseutiese maatskappye en universiteite die &lsquotarget-first&rsquo-benadering aangeneem het. Met ander woorde, hul metode van verwysing in die geneesmiddelontdekkingsproses was waar 'n molekule wat bekend is dat dit deurslaggewend is in 'n siekteproses, gebruik word vir die sifting van groot saamgestelde biblioteke in die soeke na 'n &lsquomatch&rsquo a.k.a die kandidaatgeneesmiddel. Een voordeel van hierdie metode is dat baie miljoene dwelm-agtige molekules gekeur kan word, met die wete dat as jy 'n pasmaat kry, jy reeds 'n potensiële dwelm het. &ldquoTeikengebaseerde toetse is in die algemeen minder tydrowend om te implementeer, maar word soms uitgedaag deur standaarduitlesings soos ensiematiese aktiwiteit, &rdquo sê professor Sharlow, &ldquoDan is daar meer gesofistikeerde teikengebaseerde toetse soos dié wat op proteïen-proteïeninteraksies gebaseer is, wat, hoewel meer fisiologies interessant, baie meer ingewikkeld is om te implementeer.&rdquo

Oor die algemeen is beide siftingstrategieë belangrik en nodig vir chemiese ondersoek en die geneesmiddelontwikkelingsproses. Daar is egter steeds 'n effense toename in fenotipiese sifting. &ldquoOm dwelmontdekkingsskerms binne die sellulêre konteks te doen, beantwoord reeds 'n paar van die vrae wat die geneesmiddelontdekkingsproses later beswadder, soos &lsquohoe maak ek dit meer oplosbaar?&rsquo, of &lsquohoe kry ek dit in selle?&rsquo&rdquo verduidelik dr Mike Howell , Hoof van Sifting by die Francis Crick Instituut.

&ldquoAs jy 'n medisinale chemikus soek, dink jy waarskynlik korrek dat jy jou magie kan gebruik om dinge wat nie baie oplosbaar is of nie baie goed is om in selle te kom nie, beter te maak om in selle te kom. Maar daar is 'n gevoel dat as jy begin met 'n goeie sel-gebaseerde toets, dan het jy 'n paar van daardie hindernisse inherent deur ontwerp.


Kyk die video: Dr Milika Asanin - Prevencija je najbolji lek protiv C-19 - Broj zarazenih vrtoglavo raste! (September 2022).